簡介：分類號BZ3三蘭＆絲三晝UDC重慶醫(yī)科大學(xué)密級碩士學(xué)位論文論文題目作者姓名抑癌基因DLC1過表達(dá)對結(jié)直腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為及WNT信號通路影響的初步研究王佳林指導(dǎo)教師姓名職稱、單位名稱單位名稱傅仲學(xué)教授重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院申請學(xué)位級別碩士學(xué)科、專業(yè)名稱外科學(xué)胃腸外科論文答辯年月2013年4月2013年4月目錄英漢縮略語名詞對照1中文摘要。3英文摘要8論文正文抑癌基因DLC1過表達(dá)對結(jié)直腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為及WNT信號通路影響的初步研究。13前言參考文獻(xiàn)。16第一部分DLC1基因重組慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建及其在結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞中的表達(dá)181材料和方法192結(jié)果333討論354結(jié)論。37參考文獻(xiàn)38第二部分DLC1基因的過表達(dá)對結(jié)直腸癌SW450細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。401材料和方法412結(jié)果。453討論494結(jié)論。50參考文獻(xiàn)5L第三部分DLC1基因過表達(dá)對結(jié)直腸癌細(xì)胞WNT信號通路基因表達(dá)的影響531材料和方法。542結(jié)果。563討論604結(jié)論62參考文獻(xiàn)。63

簡介：中圖分類號UDCR392610碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼Q三墊密級衄乳腺癌細(xì)胞中MKK7NEDDYLATION的鑒定與生物學(xué)意義研究IDENTIFICATIONOFMKK7NEDDYLATIONINBREASTCANCERCELLSANDITSBIOLOGICALSIGNIFICANCE作者姓名學(xué)科專業(yè)研究方向?qū)W院指導(dǎo)教師副指導(dǎo)教師朱婷基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)免疫學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院張紀(jì)巖教授王慶陽仍、I，論文答辯日期迦絲皇F6答辯委員會主席蘭堊蠆中南大學(xué)2013年5月乳腺癌細(xì)胞中MKK7NEDDYLATION的鑒定與生物學(xué)意義研究摘要C．JUN氨基末端激酶C．JUNN．TERMINALPROTEINKINASE，JNK家族是絲裂原活化蛋白激酶MITOGENACTIVATEDPROTEINKINASE，MAPK超家族的重要成員之一，在多種胞外刺激下，JNK通過經(jīng)典的MAPK蛋白序列磷酸化模式被活化，即MAPK激酶激酶MAP3K或MEKK磷酸化并活化MAPK激酶MAP2K或MKK，進(jìn)而MAP2K磷酸化并活化MAPK。JNK上游有兩個MAP2K，MKK4和MKK7。MKK4不僅能夠激活JNK，還可以激活P38，而MKK7只特異地激活JNK。我們以往的工作提示，靶向MKK7可實現(xiàn)對JNK途徑特異、有效的調(diào)節(jié)。有報道表明，MKK7可發(fā)生泛素化修飾而降解，但其它“泛素樣蛋白”是否可通過修飾MKK7調(diào)節(jié)JNK活性還未見報道。在“泛素樣蛋白“之中，NEDD8NEURALPRECURSORCELLEXPRESSEDDEVELOPMENTALLYDOWNREGULATED8的結(jié)構(gòu)與泛素最為接近，它與泛素具有80％的相似性，NEDD8特異地與底物共價結(jié)合的過程被稱為NEDDYLATION，其發(fā)生機(jī)制與泛素化相似，需要E1、E2、E3等酶介導(dǎo)的一系列酶促反應(yīng)，其中活化酶E1是由APPBPLAMYLOIDBETAPRECURSORPROTEINBINDINGPROTEIN1和UBA3UBIQUITINLIKEMODIFIERACTIVATINGENZYME3組成的異源二聚體。NEDDYLATION可以增強(qiáng)泛素連接酶活性，促進(jìn)細(xì)胞周期進(jìn)程。研究表明NEDDYLATION在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要促進(jìn)作用，然而其分子機(jī)制尚不清楚。