簡介：目的①觀察大鼠骨折后不同時間點外周血間充質(zhì)干細(xì)胞（PBMSCS）的數(shù)量變化，并與同期培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMSCS比較異同。②觀察大鼠骨折后外周血對間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCS）趨化和成骨的影響，并分析可能原因及其相關(guān)基因的變化。③觀察BMP2對大鼠BMSCS遷移、趨化的影響，并研究此過程中的信號通路。方法⑴建立大鼠骨折模型，根據(jù)骨折后1、3、7D時間點分組，抽取外周血，獲得單核細(xì)胞，貼壁分離培養(yǎng)MSCS，檢測各組成纖維細(xì)胞集落形成單位（CFUFS）數(shù)和集落形成率（CFE），同期分離培養(yǎng)BMSCS。⑵MTT法檢測不同來源的MSCS增殖特點，流式細(xì)胞儀檢測MSCS表面抗原表達(dá)，成骨和成脂分化檢測其多項分化潛能。⑶分離各組外周血血清，TRANSWELL裝置觀察血清對BMSCS遷移的作用，RTPCR法研究骨折組血清對間充質(zhì)干細(xì)胞ALP、OC和OPNMRNA表達(dá)的影響，ELISA法檢測各組血清中BMP2和SDF1的含量。⑷BMP2預(yù)刺激間充質(zhì)干細(xì)胞，WESTERNBLOT、ELISA檢測CXCR4的表達(dá)及SDF1的分泌。⑸添加LY294002、LHMO、AMD3100阻斷MSCS信號通路后，TRANSWELL裝置檢測BMP2對MSCS趨化的作用。結(jié)果①骨折后PBMSCS含量升高，且具有間質(zhì)干細(xì)胞的特性，表達(dá)抗原CD44、CD90、CD29，不表達(dá)造血細(xì)胞系標(biāo)志CD34、CD45，能夠向成骨、成脂分化。②骨折血清顯著促進(jìn)MSCS遷移和成骨分化，骨折組血清BMP2含量較對照組有顯著差異，且具有時序性。③BMP2處理的間充質(zhì)干細(xì)胞SDF1分泌增加，CXCR4表達(dá)升高，阻斷劑LHMO、AMD3100可以明顯降低MSCS的遷移能力，LY294002無此作用。結(jié)論⑴骨折后大鼠PBMSCS動員增加，并呈時序性變化。該細(xì)胞具有間質(zhì)干細(xì)胞的特性。⑵骨折后大鼠外周血含有多種因子，在促進(jìn)MSCS趨化和分化中發(fā)揮重要作用。⑶BMP2促進(jìn)BMSCS遷移及SDF1CXCR4表達(dá)，但兩者之間無直接關(guān)聯(lián)。

簡介：該文研究了37例MDS、2例由MDS轉(zhuǎn)化的AMLMDSAML以及11例正常對照的造血細(xì)胞染色體核型、體外培養(yǎng)CFUGM生長模式、增殖細(xì)胞核抗原PCNA表達(dá)、細(xì)胞周期和造血克隆性結(jié)論1、初診MDS患者近三分之一可檢出非隨機性骨髓細(xì)胞染色體核型異常2、MDS骨髓細(xì)胞體外半固體培養(yǎng)CFUGM生長行為異常近半數(shù)患者表現(xiàn)集落集簇?zé)o生長3、MDS骨髓細(xì)胞PCNA陽性率增加隨著病程進(jìn)展有逐漸增高趨勢4、MDS骨髓細(xì)胞BRDU標(biāo)記指數(shù)低下DNA合成期及細(xì)胞周期時間延長RAEBRAEBT患者較RARAS患者更為明顯5、RA患者約70﹪左右呈單克隆造血RAEB患者均呈單克隆造血綜上所見隨著MDS病程進(jìn)展骨髓中原始細(xì)胞增多造血細(xì)胞生物學(xué)特性呈現(xiàn)以下的演變趨勢造血轉(zhuǎn)變?yōu)閱慰寺⌒泽w外培養(yǎng)CFUGM接近于白血病性生長特征PCNA增高細(xì)胞周期延長這可能是惡性轉(zhuǎn)化程度增高的造血干祖細(xì)胞克隆獲得優(yōu)勢生長的反映

簡介：種子細(xì)胞是組織工程最基本的要素軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)極易老化一般培養(yǎng)至56代其特異性標(biāo)志蛋白Ⅱ型膠原就已經(jīng)喪失表達(dá)因此不能通過體外擴增獲取大量的軟骨細(xì)胞來滿足構(gòu)建軟骨組織的需要我們試圖通過基因轉(zhuǎn)染的方式建立永生化人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞系并對其生物學(xué)特性進(jìn)行研究從而為軟骨組織工程種子細(xì)胞的問題提供新的探索方向我們得出最后結(jié)論1、含HPV16E7的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體能夠成功永生化人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞2、永生化人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞IHAC經(jīng)嚴(yán)格致瘤性檢驗為良性轉(zhuǎn)化3、通過3種不同的誘導(dǎo)方法可以快速穩(wěn)定地誘導(dǎo)并維持IHAC的Ⅱ型膠原表型4、IHAC在體內(nèi)具有優(yōu)秀的成軟骨能力

