簡(jiǎn)介：本文對(duì)著絲粒蛋白A在原發(fā)性肝細(xì)胞癌發(fā)生中的生物學(xué)意義進(jìn)行了探討。本研究采用RTPCR、實(shí)時(shí)定量PCR、PCRSSCP、蛋白印跡和免疫組化方法，發(fā)現(xiàn)CENPA的轉(zhuǎn)錄和蛋白水平在原發(fā)性肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)均較癌旁組織顯著增高，并與P53信號(hào)通路相關(guān)；CENPA的蛋白表達(dá)水平與HCC組織學(xué)分級(jí)正相關(guān)，可作為評(píng)價(jià)TCC組織學(xué)進(jìn)展的指標(biāo)；CENPA的異常表達(dá)主要由轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)引起，基因突變不是主要影響因素；經(jīng)對(duì)肝癌細(xì)胞株中CENPA基因敲減證實(shí)，細(xì)胞周期表現(xiàn)G1期阻滯，S期細(xì)胞比例減少，凋亡細(xì)胞比例增加，并致BCL2BAX比值下降；經(jīng)對(duì)肝癌細(xì)胞株中CENPA基因過(guò)表達(dá)證實(shí)，腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)加快，平板克隆形成率增加。提示CENPA的表達(dá)水平與肝癌細(xì)胞增殖狀態(tài)相關(guān)。

簡(jiǎn)介：RNA靶向干擾用M基因表達(dá)對(duì)喉癌HEP2細(xì)胞生物學(xué)行為的影響EFFECTSOFTHEBIOLOGICALBEHAVIORAFTERSILENCINGPINLEXPRESSIONINHEP2CELLSBYUSINGRNAINTERFERENCE二級(jí)學(xué)科遂堡鱟論文課題起止時(shí)間2QQ生三月二2Q12生壘旦論文完成時(shí)間2Q12生壘旦中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧2012年5月目錄一、摘要中文論著摘要”1英文論著摘要4二、英文縮略語(yǔ)”8三、論文前’言99日U舌。材料與方法LO實(shí)驗(yàn)結(jié)果23討論“32結(jié)論”35四、本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)36五、參考文獻(xiàn)37六、附錄綜述”40在學(xué)期間科研成績(jī)47致謝“48個(gè)人簡(jiǎn)介49

簡(jiǎn)介：近年來(lái)，脊髓損傷SPINALCDINJURYSCI的再生與修復(fù)研究取得了很大進(jìn)展，細(xì)胞移植被認(rèn)為是最有前景的治療方法之一。嗅鞘細(xì)胞（OLFACTYENSHEATHINGCELLSOECS）因其獨(dú)特的生物學(xué)特性越來(lái)越受到人們的注意。OECS移植入受損的脊髓部位后，可以排列成細(xì)胞鏈，引導(dǎo)促進(jìn)神經(jīng)元軸突再生通過(guò)損傷部位，并可促進(jìn)多種神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)及軸突的延長(zhǎng)，研究發(fā)現(xiàn)，OECS可成功促進(jìn)下行傳導(dǎo)通路的再生。因此，OECS被認(rèn)為是細(xì)胞移植修復(fù)SCI最有希望的種子細(xì)胞之一。一、OECS對(duì)培養(yǎng)神經(jīng)元生長(zhǎng)狀態(tài)的影響培養(yǎng)新生SD大鼠脊髓背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元DSALROOTGANGLIONNEURONSDRGN與成年SD大鼠OECS，將DRGN與不同濃度8105ML、4105ML、2105ML、105ML、104MLOECS共培養(yǎng)。共培養(yǎng)3天后在倒置相差顯微鏡下觀察神經(jīng)元生長(zhǎng)發(fā)育情況；行抗NSESABC免疫組織化學(xué)染色并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；行抗GAP43免疫熒光染色；同時(shí)采用MTT法測(cè)定神經(jīng)元活性。對(duì)各組結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果表明各共培養(yǎng)組神經(jīng)元生長(zhǎng)密度明顯高于對(duì)照組，神經(jīng)元胞體大而飽滿，突起較長(zhǎng)，細(xì)胞活性也高于對(duì)照組。三、OECS對(duì)體外誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響二、OECS對(duì)H2O2誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡的影響培養(yǎng)新生SD大鼠DRGN與成年SD大鼠OECS。