本研究以乳腺癌細(xì)胞系MDAMB一231和MCF一7為主要研究模型，觀測了MKK7的NEDDYLATION情況，敲低UBA3／NEDD8對MAPK通路主要成分磷酸化的影響、對MKK7與JNK結(jié)合的影響、對MKK7激酶活性的影響，分析了MKK7和JNK在乳腺癌細(xì)胞惡性生長中發(fā)揮的作用，探討了MKK7NEDDYLATION的可能生物學(xué)意義和E3，實驗結(jié)果表明，在乳腺癌細(xì)胞中MKK7存在NEDDYLATIONSUMOYLATIONE3RANBP2RANBINDINGPROTEIN2可能在MKK7NEDDYLATION中發(fā)揮重要作用；NEDDYLATION不影響MKK7被上游激酶磷酸化，但抑制MKK7的激酶活性，進(jìn)而導(dǎo)致JNK磷酸化水平下II

簡介：目的1研究葡萄糖降解產(chǎn)物甲基乙二醛MGO、晚期糖基化產(chǎn)物AGEHSA對人腹膜間皮細(xì)胞HPMC分泌血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子VEGF、單核細(xì)胞趨化因子1MCP1的影響，參與的信號傳導(dǎo)通路及SIMVASTATIN的干預(yù)作用。探討MGO和AGEHSA對腹膜血管生成的影響及SIMVASTATIN的干預(yù)作用。2研究MGO和AGEHSA對HPMC細(xì)胞毒性、細(xì)胞增殖的影響及參與信號傳導(dǎo)通路。探討MGO和AGEHSA對腹膜間皮細(xì)胞的損傷的影響3研究AGEHSA對HPMC合成細(xì)胞外基質(zhì)的作用及參與信號傳導(dǎo)通路。探討AGEHSA對腹膜纖維化的影響。方法分別用不同濃度的MGO、AGEHSA、細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)通路抑制劑、抗氧化劑NAC及SIMVASTATIN作用于HPMC。L采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RTPCR、酶聯(lián)免疫吸附試驗EUSA檢測HPMC的VEGF、MCP1、纖維連接蛋白FN的基因和蛋白的表達(dá)。2采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧ROS水平。3采用免疫印跡WESTERNBLOT檢測MAPK信號傳導(dǎo)通路的激活。4采用相差顯微鏡下觀察HPMC細(xì)胞形態(tài)的改變。5采用MTT法檢測細(xì)胞活力。6采用3H胸腺嘧啶核苷滲入法檢測細(xì)胞增殖。結(jié)果LMGO和AGEHSA以時間和濃度依賴的方式刺激HPMC的VEGFMRNA和蛋白的表達(dá)，二者有協(xié)同作用。2AGEHSA以時間和濃度依賴的方式刺激HPMC的MCP1MRNA和蛋白的表達(dá)，MGO對HPMC的MCP1MRNA的表達(dá)則沒有明顯的影響。3MGO在刺激HPMC表達(dá)VEGF的同時，誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生、同時以時間依賴方式促進(jìn)P38MAPK磷酸化?？寡趸瘎㎞AC抑制細(xì)胞內(nèi)ROS后，P38MAPK磷酸化減少，同時VEGF表達(dá)也減少。P38MAPK特異性阻斷劑SB203580阻斷P38MAPK磷酸化后，VEGF表達(dá)也減少。4AGEHSA在刺激HPMC表達(dá)VEGF、MCP1的同時，誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生、同時以時間依賴方式促進(jìn)P42／44MAPK、P38MAPK磷酸化，用抗氧化劑NAC抑制細(xì)胞內(nèi)ROS后，P42／44MAPK、P38MAPK磷酸化減少，同時VEGF和MCP1表達(dá)也減少。MEK特異抑制劑PD98059抑制P42／44MAPK磷酸化后、或者P38MAPK特異性阻斷劑SB203580抑制P38MAPK磷酸化后，VEGF和MCP1表達(dá)也減少了。AGEHSA不激活JNK信號通路。5SIMVASTATIN能夠以劑量依賴的方式抑制AGEHSA誘導(dǎo)的MCP1表達(dá)，F(xiàn)PP和GGPP能夠逆轉(zhuǎn)SIMVASTATIN的作用，而SIMVASTATIN對VEGF表達(dá)則沒有明顯的作用。6高濃度的MGO160～320ΜM以濃度依賴的方式使細(xì)胞活力下降，形態(tài)發(fā)生改變和抑制細(xì)胞增殖，而低濃度的MGOO～80ΜM以及AGEHSA對細(xì)胞活力、形態(tài)和細(xì)胞增殖沒有明顯的影響。7AGEHSA以時間和濃度依賴的方式刺激HPMC合成FN。8PKC激動劑佛波酯PMA也能刺激HPMC合成FN，先用PMA耗竭細(xì)胞內(nèi)PKC或加用PKC抑制劑CALPHOSTINC后，可以抑制AGEHSA誘導(dǎo)的FN分泌。