PEASC表達(dá)載體構(gòu)建及其農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究利用從辣椒上克隆的決定辣椒倍半萜植保素合成的關(guān)鍵酶-倍半萜合成酶(pepper epi-aristolochene synthase)基因(PEASC),構(gòu)建適合水稻轉(zhuǎn)化的表達(dá)載體,在建立起適合于供試水稻品種的農(nóng)桿菌介導(dǎo)的高效遺傳轉(zhuǎn)化體系基礎(chǔ)上,進(jìn)行PEASC的水稻遺傳轉(zhuǎn)化,獲得轉(zhuǎn)基因水稻植株,這為進(jìn)一步開展PEASC基因在水稻等主要作物抗病基因工程上可能利用價(jià)值評價(jià)的研究提供了重要材料.主要研究結(jié)論如下:(1)從三種誘導(dǎo)培養(yǎng)基(

2、即NB/MS/2N6)中篩選出適合于供試水稻品種的培養(yǎng)基NB;以NB為基本培養(yǎng)基,進(jìn)一步篩選出分化培養(yǎng)基并對愈傷分化時(shí)間作了較為系統(tǒng)的研究,在此基礎(chǔ)上建立起適合于該研究供試水稻品種的遺傳轉(zhuǎn)化體系.(2)通過pBSK-PEASC的酶切、電泳、目的片段回收,將克隆在質(zhì)粒pBSK上的目的基因PEASC克隆到雙元表達(dá)載體pGA1621的相應(yīng)酶切位點(diǎn)上,構(gòu)建出pGA1621-PEASC表達(dá)載體.凍溶法將表達(dá)載體導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌EHA105,PCR篩

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