牛病毒性腹瀉病毒抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立及臨床血清學(xué)調(diào)查.pdf

1、牛病毒性腹瀉?。˙VD），是由牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）引起的一種疾病，又稱黏膜病。牛病毒性腹瀉病毒可以感染各個(gè)年齡段的牛，在全世界廣泛分布。其臨床癥狀主要表現(xiàn)為腹瀉，急、慢性黏膜病，持續(xù)性感染與免疫耐受，免疫抑制，母畜流產(chǎn)、死胎和畸胎等。急性感染可表現(xiàn)為短暫的腹瀉或者肺炎，通常呈群組暴發(fā)流行。急性型通常有出血綜合癥，死亡率高。犢牛感染該病毒通常比較溫和且不表現(xiàn)臨床癥狀。由于其能引起繁殖系統(tǒng)病變并能形成持續(xù)感染，因而對(duì)養(yǎng)牛業(yè)有著重要的

2、影響。
　　 BVDV與豬瘟病毒（CSFV）、羊邊界病病毒（DBV）及部分未分類瘟病毒同屬于黃病毒科瘟病毒屬，均為單股正鏈RNA病毒。瘟病毒屬成員中的病毒過(guò)去被認(rèn)為是宿主特異性的，但后來(lái)的研究表明BVDV與DBV可以感染更廣泛的宿主，它們不但可以感染牛和羊，并且可以感染包括豬在內(nèi)的多種偶蹄類動(dòng)物。BVD具有特征性的臨床癥狀的較少，在實(shí)際生產(chǎn)中常常不易被診斷，加之本病的病死率不高，未能引起人們的足夠重視而忽視本病的存在，因此各牛場(chǎng)

3、牛群缺乏系統(tǒng)的監(jiān)測(cè)防制措施，這也是導(dǎo)致我國(guó)牛群BVDV感染日益擴(kuò)大的原因之一。由于BVDV對(duì)牛能形成持續(xù)性感染，并且其對(duì)養(yǎng)牛業(yè)危害極大，因此對(duì)牛群進(jìn)行普查，檢測(cè)其感染情況，淘汰感染個(gè)體，成為本病防制的重要環(huán)節(jié)。
　　 BVDV的非結(jié)構(gòu)蛋白NS3在瘟病毒屬中非常保守，是一種免疫優(yōu)勢(shì)蛋白，在自然感染或者弱毒活疫苗免疫后的動(dòng)物體內(nèi)均可檢出針對(duì)該蛋白的抗體。本實(shí)驗(yàn)室篩選出BVDV NS3蛋白中有免疫反應(yīng)性的重組片段（rBVDV-NS3b

4、）作為包被抗原，建立了一個(gè)BVDV抗體檢測(cè)的間接ELISA方法，與進(jìn)口同類試劑盒的符合率為91.3％。
　　 為了解黑龍江省內(nèi)BVDV的感染情況，用本實(shí)驗(yàn)室建立的BVDV NS3蛋白抗體間接ELISA檢測(cè)方法對(duì)黑龍江省內(nèi)不同地區(qū)的4個(gè)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)2006年~2008年的1388份血清樣本進(jìn)行BVDV抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示4個(gè)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)該3年平均BVDV血清陽(yáng)性率分別為54.66％、57.68％、62.90％，表明在黑龍江省奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)中