結(jié)論1MGO和AGEHSA部分通過誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS、激活P42／44MAPK、P38MAPK信號通路，促進(jìn)VEGF、MCP1表達(dá)，參與腹膜血管生成。二者有協(xié)同作用。2高濃度的MGO具有明顯細(xì)胞毒性和抑制細(xì)胞增殖作用，參與長期腹透腹膜間皮細(xì)胞的損傷。3AGEHSA部分通過活化PKC誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS的表達(dá)增加，促進(jìn)HPMC合成和分泌FN。參與腹膜纖維化。4SIMVASTATIN可以通過非降脂作用抑制AGEHSA誘導(dǎo)的MCP1表達(dá)，這提示他汀類藥物在防治CAPD患者長期腹透引起的腹膜血管生成、腹膜纖維化、腹膜失超濾方面有潛在的治療價值。

簡介：單位代碼單位代碼10475學(xué)號學(xué)號104753101204分類號分類號R392碩士學(xué)位論文免疫負(fù)調(diào)控因子TIPE2與核蛋白PCNP雙向調(diào)節(jié)在白血病細(xì)胞中的生物學(xué)作用學(xué)科、專業(yè)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)研究方向新型基因與免疫系統(tǒng)疾病申請學(xué)位類別醫(yī)學(xué)碩士申請人朱玉楠指導(dǎo)教師姬新穎教授二〇一三年五月CROSSTALKOFIMMUNOLOGICALNEGATIVEREGULATTIPE2NUCLEARPROTEINPCNPINLEUKEMIAPATHOGENESISADISSERTATIONSUBMITTEDTOTHEGRADUATESCHOOLOFHENANUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFTHEDEGREEOFMASTEROFMEDICINEBYZHUYUNANSUPERVISPROFJIXINYINGMAY2013

簡介：分類號學(xué)號M201175693學(xué)校代碼10487密級華中科技大學(xué)華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論碩士學(xué)位論文MBD2在急性白血病細(xì)胞中在急性白血病細(xì)胞中的表的表達(dá)及其沉默后對細(xì)胞生物學(xué)行為的及其沉默后對細(xì)胞生物學(xué)行為的影響影響學(xué)位申請人學(xué)位申請人原瑞鳳原瑞鳳學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液?。﹥?nèi)科學(xué)（血液?。┲笇?dǎo)教師指導(dǎo)教師周劍峰周劍峰教授教授答辯日期答辯日期2014年5月獨(dú)創(chuàng)性聲明獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知，除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本人將承擔(dān)本聲明引起的一切法律后果。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月

簡介：分類號UDC亭中斜往大署博士學(xué)位論文密級血液病患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性研究申請人姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)研究方向論文起止時間；趙智剛鄒萍教授內(nèi)科學(xué)血液病干細(xì)胞生物學(xué)2003年9月至2006年4月同濟(jì)醫(yī)學(xué)院研究生部二OO六年四月華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文摘要目的研究血液病患者骨鏈間充質(zhì)干細(xì)胞MESENCHYMALSTEMCELLS，MSCS的生物學(xué)特征及其支持造血的功能。方法獲取急性髓細(xì)胞性白血病ACUTEMYELOGENOUSLEUKEMIA，AML；N15、急性淋巴細(xì)胞自血病ACUTELYMPHOBLASTICLEUKEMIA，ALLN12、慢性粒細(xì)胞性白血病CHRONICMYELOGENOUSLEUKEMIA，CML；N20、非霍奇金淋巴瘤NONHODGKINLYMPHOMA，NHL；N21、霍奇金淋巴瘤HODGKINDISEASE，HD；N5、骨髓增生異常綜合征MYELODYSPLASTICSYNDROME，MDS；N7患者的骨髓MSCS，同時以8例正常人的骨髓MSCS作為正常對照。