A型流感病毒NS1蛋白的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究.pdf

1、A型流感病毒(influenza A virus)屬于正粘病毒科,為單股負(fù)鏈RNA病毒,其基因組由8個(gè)節(jié)段組成,編碼11種蛋白質(zhì)。它能引起急性呼吸道傳染病,具有傳染性強(qiáng),發(fā)病率高,容易引起流行或大流行等特點(diǎn)。A型流感病毒是重要的人畜共患病病原,人畜共患的特征使其有產(chǎn)生大流行的潛力。20世紀(jì)至今先后爆發(fā)了多次全球性大流感,對(duì)人類的生命健康和社會(huì)生活形成了巨大的威脅。NS1(non-structural protein1)是A型流感病毒的非

2、結(jié)構(gòu)蛋白,是一種多功能調(diào)節(jié)蛋白,在調(diào)節(jié)流感病毒的致病性及毒力方面發(fā)揮著重要作用。NS1蛋白從病毒和宿主兩個(gè)方面來(lái)調(diào)節(jié)病毒的致病性和毒力。在病毒方面,NS1蛋白可以通過(guò)增強(qiáng)病毒mRNA的翻譯來(lái)提高病毒的復(fù)制,從而直接增強(qiáng)病毒抵抗宿主的抗病毒反應(yīng)的能力;在宿主方面,NS1蛋白可以通過(guò)抑制宿主細(xì)胞蛋白的合成、拮抗干擾素的產(chǎn)生以及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等方式調(diào)節(jié)機(jī)體的抗病毒反應(yīng),間接地增強(qiáng)病毒的致病性。NS1蛋白的這些功能依賴于其非特異性地與雙鏈RNA(

3、dsRNA)和特異性地與目標(biāo)蛋白結(jié)合的能力。NS1蛋白之所以是一個(gè)多功能蛋白是因?yàn)榈鞍咨洗嬖诙鄠€(gè)功能位點(diǎn),這些功能位點(diǎn)又與結(jié)構(gòu)相對(duì)應(yīng),即結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)。解析NS1蛋白的三維結(jié)構(gòu)具有重要意義,能夠進(jìn)一步解釋它的生物學(xué)功能,并對(duì)相關(guān)的藥物設(shè)計(jì)起指導(dǎo)作用。
　　 本論文采用原核表達(dá)系統(tǒng)大量表達(dá)可溶的NS1蛋白,運(yùn)用親和層析、凝膠過(guò)濾層析等手段純化蛋白,通過(guò)篩選以及優(yōu)化蛋白質(zhì)的結(jié)晶條件,成功得到NSl蛋白的晶體。全長(zhǎng)NS1蛋白三維結(jié)構(gòu)