向DRGN培養(yǎng)基內(nèi)加入終濃度為1MMOLL的H2O2誘導(dǎo)其凋亡，然后與密度為2105ML的OECS共培養(yǎng)。于共培養(yǎng)24H后采用流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定DRGN細(xì)胞凋亡率，RTPCR及WESTERNBLOT技術(shù)檢測(cè)DRGN凋亡相關(guān)基因FADD、BCL2、BAX、BIM、CASPASE3的表達(dá)。結(jié)果表明DRGN培養(yǎng)基中加入H2O2后與OECS共培養(yǎng)培養(yǎng)新生SD大鼠DRGN與成年SD大鼠OECS。向DRGN培養(yǎng)基內(nèi)加入終濃度為1MMOLL的H2O2誘導(dǎo)其凋亡，然后立刻與不同密度104ML、105ML、2105ML、8105ML的OECS共培養(yǎng)；以及在加入H2O2后的不同時(shí)間0H、4H、8H、12H、24H與OECS共培養(yǎng)。各組DRGN分別于共培養(yǎng)24H后進(jìn)行TUNEL凋亡染色、流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡率及MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性。結(jié)果表明DRGN培養(yǎng)基中加入H2O2誘導(dǎo)凋亡后，與不同密度OECS共培養(yǎng)24H，檢測(cè)細(xì)胞凋亡率均明顯低于對(duì)照組，細(xì)胞活性明顯高于對(duì)照組，且隨著共培養(yǎng)的OECS接種密度的增加，細(xì)胞凋亡率隨之降低、細(xì)胞活性升高。但當(dāng)OECS接種密度升高至2105ML后，再增加OECS的接種密度，上述指標(biāo)變化并不明顯；DRGN培養(yǎng)基中加入H2O2誘導(dǎo)凋亡，于加入H2O2后不同時(shí)間與OECS共培養(yǎng)24H。檢測(cè)DRGN凋亡率在0H、4H、8H、12H組均明顯低于對(duì)照組，且隨著與OECS共培養(yǎng)時(shí)間的推遲，凋亡率隨之升高。當(dāng)加入H2O2后24H再與OECS共培養(yǎng)組，其細(xì)胞凋亡率與對(duì)照組相比并無(wú)明顯區(qū)別。結(jié)論OECS可明顯抑制H2O2誘導(dǎo)的DRGN凋亡，并在一定的范圍內(nèi)存在密度依賴效應(yīng)與時(shí)間依賴效應(yīng)。且在一定范圍內(nèi)，神經(jīng)元生長(zhǎng)密度隨共培養(yǎng)的OECS接種密度的增加而增加。但當(dāng)OECS達(dá)到一定密度后2105ML，再增加其接種密度，測(cè)量神經(jīng)元生長(zhǎng)密度并不繼續(xù)隨之增高。結(jié)論OECS可明顯促進(jìn)體外培養(yǎng)DRGN的生長(zhǎng)，提高細(xì)胞活性，且在一定范圍內(nèi)存在密度依賴效應(yīng)。24H，檢測(cè)細(xì)胞凋亡率明顯低于對(duì)照組，且共培養(yǎng)組BAX、BIM、CASPASE3的表達(dá)量明顯下調(diào)，BCL2表達(dá)量明顯上調(diào)。結(jié)論OECS能通過(guò)下調(diào)BAX、BIM表達(dá)、上調(diào)BCL2表達(dá)的途徑抑制DRGN凋亡。四、OECS移植修復(fù)大鼠SCI的試驗(yàn)研究培養(yǎng)成年SD大鼠OECS，培養(yǎng)14D后將其自培養(yǎng)瓶中消化下來(lái)，制成細(xì)胞懸液，并用HOECHST33342標(biāo)記。使用改良的ALLEN打擊法制造大鼠T89脊髓損傷模型，于損傷同時(shí)用微量注射器向損傷脊髓局部注入5UL密度為2106ML的OECS細(xì)胞懸液。于移植后2W觀察OECS的存活狀況及其在脊髓實(shí)質(zhì)內(nèi)的遷移情況；于移植后24H及2W行TUNEL凋亡染色觀察原始打擊區(qū)域臨近節(jié)段脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況；于移植后4W行NSE及GAP43免疫熒光染色觀察打擊區(qū)域神經(jīng)再生情況；于移植后4W對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物行運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分。