將獲取的MSCS用低血清培養(yǎng)液培養(yǎng)。瑞氏染色觀察形態(tài)，流式細(xì)胞術(shù)檢測其免疫表型，通過油紅0染色、YONKOSSA染色、RTPCR和WESTERN印跡檢測MSCS向脂肪、骨和神經(jīng)的分化。對不同來源血液病患者骨髓MSCS進(jìn)行染色體分析。通過集落形成實驗檢測血液病患者M(jìn)SCS支持造血的功能。結(jié)果ALL、CML、NHL、皿、MDS骨髓MSCS具有相似的細(xì)胞形態(tài)、免疫表型及正常核型，而且都可以向骨、脂肪和神經(jīng)細(xì)胞分化。AML骨髓MSCS在體外生長緩慢，很難傳代培養(yǎng)，而其它來源骨髓MSCS增殖快，易于傳代培養(yǎng)。AML骨髓MSCS喪失多向分化能力。ALL、CML、NHL、肋骨髓MSCS具有和正常成人骨髓MSCS相似的支持造血功能，并且表達(dá)造血因子，雖然MDS骨髓MSCS也表達(dá)造血因子，但是其支持造血能力降低，AML來源的MSCS不具有支持造血的能力結(jié)論血液病患者骨髓中存在具有問充質(zhì)干細(xì)胞特性的細(xì)胞群體。AML骨髓MSCS在增殖、分化和支持造血方面存在病理改變；MDS骨髓MSCS在支持造血方面存在病理改變。關(guān)鍵詞急性髓細(xì)胞性白血病急性淋巴細(xì)胞性白血病慢性粒細(xì)胞性白血病非霍奇金淋巴瘤霍奇金淋巴瘤骨髓增生異常綜合征間充質(zhì)干細(xì)胞骨髓多向分化支持造血第二部分化療藥物對骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞的損傷作用的研究摘要目的探討不同化療藥物對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MESENCHYMALSTEMCELLS，MSCS增殖、分化和支持造血能力的影響。方法獲取正常成人骨髓MSCSN8。用不同濃度化療藥物環(huán)磷酰胺，CYCLOPHASPHOMIDE，CTX馬利蘭，BUSULPHAN，BU2

簡介：目的OCT4是控制干細(xì)胞分化、決定干細(xì)胞全能性的關(guān)鍵物質(zhì)。在發(fā)現(xiàn)羊水中存在OCT4陽性干細(xì)胞的基礎(chǔ)上，本研究擬以SSEA4和CD44交叉結(jié)合分離的方法，從羊水細(xì)胞中分離OCT4陽性的全能干細(xì)胞，鑒定其生物學(xué)性狀和分化潛能，并建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。本研究有望為獲得人類的、能向內(nèi)、中、外三個胚層組織細(xì)胞定向分化的全能干細(xì)胞提供一種安全、簡便的方法，為組織工程開辟新的種子細(xì)胞來源。方法在知情同意的條件下，通過羊膜腔穿刺獲取人孕16～22周羊水50ML，利用SSEA4和CD44交叉結(jié)合分離的方法，通過免疫磁珠的微磁場分離作用，從羊水中分離出SSEA4CD44、SSEA4CD44、SSEA4CD44和SSEA4CD44細(xì)胞，培養(yǎng)擴(kuò)增，免疫熒光染色鑒定OCT4陽性率，選擇最佳的分選組合，觀察其生物學(xué)特性細(xì)胞生長周期，生長曲線，構(gòu)建類胚體，分析細(xì)胞性質(zhì)檢測NANOG、AKP、MYOSIN、VIMENTIN、DESMIN、NESTIN、MAP2、FN、SOX2、RUNX1和REX1等細(xì)胞因子的表達(dá)情況。取第三代OCT4陽性細(xì)胞，使其向肝細(xì)胞誘導(dǎo)分化，通過形態(tài)學(xué)觀察，免疫組化，RTPCR和WESTERNBLOT檢測白蛋白ALB、甲胎蛋白ΑAFP、CK18和CK19的表達(dá)，評價誘導(dǎo)效果。將生長旺盛的第三代OCT4陽性干細(xì)胞種植于裸鼠背部皮下，通過HE切片和三個胚層特異性染色對羊水干細(xì)胞的成瘤性進(jìn)行研究和分析。結(jié)果1原代羊水細(xì)胞在體外培養(yǎng)體系中增殖迅速，形成上皮細(xì)胞樣克隆和長梭形細(xì)胞樣克隆，流式細(xì)胞儀和免疫熒光染色顯示部分細(xì)胞表達(dá)CD44和SSEA4。2通過免疫磁珠細(xì)胞分選法，利用SSEA4和CD44交叉結(jié)合分離原理，可從原代羊水細(xì)胞中分離得到SSEA4CD44、SSEA4CD44、SSEA4CD44和SSEA4CD44細(xì)胞，OCT4免疫熒光染色結(jié)果顯示SSEA4CD44組細(xì)胞和SSEA4CD44組細(xì)胞OCT4陽性率最高，分別達(dá)90％和91％，而SSEA4CD44組細(xì)胞和SSEA4CD44組細(xì)胞均未檢測到OCT4表達(dá)，對SSEA4CD44和SSEA4CD44細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，該兩組細(xì)胞均表達(dá)NANOG、VIMENTIN、DESMIN、NESTIN、MAP2、FN、SOX2、RUNX1和REX1等細(xì)胞因子，明確SSEA4是分離OCT4陽性干細(xì)胞必須標(biāo)志，SSEA4陽性細(xì)胞的純化可以顯著提高OCT4陽性率，而間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志CD44和OCT4陽性率無明顯關(guān)聯(lián)。