重金屬檢查法

1、重金屬檢查法,2009-07-27,重金屬檢查法原理：,重金屬系指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質。在藥典規(guī)定的情況下，在弱酸溶液中，如：Ag+ 、 Pb++ 、 Bi+++ 、Cu++ 、 Cd++ 、 Sb+++ 、 As+++ 、 Sn++ 、 Ni++ 、 Co++ 、 Zn++ 、Hg++ 等金屬均能生成不溶性硫化物。在堿性溶液中，如：Hg++ 、 Pb++ 、Bi+++ 、Cd++ 、C

2、u++ 、Ni++ 、Co++ 、Zn++ 、Fe+++ Mn++ 等金屬均能生成不溶性硫化物。,重金屬檢查法方法：,由于實驗條件不同,分為4種檢查方法。第一法適用于供試品不經有機破壞，在酸性溶液中進行顯色的重金屬檢查。第二法適用于供試品需灼燒破壞，取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，經處理后在酸性溶液中進行顯色的重金屬檢查。,重金屬檢查法方法：,第三法適用于供試品能溶于堿而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的藥品中的重金屬。第四法

3、用微孔濾膜過濾，使重金屬硫化物沉淀富集成色斑，用于有色溶液或重金屬限度較低的品種。檢查時，應根據藥典品種項下規(guī)定的方法選用。,第一法：,除另有規(guī)定外，取25ml納氏比色管兩支，甲管中加標準鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml后，加水或各藥品項下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml ;乙管中加入按各藥品項下規(guī)定的方法制成的供試液25ml；,第一法：,若供試液帶顏色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，使之與乙管一致；

4、再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深。,第一法：如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使顏色一致時（即對照管）,可取該藥品項下規(guī)定的二倍量的供試品和試液，加水或該藥品項下規(guī)定的溶劑使成30ml，將溶液分成甲乙二等份，乙管中加水或該藥品項下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml；,第一法：如在甲管中滴加稀焦糖溶液仍不能使顏色一致時（即對照管）,甲管中加入硫代乙酰胺試液2

5、ml，搖勻，放置2分鐘，經濾膜(孔徑3μm)濾過，然后甲管中加入標準鉛溶液一定量，加水或該藥品項下規(guī)定的溶劑使成25ml；再分別在乙管中加硫代乙酰胺試液2ml，甲管中加水2ml，照上述方法比較，即得。,第一法：供試品如含高鐵鹽影響重金屬檢查時,可取該藥品項下規(guī)定方法制成的供試溶液，加抗壞血酸0.5～1.0g，并在對照液中加入相同量的抗壞血酸，再照上述方法檢查。,第二法：,除另有規(guī)定外，取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，加硝酸0.5ml，蒸干，

6、至氧化氮蒸氣除盡后;（或取供試品一定量，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml，使恰濕潤，用低溫加熱至硫酸除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，在500～600℃熾灼使完全灰化），放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，,第二法：,再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加水稀釋成25ml；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，

7、加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標準鉛溶液一定量，再用水稀釋成25ml；照上述第一法檢查，即得。,第三法：,除另有規(guī)定外，取供試品適量，加氫氧化鈉試液5ml與水20ml溶解后，置納氏比色管中，加硫化鈉試液5滴，搖勻，與一定量的標準鉛溶液同樣處理后的顏色比較，不得更深。 第四法：微孔濾膜過濾法。,標準鉛溶液的制備:,稱取硝酸鉛0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml與水50ml溶

8、解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當于10μg的Pb）。配制與貯存用的玻璃容器均不得含鉛。,重金屬檢查法的記錄要求：,1、必須記錄所采用的方法。2、供試品的取樣量3、標準鉛溶液取用量 4、乙管與甲管比較，乙管中顯出的顏色淺于甲管，判為符合規(guī)定。,重金屬檢查法的計算：,1、標準鉛溶液計算：1mol硝酸鉛[Pb(NO3)2]的質量為3

9、31.2g，含鉛（Pb）為207.2g。稱取硝酸鉛0.160g配制成1000ml貯備液，含Pb量為： 207.2×0.160×1000 331.2×1000 =0.1000mg/ml貯備液依法稀釋10倍后，所得標準鉛溶液濃度為每1ml含10μg的Pb。,重金屬檢查法的計算：,2、重金屬限量計算：進行檢查時，如取供試品1.0g，與標準鉛溶液2.0ml制成的對照液

10、比較，計算重金屬的限量。標準鉛溶液體積(ml)× 標準鉛溶液濃度(g/ml)× 100% 供試品量（g)= 2.0×0.000010×100% = 0.0020% = 百萬分之二十 1.0,重金屬檢查法的計算：,3、標準鉛溶液取樣量計算：根據取供試品量及限量計算。如取供試品2.0g，依法檢查，規(guī)定含重金屬