結(jié)果發(fā)現(xiàn)OECS移植后可在損傷部位存活，并在脊髓實(shí)質(zhì)內(nèi)遷移；TUNEL凋亡染色顯示移植組原始打擊區(qū)域臨近節(jié)段脊髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯低于于對(duì)照組；NSE及GAP43免疫熒光染色顯示移植組打擊區(qū)域神經(jīng)元軸突再生數(shù)量明顯高于對(duì)照組；但試驗(yàn)組及對(duì)照組動(dòng)物運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分無(wú)明顯區(qū)別。結(jié)論OECS移植可明顯減輕脊髓空洞及膠質(zhì)瘢痕的形成，促進(jìn)軸突再生，抑制SCI后的神經(jīng)細(xì)胞凋亡。五、人嗅粘膜來(lái)源嗅鞘細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與純化本研究共收集嗅粘膜標(biāo)本15例，全部來(lái)自意外交通或機(jī)械事故死亡的成年男性，年齡2340歲，確認(rèn)為臨床死亡并征得家屬同意后，常規(guī)碘伏消毒取材區(qū)域，無(wú)菌條件下，采用硬質(zhì)鼻內(nèi)窺鏡剝離上鼻甲及中鼻甲內(nèi)側(cè)的嗅粘膜約5MM3，采用胰蛋白酶消化、差速貼壁法純化。在培養(yǎng)的第7、14D，使用倒置相差顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察；同時(shí)行抗NGFRP75免疫熒光染色，鑒定細(xì)胞并計(jì)算染色陽(yáng)性細(xì)胞率。結(jié)果表明通過(guò)純化及培養(yǎng)，于14D可獲得純度約為75％的OECS，細(xì)胞形態(tài)以帶有細(xì)長(zhǎng)突起的雙極細(xì)胞及三極細(xì)胞為主，有少量的扁平細(xì)胞。結(jié)論自成人嗅粘膜可成功分離純化出OECS，來(lái)源穩(wěn)定，純度達(dá)到移植要求，為開(kāi)展自體嗅粘膜OECS移植修復(fù)SCI提供了技術(shù)與方法。

簡(jiǎn)介：南方醫(yī)科大學(xué)2009級(jí)碩士學(xué)位論文超小超順磁氧化鐵標(biāo)記大鼠脂肪源問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的初步實(shí)驗(yàn)研究APRELIMINARYEXPERIMENTSTUDYONPROLIFERATIONCAPACITYANDVIABILITYOFADIPOSEDEDVEDSTROMALCELLSLABELEDWITHULTRASMALLSUPERPARAMAGNETICPARTICLESOFIRONOXIDE課題來(lái)源國(guó)家自然科學(xué)基金81172416；國(guó)家自然科學(xué)基金30901546；國(guó)家自然科學(xué)基金30772232；廣東省自然科學(xué)基金9451051501002508；廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目20098030801214專業(yè)名稱神經(jīng)外科學(xué)學(xué)位申請(qǐng)人姚晨指導(dǎo)教師張世忠教授答辯委員會(huì)主席林志俊教授答辯委員會(huì)成員陳系古教授陸永建教授牟永告教授全偉教授論文評(píng)閱人牟永告教授汪求精教授2012年4月20日中文摘要MR成像的窄間、時(shí)間分辨率無(wú)法顯示移植細(xì)胞，研究表明，借助新型磁共振造影增強(qiáng)劑可以反復(fù)無(wú)創(chuàng)地追蹤移植的干細(xì)胞。其巾超小超順磁氧化鐵ULTRASMALLSUPERPARAMAGNETICPARTICLESOFIRONOXIDE，USPIO標(biāo)記是一種較為理想的MR示蹤方法。目前已有不少學(xué)者相繼報(bào)道利用超順磁氧化鐵顆粒SUPERPARAMAGNETICIRONOXIDE，SPIO可成功標(biāo)記細(xì)胞并對(duì)其進(jìn)行示蹤，但關(guān)于ADSCS的標(biāo)記及USPIO示蹤還鮮有報(bào)道，如何提高標(biāo)記效率同時(shí)又減少標(biāo)記物對(duì)細(xì)胞的毒性是移植治療過(guò)程中的前提。本課題旨在探討USPIO對(duì)ADSCS的標(biāo)記的適宜濃度及示蹤。本研究擬采用超小超順磁氧化鐵USPIO對(duì)大鼠脂肪源問(wèn)充質(zhì)干細(xì)胞ADSCS進(jìn)行標(biāo)記，對(duì)比分析不同濃度的超小超順磁氧化鐵USPL0對(duì)ADSCS標(biāo)記的效率，并分別用CCK8及ALAMARBLUE方法對(duì)已標(biāo)記細(xì)胞的活力進(jìn)行檢測(cè)，探尋USPIO對(duì)ADSCS適宜的標(biāo)記濃度。為觀測(cè)已標(biāo)記ADSCS在PD模型大鼠體內(nèi)的存活、遷移提供了相關(guān)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。