3OCT4陽性干細(xì)胞經(jīng)20NGMLHGF和10NGMLBFGF誘導(dǎo)14天后呈典型的多角形和短梭形肝細(xì)胞樣細(xì)胞，表達(dá)ALB、CK18和CK19。4OCT4陽性胎兒干細(xì)胞植入裸鼠背部皮下2周，有瘤樣新生物形成，HE染色見瘤內(nèi)結(jié)構(gòu)紊亂，細(xì)胞成分復(fù)雜，內(nèi)胚層染色HNF3Β、中胚層染色DESMIN、VIMENTIN和神經(jīng)外胚層染色TUBULIN均為陽性。結(jié)論SSEA4可作為分離純化OCT4陽性干細(xì)胞的標(biāo)志，SSEA4細(xì)胞的OCT4陽性率高，增殖分化能力強(qiáng)，符合作為組織工程種子細(xì)胞的條件，顯示孕中期羊水可以為組織工程研究提供新的種子細(xì)胞來源。

簡介：碩士學(xué)位論文論文題目兒童B系急性淋巴細(xì)胞性白血病CD1332的生物學(xué)特性及其分子機(jī)制初步研究研究生姓名龐麗指導(dǎo)教師姓名趙文理專業(yè)名稱兒科學(xué)研究方向小兒血液與腫瘤論文提交日期2014年3月

簡介：點擊查看更多纖維蛋白凝膠包埋下多孔支架上人真皮成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點擊查看更多細(xì)胞外基質(zhì)糖基化對表皮干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：血管平滑肌細(xì)胞VSMC從血管中膜向內(nèi)膜下遷移并在內(nèi)膜聚集、增生分泌大量的細(xì)胞外基質(zhì)是所有損傷性血管疾病新生內(nèi)膜形成共同的病理、生理性改變由此引起的再狹窄RS嚴(yán)重制約著這些疾病的療效和預(yù)后多種細(xì)胞因子和血管活性物質(zhì)均參與了再狹窄的發(fā)生其中血管緊張素ⅡANGⅡ介導(dǎo)的生物學(xué)作用是其中重要的因素之一其作用是通過VSMC細(xì)胞膜的ANGⅡ受體ATR介導(dǎo)完成的現(xiàn)已闡明ATR有四種亞型以AT1R和AT2R為主存在于動物和人類的組織中在成年心血管組織中ANGⅡ所起的大多數(shù)作用是由AT1R介導(dǎo)的而對AT2R則所知甚少現(xiàn)有研究提示AT2R介導(dǎo)的許多生物學(xué)效應(yīng)均與AT1R作用相拮抗具有明顯的負(fù)向影響作用研究已證明ANGⅡ的促進(jìn)新生內(nèi)膜形成的作用主要是AT1R介導(dǎo)的而對AT2R在其中所介導(dǎo)的作用則相對認(rèn)識不足該實驗室研究結(jié)果也證實ANGⅡ的促進(jìn)VSMC遷移、增殖、肥大并抑制其凋亡該作用主要是AT1R介導(dǎo)的VSMC轉(zhuǎn)染表達(dá)AT2R后VSMC的遷移、增殖受到抑制、而凋亡增加由于RS的發(fā)生除了與VSMC遷移、增殖能力改變密切相關(guān)外VSMC細(xì)胞周期進(jìn)展變化和細(xì)胞外基質(zhì)大量堆積在再狹窄新生內(nèi)膜形成過程中也起著同樣重要的作用不過國內(nèi)外相關(guān)的研究卻很少另一方面由于AT1R在生長發(fā)育過程中始終保持較高水平的穩(wěn)定表達(dá)并且在血管損傷后表達(dá)進(jìn)一步增加而AT2R表達(dá)水平在出生后迅速降低血管組織表達(dá)AT2R較少或不表達(dá)在這種情況下導(dǎo)入AT2R基因后如果其表達(dá)處于無調(diào)控狀態(tài)將可能造成嚴(yán)重后果基于這一認(rèn)識該研究擬構(gòu)建可調(diào)控AT2R基因哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)利用該系統(tǒng)將AT2R基因?qū)隫SMC使其在一定條件下進(jìn)行可調(diào)控表達(dá)在此基礎(chǔ)上了解AT2R基因轉(zhuǎn)染條件表達(dá)對體外培養(yǎng)VSMC細(xì)胞外基質(zhì)的形成和VSMC細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)物質(zhì)表達(dá)的影響進(jìn)一步探討AT2R基因轉(zhuǎn)染條件表達(dá)在再狹窄防治中的可行性及潛在意義