11、不得過百萬分之五，應取標準鉛溶液（10μgPb/ml）多少毫升？重金屬限量×供試品重（g） = 0.000005 × 2.0 = 1.0ml 標準鉛溶液濃度(g/ml) 0.000010,實 驗 舉 例,例如葡萄糖注射液中重金屬 檢查：取本品適量（約相當于葡萄糖3g），必要時，蒸發(fā)至約20ml，放冷，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量使成25ml，依法檢查（附錄Ⅷ H第一法

12、），按葡萄糖含量計算，含重金屬不得過百萬分之五。計算標準鉛溶液取用量V = 0.000005 × 3 = 1.5ml 0.000010,實 驗 舉 例,【檢查】重金屬 取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，依法檢查（中國藥典2005年版二部附錄VIIIH第二法），與標準鉛溶液 ml制成的對照液比較，  （規(guī)定含重金屬不得過百萬分之十） 結論：,實 驗 舉 例

13、,氯化鈉注射液重金屬檢查:　取本品50ml，蒸發(fā)至約20ml，放冷，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量使成25ml，依法檢查（附錄Ⅷ H第一法），含重金屬不得過千萬分之三。計算標準鉛溶液取用量,實 驗 舉 例,維 生 素 C重金屬檢查:重金屬　取本品1.0g，加水溶解成25ml，依法檢查（附錄Ⅷ H第一法），含重金屬不得過百萬分之十。V = 0.000010 × 1.0 = 1.0ml

14、 0.000010,重金屬檢查注意事項：,1、標準鉛溶液應在臨用前精密量取標準鉛貯備溶液新鮮配制，以防止鉛的水解而造成誤差。配制與貯存標準鉛溶液使用的玻璃容器，均不得含有鉛。 2、硫代乙酰胺試液與重金屬反應的最佳pH值是3.5 ，故配制醋酸鹽緩沖液（ pH 3.5 ）時，要用pH計調節(jié)。硫代乙酰胺試液加入量以2.0ml時呈色最深。,重金屬檢查注意事項：,第四法中的檢測范圍為2-5μg的鉛，且因體積小，所以硫代乙酰胺試液的用量

15、為1.0ml 。硫代乙酰胺試液顯色劑的最佳顯色時間為2分鐘，除第四法由于檢測限量低，且為了方便過濾，顯色時間為10分鐘外，第一、二法均為放置2分鐘。,重金屬檢查注意事項：,3、為了便于目視比較，第一、二和三法中的標準鉛溶液用量以2.0ml（相當于20μg的鉛）為宜，小于1.0ml 或大于3.0ml ，呈色太淺或太深，均不利于目視比較。4、如需將熾灼殘渣項下遺留的殘渣作重金屬檢查時，則熾灼溫度必須控制在500-600℃ 。,重金屬檢查

16、注意事項：,實驗證明，熾灼溫度在700℃以上時，多數重金屬都有不同程度的損失。以鉛為例，在700℃經6小時熾灼，損失達68%。某些供試品（如安乃近，諾氟沙星等）在熾灼時能腐蝕瓷坩堝而帶入較多的重金屬，應改用石英或鉑坩堝操作。,重金屬檢查注意事項：,5、熾灼殘渣加硝酸處理，必須蒸干，至氧化氮蒸汽除盡，否則會使硫代乙酰胺試液水解生成的硫化氫，而氧化析出乳硫，影響檢查。蒸干后殘渣加鹽酸處理的目的，是使重金屬轉化為氯化物，可以在水中溶解。為

17、了避免殘留的鹽酸影響供試品的酸度，要加水15ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，此時再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，即可保證供試液的pH在 3.5 左右。,重金屬檢查注意事項：,6、微量高鐵離子的存在，在弱酸性溶液中會使硫代乙酰胺水解生成的硫化氫進一步氧化析出乳硫，產生渾濁而影響重金屬的比色，因此必須除去。藥典中加入抗壞血酸使微量高鐵還原成亞鐵離子，因亞鐵不干擾檢查。,重金屬檢查注意事項：,7、如供試品本身能生成不溶性的硫化物時

18、，則影響重金屬檢查。為了避免這些干擾，一般均加入其它試劑如氰化鉀，灑石酸等，使能干擾的金屬離子，產生穩(wěn)定的絡合物。,重金屬檢查注意事項：,如硫酸鋅和葡萄糖酸銻鈉中鉛鹽檢查，即在堿性溶液中加入氰化鉀，或在中性溶液中加入灑石酸，使鋅離子或銻離子生成穩(wěn)定的絡合物后，用硫化鈉為試劑進行測定。注意：使用氰化鉀試液，不能用移液管吸取，可用量筒或橡皮頭吸管吸取，測定過的溶液不能倒入酸缸中。,實 驗 舉 例,葡萄糖酸銻鈉 :鉛鹽　取本品1.0g，加