目的建立大鼠脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞的分離和培養(yǎng)方法，并對(duì)其形態(tài)學(xué)、細(xì)胞表面標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，為USPIO標(biāo)記ADSCS提供細(xì)胞來(lái)源。方法1大鼠脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)、純化、傳代大鼠脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)SD大鼠，體重120士209，采用369／L水合氯醛，按LML／1009體重的劑量進(jìn)行腹腔注射麻醉，麻醉滿意后將大鼠擺俯臥位，固定四肢于平板上，剃除背部及腹部的鼠毛。置于超凈工作臺(tái)上，依次用碘酊、酒精消毒，將解剖器械盒、三個(gè)玻璃培養(yǎng)皿加入冷PBS液等依次排放在超凈臺(tái)上。嚴(yán)格無(wú)菌條件下操作，逐層分離組織，盡量減少出血及紅細(xì)胞污染，取出腎周脂肪組織，選取含血管較少的部分置于培養(yǎng)皿中，包裹好迅速轉(zhuǎn)移至細(xì)胞房。用無(wú)菌的OOLMMOL／L磷酸緩沖液PBS反復(fù)沖洗脂肪H

簡(jiǎn)介：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文GADD45A高表達(dá)對(duì)胰腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名李云峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師林晨20080501北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文前言EFFECTOFOVEREXPRESSIONOFGADD45AONBIOLOGICALBEHAVIOROFPANCREATICCANCERCELIPHDSTUDENTYUNFENGLISUPERVISORPROFCHENLINABSTRACTTHEEXTREMELYPOORPROGNOSISOFPATIENTSWITHPANCREATICDUCTALADENOCARCINOMAPDACINDICATESTHENEEDFORNOVELTHERAPEUTICAPPROACHESTHEGROWTHARRESTANDDNADAMAGEINDUCIBLEGADDGENEGADD45AISAMEMBEROFAGROUPOFGENESTHATAREINDUCEDBYDNADAMAGINGAGENTSANDGROWTHARRESTSIGNALSINTHISREPORT，WEHAVEANALYZEDTHEBIOLOGICALACTIVITYOFGADD45AUPONPANCREATICDUCTALADENOCARCINOMACANCERDERIVEDCELLLINESWEREPORTTHATGADD45AISVARIOUSLYEXPRESSEDINCELLLINESDERIVEDFROMPANCREATICDUCTALADENOCARCINOMACANCERANDADENOVIRALMEDIATEDEXPRESSIONOFGADD45AADG45AINTHESECELLSRESULTSINAPOPTOSISVIACASPASEACTIVATIONANDCELLCYCLEARRESTINTHEG2／MPHASEFURTHERMORE，WEASSESSEDTHEEFFICACYOFACOMBINEDTREATMENTWITHADG45AANDANTICANCERDRUGSETOPOSIDE，CISPLATIN，5FLUOROURACIL，RESPECTIVELYFORPANCLCELLLINEANDFOUNDTHATGADD45ASIGNIFICANTLYINCREASEDTHECHEMOSENSITIVITYOFPANCLTOCHEMOTHERAPEUTICAGENTS，WHICHMAYBERESULTEDFROMABUNDANTAPOPTOSISINDUCTIONANDCELLCYCLEARRESTBYCOMBINATIONALTREATMENTOFADG45AINFECTIONANDCHEMOTHERAPEUTICS，GADD45AEXPRESSIONWASELEVATEDTOAHIGHEREXTENTINCANCERCELLSWITHWILDTYPEP53THANINTHATWITHKNOCKEDOUTP53，INDICATINGAHIGHERCHEMOSENSITIVITYTOCANCERCHEMOTHERAPYINPANCLXENOGRAFTMODELS，ADG45ASIGNIFICANTLYINHIBITEDTHEGROWTHOFTUMOR748％COLLECTIVELY，OURRESULTSSUGGESTTHATGADD45AMAYPALYNAGATIVEROLESINCANCERCELLGROWTHANDMAYBEAPROMISINGMOLECULEUSEDFORTHECANCERGENETHERAPYINCOMBINATIONWITHCHEMOTHERAPEUTICAGENTSKEYWORDGADD45A，ADENOVIRALVECTOR，PANCREATICCANCER，CHEMOSENSITIVITY一3一