簡介：青島大學(xué)碩士學(xué)位論文臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)、生物學(xué)特性和臍血單個核細(xì)胞移植治療新生鼠缺氧缺血性腦損傷的研究姓名王利培申請學(xué)位級別碩士專業(yè)小兒內(nèi)科指導(dǎo)教師李堂姜紅20070603中文摘要臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)、生物學(xué)特性和臍血單個核細(xì)胞移植治療新生鼠缺氧缺血性腦損傷的研究【摘要】目的研究臍帶血HUMMAUMBILICALCORDBLOOD，HUCB來源的間充質(zhì)干細(xì)胞MESENCHYMALSTMCDLSMSCS體外分離、純化及培養(yǎng)的條件，以建立穩(wěn)定的體外培養(yǎng)體系，滿足實驗和臨床的需要，并將臍血單個核細(xì)胞MNC移植到發(fā)生缺氧缺血性腦病的新生鼠腦內(nèi)，觀察其是否可以存活、分化及大鼠的學(xué)習(xí)和記憶變化。方法密度梯度法分離臍血單個核細(xì)胞。16份臍血每份分為3組，分別將單個核細(xì)胞按密度1104／ML、11‰L和1LO％A接種于未包被6孔培養(yǎng)板內(nèi)，加入5％胎牛血清的DMEMLG培養(yǎng)。另2吩臍血每份分為3組，以1LOS／ML單個核細(xì)胞密度分別加入5％、LO％和20％胎牛血清的DMEMLG接種于胎牛血清包被的6孔培養(yǎng)板內(nèi)培養(yǎng)。采用常規(guī)的問充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)FFIEDENSTEIN法進(jìn)行臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)和擴(kuò)增培養(yǎng)。觀察不同臍血單個核細(xì)胞的接種密度、培養(yǎng)液胎牛血清濃度和胎牛血清包被培養(yǎng)皿對間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)的影響。采用流式細(xì)胞儀檢測MSQ相關(guān)抗原。將30只7D齡新生啪SICR大鼠隨機(jī)分成MNC移植組、假手術(shù)組和假移植組各10只。加屺移植組行腦缺氧缺血并腦內(nèi)移植孓溴脫氧尿核苷耐U標(biāo)記的臍血單個核細(xì)胞；假手術(shù)組僅分離頸總動脈但不結(jié)扎；假移植組行腦缺氧缺血，腦內(nèi)注射生理鹽水。采用Y型迷宮觀察新生鼠的行為改變，免疫組化分析腦組織移植細(xì)胞的定位和分化情況。結(jié)果胎牛血清未包被組以1104，ML、1106／ML接種組培養(yǎng)7D后貼壁數(shù)量很少，貼壁的細(xì)胞未長滿瓶底即死亡，無法傳代；11‰L組貼壁細(xì)胞較多，間充質(zhì)樣細(xì)胞與破骨樣細(xì)胞并存。110S／ML組分5％、10％、20％3種血清濃度，貼壁細(xì)胞均較多，以閫充質(zhì)干細(xì)胞為主，胎牛血清濃度5％組問充質(zhì)于細(xì)胞的純度較10％及20％組高，破骨樣細(xì)胞相對較少；胎牛血清包被組與未包被組相比，貼壁細(xì)胞少，培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞純度較高，破骨樣細(xì)胞相對較少。流式細(xì)胞儀檢測顯示培養(yǎng)出的間充質(zhì)樣細(xì)胞表達(dá)MSQ相關(guān)抗原。接受神經(jīng)干細(xì)胞移植組大鼠的學(xué)習(xí)能力、記憶能力和對照組相比，有明顯提高，差異具有顯著性P0舾。臍血單個核細(xì)胞移植后腦組織免疫組化結(jié)果顯示MNC移植組中，進(jìn)針注射部位存在大量移植細(xì)胞，并向周圍遷移，皮質(zhì)層、海馬等部位檢測到移植細(xì)胞；所植入的細(xì)胞約6％表達(dá)膠質(zhì)纖維酸性蛋白GB心，約8％表達(dá)神經(jīng)原特異性的微管相關(guān)蛋白2MAF2。結(jié)論將臍血單個核細(xì)胞以高密度110SCELLS／M1接種在低血清濃度5％FBS的低糖DMEM培養(yǎng)基中、玎珞包被培養(yǎng)瓶等條件下，可以在體外成功的培養(yǎng)出較純化的臍血MSQ，其培養(yǎng)成功率和MS始披較高。臍血單個核細(xì)胞移植到HIBD鼠腦內(nèi)可分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞；ⅫC移植后不僅可以減輕新生大鼠瑚之后近期的腦損傷，還能改善HIBD大鼠的神經(jīng)預(yù)后。碩士研究生王利培兒內(nèi)科

