實驗性末端回腸炎集合淋巴結及其淋巴細胞增殖與凋亡的研究.pdf

1、目的:本研究采用回腸末端-盲腸側側吻合術建立實驗性末端回腸炎動物模型,觀察發(fā)病過程中回腸末端集合淋巴結(PP結)及其淋巴細胞增殖和凋亡的情況;探討PP結及其淋巴細胞在發(fā)病過程中的作用,完善末端回腸炎的發(fā)病機制,為末端回腸炎的臨床診治及科研提供一定的指導作用。
　　方法:選用清潔級SD大鼠,隨機分為造模組、縫線組、對照組,每組30只,分別予以回腸末端-盲腸側側吻合術、回腸末端縫手術線、僅麻醉不手術的處理。術后2、4、8周分批處死大鼠

2、,取末端回腸組織,分別觀察其病理學改變,及PP結及其淋巴細胞增殖和凋亡的情況并分析。
　　結果:
　　1.末端回腸組織病理學改變:造模組術后2周為急性炎癥的表現(xiàn),炎癥僅限于粘膜層,粘膜以中性粒細胞浸潤為主,術后4周炎癥漸加深,炎癥細胞由中性粒細胞漸轉為淋巴細胞浸潤為主,充血出血的急性炎癥表現(xiàn)漸減輕,而病變侵及粘膜下層同時伴有少量成纖維細胞增生,至第8周時為典型的慢性炎癥的表現(xiàn),粘膜以淋巴細胞浸潤為主。
　　2.PP結及

3、其淋巴細胞增殖和凋亡的情況
　　2.1PP結數(shù)量與集合淋巴結淋巴細胞總數(shù)的變化:與對照組相比,縫線組在第2周和第4周時,PP結個數(shù)有少量增加(P2周>0.05、P4周<0.05),第8周時,PP結個數(shù)與對照組相似(P8周>0.05)。而造模組在第2周和第4周時,PP結個數(shù)顯著增加(P2周<0.05、P4周<0.01),第8周時,PP結個數(shù)少量增加(P8周>0.05)。PP結淋巴細胞總數(shù)的變化情況與PP結個數(shù)相似。
　　2.2

4、PP結淋巴細胞凋亡率和增殖率的變化:與對照組相比,縫線組和造模組在第2周和第4周時,PP結淋巴細胞少量細胞凋亡,兩者相比無差異性(P2周、4周>0.05),第8周時,縫線組和造模組PP結淋巴細胞均發(fā)生大量細胞凋亡(P8周<0.01),兩者相比具有顯著性差異(P<0.01)。PP結淋巴細胞數(shù)的增殖情況與PP結淋巴細胞總數(shù)增加情況相似。
　　2.3凋亡DNA梯度條帶的變化:對照組2、4、8周,縫線組2、4周以及造模組2、4周大鼠回腸P

5、P結淋巴細胞小分子DNA瓊脂糖凝膠電泳結果中未見200bp小分子DNA條帶,而縫線組8周,造模組8周大鼠回腸PP結淋巴細胞小分子DNA表現(xiàn)為典型的“梯形”(200bp、400bp)條帶,但造模組200bp條帶較縫線組為明顯,表明造模組的細胞凋亡更為顯著。
　　2.4PP結淋巴細胞凋亡核染色(hoechst33258)的變化:與對照組相比,縫線組和造模組在第2周和第4周時,PP結淋巴細胞染核細胞數(shù)明顯增加,兩者相比具有顯著性差異(P

6、<0.05),與PP結淋巴細胞總數(shù)增加情況相似。第8周時,縫線組和造模組PP結淋巴細胞均發(fā)生大量細胞凋亡,與對照組相比具有顯著性差異(P<0.05)。而且造模組出現(xiàn)明顯的凋亡核形態(tài),核呈固縮狀態(tài),可見新月狀核。
　　結論:
　　1.在實驗性末端回腸炎造模2-8周內,末端回腸粘膜炎癥急性期以中性粒細胞浸潤為主,慢性期以淋巴細胞浸潤為主。
　　2.在實驗性末端回腸炎造模2-8周內,PP結及其淋巴細胞呈現(xiàn)先增殖為主、后凋亡為