簡(jiǎn)介：第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文細(xì)胞周期相關(guān)蛋白在舌癌中的表達(dá)及正反義CYCLINA基因轉(zhuǎn)染對(duì)舌癌細(xì)胞TCA8113的生物學(xué)效應(yīng)姓名周峻申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)口腔基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)口腔病理學(xué)指導(dǎo)教師楊連甲200051絲墼堡壘塑絲絲』技術(shù)路線檢測(cè)舌鱗癌中細(xì)胞周期相關(guān)蛋白CYCLINA，P21，KI67的蛋白合成及CYCLINA，CYCLIND1基因轉(zhuǎn)錄；PCYCA質(zhì)粒真核表達(dá)載體PCDNA31酶切L獲得全長(zhǎng)CYCLINALLT。DNA連接酶◆L轉(zhuǎn)化TEA8113表達(dá)載體PCDNA31PASA質(zhì)粒和PSA質(zhì)粒卜感受態(tài)細(xì)胞DH5OL脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染IL脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染LL轉(zhuǎn)染后細(xì)胞LG418篩選抗性克隆L穩(wěn)定表達(dá)TCA／PCDNA31TCA／PASATCA／PSALL抗性克隆I提取質(zhì)粒DNAL酶切鑒定重組質(zhì)粒FEMFCM軟瓊脂集落IHCISH細(xì)胞生AGNORFEULGEN接種裸鼠形成實(shí)驗(yàn)長(zhǎng)曲線L蛋白基因計(jì)算細(xì)胞DNA合成L合成轉(zhuǎn)錄倍增時(shí)間恢細(xì)胞周期腫瘤細(xì)胞反義RNA封細(xì)胞生長(zhǎng)速率體內(nèi)實(shí)驗(yàn)及惡性表型閉CYCLINA蛋白含量表達(dá)

簡(jiǎn)介：活化的肝星狀細(xì)胞HSC在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用研究發(fā)現(xiàn)肝素對(duì)血清所致的大鼠HSC增生具有明顯的抑制作有且能抑制HSC表達(dá)ΑSMA和Ⅰ型膠原蛋白的合成另外肝素的強(qiáng)抗凝活性限制了其在肝病中的為此作者又觀察了低抗凝肝素對(duì)HSC是具有和肝素類似的生物學(xué)效應(yīng)同時(shí)在整體情況下肝素和低抗凝肝素是否對(duì)肝纖維化發(fā)生有干預(yù)作用結(jié)論1肝素和低抗凝肝素對(duì)血清所致的HSC增生具有明顯的抑制作用且呈劑量依賴性2肝素和低抗凝肝素明顯抑制活化的HSC細(xì)胞外基質(zhì)Ⅰ型前膠原、FN基因和蛋白的表達(dá)3肝素和低抗凝肝素明顯抑制活化的HSCMT1MMP基因的表達(dá)但對(duì)MMP2基因的表達(dá)無(wú)影響4肝素和低抗凝肝素對(duì)PDGF所致的HSCMEK1ERK1和ERK1蛋白表達(dá)具有明顯抑制作用且可抑制ERK、JNK蛋白的磷酸化其對(duì)由PDGF引起的HSCAP1結(jié)合活性升高也有明顯抑制作用5體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)肝素和低抗凝肝素對(duì)四氯化碳和豬血清所致的大鼠早期肝纖維化有明顯干預(yù)作用

簡(jiǎn)介：華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文胰腺癌干細(xì)胞生物學(xué)特性及增殖與分化調(diào)控的研究姓名黃鵬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師王春友20080501華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文1胰腺癌干細(xì)胞生物學(xué)特性及增殖與分化調(diào)控的研究胰腺癌干細(xì)胞生物學(xué)特性及增殖與分化調(diào)控的研究華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院胰腺外科博士研究生黃鵬導(dǎo)師王春友教授中文摘要中文摘要第一部分胰腺癌干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定目的第一部分胰腺癌干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定目的研究人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC1中腫瘤干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定方法。