BMMSC對實驗性結腸炎大鼠淋巴細胞增殖影響的機制研究.pdf

1、潰瘍性結腸炎(Ulcerative colitis，UC)是一種病因尚不明確的非特異性炎癥性疾病，病程呈慢性且容易復發(fā)，遷延不愈。目前治療方法單一且效果欠佳。隨著我國該病的發(fā)病率逐漸升高的趨勢，探索新型的治療方法勢在必行。國外早先初次報道造血干細胞治療非霍奇金淋巴瘤合并潰瘍性結腸炎后，患者UC的癥狀得到良好緩解。而近年來發(fā)現，骨髓間充質干細胞因其極低的免疫原性和極強的免疫調節(jié)抑制能力成為治療更有力的候選者。但多方研究仍未就MSC發(fā)揮作用

2、的靶點及途徑等諸多問題達成一致。本實驗旨在討論PD-1通路在MSC對免疫系統(tǒng)特別是淋巴細胞數量方面的影響以佐證MSC發(fā)揮作用所通過的細胞接觸途徑。
　　 材料與方法
　　 建立DSS誘導的實驗性結腸炎模型，進行DAI臨床評分。用貼壁法培養(yǎng)獲得雄性SD大鼠的MSCs，連續(xù)傳代純化，并進行流式鑒定。從潰瘍性結腸炎模型大鼠的脾臟取出分離淋巴細胞，并用CFSE對其進行標記，將標記后的淋巴細胞分為AB兩組。MSC經致死量輻照后分為

3、AB兩組，A組加入PD-1及PDL-1抗大鼠抗體，B組加入等量的IgG同型抗體。將A組MSC與A組淋巴細胞按1∶3的比例共同培養(yǎng)，B組MSC與B組淋巴細胞按1∶3的比例共同培養(yǎng)。72小時后流式細胞儀計數AB兩組細胞560nm激發(fā)光下的數量。
　　 結果：
　　 1.模型大鼠表現出實驗性結腸炎的癥狀及表現，造模成功。
　　 2.MSC與脾淋巴細胞共同培養(yǎng)后，A組與B組脾淋巴細胞數量的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)