簡介：福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文肝星狀細(xì)胞與肝細(xì)胞微載體共培養(yǎng)對肝細(xì)胞生物學(xué)特性影響的實驗研究姓名程智清申請學(xué)位級別碩士專業(yè)外科學(xué)（普外科）指導(dǎo)教師劉景豐20070501福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文肝星狀細(xì)胞與肝細(xì)胞微載體共培養(yǎng)對肝細(xì)胞生物學(xué)特性影響的實驗研究摘要目的對微載體貼附懸浮共培養(yǎng)的原代大鼠肝細(xì)胞的生物學(xué)功能進(jìn)行評價，探討微載體貼附懸浮共培養(yǎng)對原代肝細(xì)胞功能特性的影響。方法應(yīng)用半原位膠原酶灌注法分離獲得原代大鼠肝細(xì)胞，與肝星狀細(xì)胞株RHSC99加入含CYTODEX3的DMEM培養(yǎng)液中混合共培養(yǎng)，定期檢測肝功能指標(biāo)，并動態(tài)觀察肝細(xì)胞形態(tài)變化。結(jié)果各培養(yǎng)組的細(xì)胞量、肝細(xì)胞的白蛋白及尿素合成量、安定轉(zhuǎn)化量在培養(yǎng)過程中均為先升高后逐漸下降，第4天最高；培養(yǎng)第4天起，微載體共培養(yǎng)組D組活細(xì)胞量高于單層共培養(yǎng)組B組，微載體單培養(yǎng)組C組高于單層單培養(yǎng)組A組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005；蛋白及尿素合成量、安定轉(zhuǎn)化量，在培養(yǎng)第4～8天，D組高于B、C兩組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005；培養(yǎng)第4天起，A組白蛋白及尿素合成量、安定轉(zhuǎn)化量均低于B組、C組、D組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005；培養(yǎng)第4天細(xì)胞總RNA豐度各組均較高，且D組高于B組，C組高于A組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。光鏡下見肝細(xì)胞正常形態(tài)A組維持時問1約0天，B、C、D三組可維持2W以上，D組部分肝細(xì)胞可達(dá)3W以上。結(jié)論肝星狀細(xì)胞與肝細(xì)胞微載體貼附懸浮共培養(yǎng)，較肝細(xì)胞微載體單獨(dú)培養(yǎng)、肝細(xì)胞單層共培養(yǎng)能進(jìn)一步提高肝細(xì)胞的功能表達(dá)、延長細(xì)胞生長時間。肝星狀細(xì)胞與肝細(xì)胞微載體共培養(yǎng)，可以做為一個較為理想的體外肝細(xì)胞培養(yǎng)模式。關(guān)鍵詞微載體肝星狀細(xì)胞肝細(xì)胞共培養(yǎng)

簡介：目的構(gòu)建人生存素SURVIVIN、轉(zhuǎn)化生長因子Β3TGFΒ3、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑1TIMP1三基因過表達(dá)慢病毒載體，通過一次轉(zhuǎn)染，實現(xiàn)SURVIVIN、TGFΒ3、TIMP1三基因在人退變椎間盤髓核細(xì)胞的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，通過抑制細(xì)胞凋亡、增加細(xì)胞外基質(zhì)的合成及抑制其降解，實現(xiàn)逆轉(zhuǎn)或延緩椎間盤退變的目的。方法構(gòu)建SURVIVIN、TGFΒ3、TIMP1慢病毒載體，聯(lián)合轉(zhuǎn)染人退變髓核細(xì)胞，應(yīng)用REALTIMEPCR技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染后三基因的過表達(dá)情況，并檢測蛋白多糖和Ⅱ型膠原的MRNA表達(dá)量，應(yīng)用WESTERNBLOT檢測蛋白多糖和Ⅱ型膠原的蛋白含量，應(yīng)用CASPASE3活性檢測試劑盒檢測CASPASE3蛋白活性，應(yīng)用ANNEXINⅤPI雙染色法檢測髓核細(xì)胞凋亡率。結(jié)果人退變髓核細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后，REALTIMEPCR結(jié)果顯示SURVIVIN、TGFΒ3、TIMP1三基因在基因水平均獲得穩(wěn)定過表達(dá)，且其表達(dá)能維持細(xì)胞傳至P3代或更長時間。目的病毒轉(zhuǎn)染組（A組）較空病毒轉(zhuǎn)染組（B組）、空白對照組（C組），蛋白多糖和Ⅱ型膠原MRNA表達(dá)量均無明顯差異，WESTERNBLOT示蛋白多糖和Ⅱ型膠原蛋白含量三組無明顯差異，CASPASE3蛋白吸光度及髓核細(xì)胞凋亡率三組亦無明顯差異。