小麥再生體系及農(nóng)桿菌介導的遺傳轉化研究.pdf

1、在小麥遺傳轉化中，幼胚及其愈傷組織是目前應用得最成功的外植體。但是幼胚的取材受季節(jié)限制，因而嚴重限制了小麥轉基因研究的深入開展。而且，目前在小麥遺傳轉化中多以抗抗生素和除草劑類基因為選擇標記，其對環(huán)境和人類具有潛在的危險，已經(jīng)對轉基因小麥的應用前景產(chǎn)生了一定影響。因此拓寬轉基因小麥的受體范圍和使用安全標記基因應用于轉基因研究勢在必行。為了建立一套高效的再生體系，本文以華中和長江中下游地區(qū)推廣的小麥品種為實驗材料，系統(tǒng)研究了不同小麥品種幼

2、穗和成熟胚愈傷組織誘導和分化再生的特點；并以小麥幼胚為外植體，研究了農(nóng)桿菌介導的以安全標記基因manA為選擇標記的遺傳轉化系統(tǒng)。主要結果如下：
　　 1、研究了10個小麥品種幼穗不同節(jié)段的外植體，在不同誘導和分化條件下幼穗愈傷組織誘導再生頻率及其差異。結果表明中部穗段是最好的外植體，L7V誘導培養(yǎng)基和L7Z分化培養(yǎng)基是最好的誘導和分化培養(yǎng)基；愈傷組織誘導、愈傷組織生根和成苗均具有明顯的基因型效應，但三者之間沒有顯著的相關性。揚麥

3、158和華麥13具有較高的分化再生能力，是遺傳轉化的良好受體。
　　 2、研究了3個小麥品種成熟胚的外植體，在不同誘導和分化條件下的離體培養(yǎng)再生頻率。結果顯示基因型是影響小麥成熟胚愈傷組織誘導和分化再生頻率的重要因素，不同小麥品種在愈傷組織誘導和分化能力上均達到了顯著差異，華麥9號具有較高的分化再生能力，是遺傳轉化的良好受體；在誘導培養(yǎng)基中適當添加ABA和AgN03，可促進胚性愈傷組織形成并提高再生分化率；分化培養(yǎng)前適當?shù)母稍锾?/p>