方法方法將PANC1細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，以CD44和CD24作為細(xì)胞表面標(biāo)志。利用流式細(xì)胞儀，從該細(xì)胞株中分離出細(xì)胞亞群。通過(guò)裸鼠體內(nèi)接種成瘤實(shí)驗(yàn)，鑒定各亞群細(xì)胞體內(nèi)增殖能力；通過(guò)SP法檢測(cè)成瘤組織和PANC1細(xì)胞株中CD44和CD24的表達(dá)，RTPCR檢測(cè)CD44和CD24MRNA的表達(dá)。結(jié)果結(jié)果PANC1細(xì)胞系在培養(yǎng)液I中培養(yǎng)時(shí)，CD44和CD24的表達(dá)分別為51～175和218～701，表型為CD44CD24的胰腺癌細(xì)胞僅占09～35，而在培養(yǎng)液II中培養(yǎng)，CD44和CD24的表達(dá)分別為59～168和195～746，CD44CD24為08～41。在兩種培養(yǎng)基中，細(xì)胞各表型的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。裸鼠皮下植入5103個(gè)CD44CD24亞群細(xì)胞，4周即可見(jiàn)明顯的新生腫瘤塊28，而CD44CD24亞群，即使植入1105個(gè)細(xì)胞，12周也難形成種植瘤。前者體外成瘤能力比后者至少?gòu)?qiáng)20～50倍（P005；但不同培養(yǎng)基中，CD44和CD24MRNA的表達(dá)值差異性顯著P001。結(jié)論結(jié)論CD44和CD24可作為分選PANC1中腫瘤干細(xì)胞的表面標(biāo)志；分選出的CD44CD24亞群細(xì)胞具有腫瘤干細(xì)胞的特征。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞胰腺癌；腫瘤干細(xì)胞；流式細(xì)胞術(shù)；分離；培養(yǎng)；鑒定

簡(jiǎn)介：研究背景及目的內(nèi)皮祖細(xì)胞EPCS是胚胎發(fā)育早期參與血管發(fā)生VULOGENESIS的最重要的干細(xì)胞近年研究發(fā)現(xiàn)成人骨髓和外周血中也存在少量EPCS由于EPCS具有活躍的分化增生能力和不依賴于血管內(nèi)皮細(xì)胞ECS的成血管能力因此可作為干細(xì)胞移植促血管新生治療的一種理想的細(xì)胞供體尤其對(duì)于老年、糖尿病、高脂血癥等由于ECS功能受損而對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子反應(yīng)低下的患者而言其治療價(jià)值更為突出但EPCS移植是一種個(gè)體化治療細(xì)胞來(lái)源較少即使通過(guò)體外培養(yǎng)擴(kuò)增獲得的數(shù)量亦有限因此通過(guò)體外干預(yù)方法促進(jìn)EPCS的生物學(xué)活性是提高其治療效能的關(guān)鍵手段既往研究表明低氧環(huán)境可誘導(dǎo)多種細(xì)胞系VEGF和VEGF受體VEGFR表達(dá)上調(diào)激活ECS的成血管功能促進(jìn)局部血管生成但低氧對(duì)于EPCS是否有類似的作用鮮有報(bào)道該實(shí)驗(yàn)旨在觀察低氧條件對(duì)大鼠骨髓源性EPCS的增殖、移行、旁分泌及成血管能力等生物學(xué)活性的影響并探討其可能的機(jī)制為臨床應(yīng)用EPCS移植前的低氧預(yù)刺激及其療效評(píng)價(jià)提供理論依據(jù)實(shí)驗(yàn)方法1采取大鼠骨髓以密度梯度離心分離單個(gè)核細(xì)胞MNCS于體外培養(yǎng)并由牛垂體提取物PEX誘導(dǎo)擴(kuò)增經(jīng)DII標(biāo)記的乙酰低密度脂蛋白DIIACLDL和異硫氰酸鹽熒光素標(biāo)記的單葉豆凝集素FITCBSLECTIN雙染陽(yáng)性鑒定為EPCS2低氧條件采用三氣培養(yǎng)箱控制氧濃度在2％持續(xù)培養(yǎng)7天觀察細(xì)胞生物學(xué)行為的變化3EPCS增殖活性采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法測(cè)定細(xì)胞數(shù)量及其細(xì)胞倍增時(shí)間4EPCS的遷移能力通過(guò)UNDERAGAROSE模型誘導(dǎo)趨化分別用顯微鏡測(cè)定遷移細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞平均遷移距離5EPCS的旁分泌功能測(cè)定采用EPCS條件培養(yǎng)液刺激ECS并用BRDU法測(cè)定ECS核DNA復(fù)制6EPCS的成血管能力測(cè)定采用Ⅰ型膠原凝膠系統(tǒng)光鏡下觀察EPCS形成管腔樣結(jié)構(gòu)的數(shù)目7VEGF和FLK1MRNA表達(dá)測(cè)定采用半定量RTPCR法8WESTERNBLOT法測(cè)定絲裂原激活蛋白激酶ERK12介導(dǎo)低氧預(yù)刺激對(duì)細(xì)胞增殖活性的影響