結(jié)論SURVIVIN、TGFΒ3、TIMP1慢病毒載體能夠穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人退變椎間盤髓核細(xì)胞，并且能長時間維持其表達(dá)，發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，三基因?qū)υ隗w外培養(yǎng)的髓核細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)的合成并無明顯的作用，對細(xì)胞凋亡亦無明顯抑制作用。在體外，通過SURVIVIN、TGFΒ3、TIMP1慢病毒載體轉(zhuǎn)染人退變髓核細(xì)胞并不能有效增加蛋白多糖和Ⅱ型膠原的含量，亦不能有效抑制髓核細(xì)胞凋亡。而在體內(nèi)環(huán)境中，三基因聯(lián)合轉(zhuǎn)染的作用，仍需進(jìn)一步研究。

簡介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1Α在多發(fā)性骨髓瘤中的表達(dá)及對瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名王曉桃申請學(xué)位級別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師羅紹凱20040526巨噬細(xì)胞炎癌蛋白一LA在多笈性骨髓誼中的表達(dá)及對瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響中文摘要系中與在MM患者體內(nèi)增強(qiáng)破骨細(xì)胞的活性作用一致，且以劑量依賴的方式增強(qiáng)破骨細(xì)胞的形成和作用【6‘8】。其機(jī)制主要是通過復(fù)雜的信號傳導(dǎo)直接作用于破骨祖細(xì)胞分化的最后一階段，誘導(dǎo)破骨細(xì)胞趨化及形成，增強(qiáng)破骨細(xì)胞的表達(dá)及活性，促進(jìn)骨質(zhì)重吸收，導(dǎo)致溶骨性改變7．81。MIP一1N在MM骨病的發(fā)生發(fā)展中起重要一環(huán)，同其它細(xì)胞因子及RANKI．瓜AN列OPG系統(tǒng)組成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)共同參與MM骨病的發(fā)生發(fā)展。最近研究MIP一1N不僅是一種OSF，而且通過旁分泌和自分泌的方式促進(jìn)瘤細(xì)胞的增殖與分化，與體內(nèi)瘤負(fù)荷水平相關(guān)。OYAJOBI和CHOI等用單克隆抗體或反義核酸技術(shù)處理動物模型均發(fā)現(xiàn)實驗組中血清M蛋白、影像學(xué)可見的溶骨性病變、腫瘤負(fù)荷及TRAP陽性的破骨細(xì)胞較對照組明顯減少。這表明用抗MIP．1A單克隆抗體治療MM可預(yù)防骨髓瘤骨病和減少瘤負(fù)荷，緩解病人的癥狀和延長病人的生存期，從而為臨床治療MM及MM骨病提供新的思路。、眾所皆知，MM呈灶性分布，瘤細(xì)胞可長期存在骨髓微環(huán)境中，直至疾病晚期只有部分病人的瘤細(xì)胞播散至外周血液成為漿細(xì)胞白血病。這與瘤細(xì)胞歸巢的特性有關(guān)【47】。其歸巢的機(jī)制受到多種因素的影響，其中骨髓基質(zhì)細(xì)胞和瘤細(xì)胞通過表達(dá)一系列粘附分子、促瘤細(xì)胞生長的因子和基質(zhì)成分在介導(dǎo)MM細(xì)胞粘附與歸巢、抑制瘤細(xì)胞髓外播散起重要作用。但有研究表示MIP．1Ⅱ在各期MM外周血中表達(dá)很弱，與骨髓血漿中的MIP．1D水平不一致【9】’加之MIP．1Ⅱ?qū)貱C亞族趨化因子，對瘤細(xì)胞可能有趨化作用，這就可推測MIP．1Q對瘤細(xì)胞歸巢有一定的作用。本課題應(yīng)用ELISA方法檢測MM患者治療三療程前后骨髓血漿MIP．1Ⅱ水平，判斷其在各型、各級、各期MM中的差異，并與有關(guān)實驗室指標(biāo)、臨床特征及治療過程中疾病的發(fā)展、轉(zhuǎn)歸情況相對照，初步探討MIP．1N在MM中的發(fā)病作用，MIPLN與瘤負(fù)荷、療效及預(yù)后的關(guān)系。同時，本課題應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)了解到1MM細(xì)胞株KM3產(chǎn)生MIP．1Ⅱ，2給予外源的MIP．1Ⅱ在一定濃度范圍里可促進(jìn)KM3增殖，而各種濃度的MIP．1N都不能對抗地塞米松誘導(dǎo)的MM細(xì)胞株KM3增殖抑制效應(yīng)3MIP．1A能介導(dǎo)MM細(xì)胞株KM3細(xì)胞的遷移作用。希望為臨床運(yùn)用MIP一1N單抗靶向治療MM提供理論和實驗依據(jù)。1．MIP1Ⅱ在多發(fā)性骨髓瘤中的表達(dá)及臨床意義