簡(jiǎn)介：分類號(hào)密級(jí)國(guó)際十進(jìn)分類號(hào)（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文NDRG2對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響（題名和副題名）王建勛（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名王為忠教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院胃腸外科申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)名稱外科學(xué)（普通外科）論文提交日期201104答辯日期201105論文起止時(shí)間2009年09月至2011年04月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)NDRG2對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響研究生王建勛學(xué)科專業(yè)外科學(xué)（普外）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院胃腸外科導(dǎo)師王為忠教授（主任醫(yī)師）資助基金項(xiàng)目國(guó)家863高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃2006AA02Z194國(guó)家自然科學(xué)基金3070041630672074關(guān)鍵詞NDRG2，結(jié)腸癌，TRANSWELL，遷移，轉(zhuǎn)染，慢病毒中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)二O一一年四月

簡(jiǎn)介：背景退變性椎間盤病是導(dǎo)致各種脊柱退行性疾患的主要原因。椎間盤退行性變是椎間盤突出的前提和病理基礎(chǔ)。椎間盤退變時(shí)其細(xì)胞減少且功能退化，髓核脫水，合成蛋白多糖能力減弱，膠原的排列和類型均發(fā)生改變，正常功能受到嚴(yán)重?fù)p害。椎間盤組織再生能力有限，一旦發(fā)生退變，很難阻止或逆轉(zhuǎn)。研究顯示椎間盤細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)降低和椎間盤退變關(guān)系密切，因此諸多影響椎間盤血供的因素亦可導(dǎo)致椎間盤退變。椎間盤組織內(nèi)髓核細(xì)胞的主要功能是分泌膠原和蛋白聚糖PROTEOGLYCAN，PG，其功能降低、細(xì)胞外基質(zhì)減少、微環(huán)境異?？蓪?dǎo)致椎間盤生物學(xué)功能減弱，研究證實(shí)椎間盤退變與來(lái)源于椎間盤細(xì)胞的基質(zhì)合成物減少有關(guān)。目的觀察攜帶有GFPHGFCDNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人髓核細(xì)胞后對(duì)髓核細(xì)胞增殖活性及細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。方法收集人退變髓核組織標(biāo)本，分離培養(yǎng)髓核細(xì)胞，構(gòu)建HGF基因質(zhì)粒，采用ROCHEFUGENEHD轉(zhuǎn)染試劑，按照62、72、82比例，利用激光共聚焦顯微鏡觀察并篩選HGF質(zhì)粒轉(zhuǎn)染最佳比例；選取HGF質(zhì)粒最佳作用濃度，設(shè)立對(duì)照組、空白質(zhì)粒組、HGF因子組、HGF基因轉(zhuǎn)染組，作用于髓核細(xì)胞后，采用RTPCR方法檢測(cè)Ⅱ型膠原、蛋白多糖及SOX9MRNA的表達(dá)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)髓核細(xì)胞增殖周期。結(jié)果HGF基因轉(zhuǎn)染髓核細(xì)胞后，激光共聚焦顯微鏡觀察，在72時(shí)達(dá)到最佳轉(zhuǎn)染效果，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染效率為對(duì)314％。HGF因子刺激組和HGF基因轉(zhuǎn)染組均可促使髓核細(xì)胞增殖以及細(xì)胞外基質(zhì)的表達(dá)，較對(duì)照組和空白質(zhì)粒組有顯著差異（P結(jié)論HGF基因轉(zhuǎn)染后可促進(jìn)髓核細(xì)胞增殖，上調(diào)細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)。

簡(jiǎn)介：碩士專業(yè)學(xué)位論文論文題目腫瘤周圍浸潤(rùn)的PDL1CD19B淋巴細(xì)胞在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的作用及其生物學(xué)意義研究生姓名蘭楊指導(dǎo)教師姓名管洪庚謝芳蘭晶專業(yè)名稱普通外科學(xué)研究方向甲狀腺乳腺疾病論文提交日期2014年5月

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R734密級(jí)題單位代碼學(xué)號(hào)1031220111467南京醫(yī)科犬掌碩士學(xué)位論文目G墜里圣2墜企昱鮑逆囪焦曼盤韭塵細(xì)胞膻痤緝胞掛生塹堂笠囝煎塑生玨究目錄中文摘要1英文摘要3前言5月Ⅱ舌’’一5材料與方法9結(jié)果21討論27小結(jié)31參考文獻(xiàn)32綜述40在讀期間發(fā)表文章情況一57致謝58

簡(jiǎn)介：山東大學(xué)碩士學(xué)位論文B7H4基因?qū)β殉舶┘?xì)胞生物學(xué)習(xí)性影響的研究姓名成磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師姜潔20090506山東大學(xué)碩士學(xué)位論文計(jì)學(xué)差異尸0．05，但實(shí)驗(yàn)組集落形成直徑大，細(xì)胞數(shù)量較多，細(xì)胞排列較緊密；4檢測(cè)三組細(xì)胞周期，實(shí)驗(yàn)組G2／M期細(xì)胞百分比為20．3±2．1，高于陰性對(duì)照組13．2±1．4，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0．05，陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組14．5±0．6比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異尸O．05。凋亡檢測(cè)顯示，實(shí)驗(yàn)組凋亡細(xì)胞數(shù)百分比為6．33±1．21，低于陰性對(duì)照組10．502．88，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0．05，陰性對(duì)照組與空白對(duì)照組10．17±3．13無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異胗O．05；5在劃痕實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞劃痕距離明顯縮短，與陰性對(duì)照及空白對(duì)照組相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義氏0．05；6侵襲實(shí)驗(yàn)顯示，穿膜細(xì)胞數(shù)實(shí)驗(yàn)組為47．00±15．90個(gè)，明顯高于陰性對(duì)照組26．88±12．99個(gè)及空白對(duì)照組28．90±12．94個(gè)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義PO．05；7靶向誘導(dǎo)的CTL細(xì)胞對(duì)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞殺傷率明顯低于陰性對(duì)照組20．12％±3．14％VS36．34％±4．53％尸O．05。結(jié)論B7．H4可以直接促進(jìn)SKOV3細(xì)胞的生長(zhǎng)，增加遷移及侵襲能力，并抑制靶向誘導(dǎo)的CTL細(xì)胞的殺傷作用。在腫瘤形成、轉(zhuǎn)移過(guò)程中可能起著重要的作用，有望成為卵巢癌基因治療的潛在治療靶點(diǎn)。關(guān)鍵詞卵巢癌；B7．H4；CTL；轉(zhuǎn)染；侵襲；遷移2

簡(jiǎn)介：論文題目塑囪曼H巡遠(yuǎn)叢堡里Y衛(wèi)I魚(yú)壘翌二圣基因過(guò)皇翹亙臣黃囊疸細(xì)胞生塑堂塹麴毖墮的墊壟嬰窒答辯委員會(huì)主席廑達(dá)星塾握逝塹太堂匡堂陵附屬』L童醫(yī)院答辯委員會(huì)成員王夏迭塾拯漁州醫(yī)抖太堂基礎(chǔ)醫(yī)堂陵奎鮭苤塾握遏趔醫(yī)型太堂附屬箍三醫(yī)暄溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中英文縮略詞對(duì)照表3