簡介：MASTER’SDISSERTATIONL寶叢I曼生物堂佳目的毖響答辯日期20110608學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書江蘇大學(xué)、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所、國家圖書館、中國學(xué)術(shù)期刊光盤版電子雜志社有權(quán)保留本人所送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致，允許論文被查閱和借閱，同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本論文編入中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫并向社會提供查詢，授權(quán)中國學(xué)術(shù)期刊光盤版電子雜志社將本論文編入中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫并向社會提供查詢。論文的公布包括刊登授權(quán)江蘇大學(xué)研究生處辦理。本學(xué)位論文屬于不保密圈。學(xué)位論文作者簽名姆蠡刀／年占月9日燧名伽??；VOT年6只多B

簡介：點擊查看更多DMSO誘導(dǎo)HL-60為類中性粒細(xì)胞相關(guān)的生物學(xué)指標(biāo)分析研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的探討骨髓增生異常綜合征MDS造血細(xì)胞凋亡特征及相關(guān)藥物對MDSL原始細(xì)胞系的調(diào)控作用。方法1，用免疫組織化學(xué)方法堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶系統(tǒng)，APAAP結(jié)合DNA末端原位標(biāo)記ISEL同步檢測30例MDS病人骨髓切片標(biāo)本中CD68或CD41陽性細(xì)胞及凋亡細(xì)胞，并分析二者間關(guān)系，缺鐵性貧血病例做對照。2，結(jié)合ISEL流式細(xì)胞儀FCM和熒光原位雜交FISH共檢測19例MDS病例凋亡信號和克隆標(biāo)記，以判斷凋亡細(xì)胞的克隆性來源；3，不同濃度不同時間的三氧化二砷AS2O3和或腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體TRAIL作用于MDS髓系原始細(xì)胞系MDSL，然后用流式細(xì)胞儀ANNEXINV熒光標(biāo)記檢測細(xì)胞凋亡。半固體培養(yǎng)18天后收獲細(xì)胞行形態(tài)學(xué)分類和分化抗原檢測。甲基化特異性PCRMSP檢測抑癌基因P15INK4B甲基化程度、RTPCR檢測P15INK4BA水平表達(dá)，免疫標(biāo)記檢測P15INK4B蛋白水平表達(dá)。結(jié)果1，MDS病例骨髓中有核細(xì)胞凋亡明顯多于對照組；MDS之巨核細(xì)胞和微小巨核細(xì)胞CD41陽性細(xì)胞較對照組明顯增高，P分別為＜005和＜001。并呈現(xiàn)異常分布及成簇現(xiàn)象。巨核系凋亡無明顯增加。巨核系凋亡僅見于微小巨核細(xì)胞；MDS骨髓CD68陽性細(xì)胞數(shù)與造血細(xì)胞凋亡顯示顯著正相關(guān)；R083，P＜0001MDS低危組RARASCD68陽性細(xì)胞巨噬細(xì)胞和ISEL陽性細(xì)胞凋亡細(xì)胞數(shù)均高于高危組RAEBRAEBTP分別＜005和＜001。2，10例經(jīng)ISELFISH分析的MDS患者骨髓有核細(xì)胞中異?？寺〖?xì)胞百分比平均為371﹪，凋亡細(xì)胞中異?？寺〖?xì)胞百分比僅為240﹪。9例經(jīng)FCMFISH分析者，8例顯示凋亡細(xì)胞中核型正常百分比高于非凋亡細(xì)胞中核型正常百分比。3，不同AS2O3TRAIL組合均可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，48H藥物處理時達(dá)高峰約25﹪，72H時仍有約9﹪的細(xì)胞凋亡。藥物處理尤其是AS2O3TRAIL導(dǎo)致細(xì)胞明顯的形態(tài)學(xué)分化，而TRAIL能顯著降低CD34細(xì)胞比率。未經(jīng)處理的MDSL細(xì)胞基本不表達(dá)P1INK4B并伴有明顯的P15INK4BDNA甲基化。藥物處理后P15INK4B表達(dá)增強，并伴有DNA去甲基化；但免疫標(biāo)記未顯示蛋白水平P15INK4B表達(dá)的變化；結(jié)論1MDS存在造血細(xì)胞過度凋亡；外周血小板減少的原因可能與病態(tài)巨核細(xì)胞產(chǎn)生和釋放血小板障礙有關(guān)；MDS巨噬細(xì)胞與造血細(xì)胞凋亡的相關(guān)性提示腫瘤壞死因子TNFΑ參與凋亡誘導(dǎo)過程。2，MDS凋亡細(xì)胞主要來源于殘余正常造血細(xì)胞，克隆細(xì)胞存在凋亡抵抗傾向。3，AS2O3和或TRAIL處理能促進(jìn)MDS惡性細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)細(xì)胞分化；并能通過DNA去甲基化而增強原本幾乎消失的抑癌基因P15INK4B表達(dá)，有進(jìn)一步進(jìn)行基礎(chǔ)研究的價值和臨床應(yīng)用前景。

簡介：研究生導(dǎo)師及課題組成員簡介導(dǎo)師S王郡甫男，1965年11月出生，醫(yī)學(xué)免疫學(xué)博士，研究員，碩士生導(dǎo)師。主要從事基因工程，腫瘤免疫學(xué)等方向研究。課題指導(dǎo)小組其他成員；許曉群男，1975年6月出生，碩士，副研究員，主要從事分子免疫學(xué)方面的研究。張建華女，1953年8月出生，副主任技師，主要從事細(xì)胞生物學(xué)方面的研究。目錄摘要IIABSTRACTⅣ符號說明VII前言1正文3第一部分人IL24的EDNA獲取及克隆載體的構(gòu)建31實驗材料和儀器311主要實驗材料312主要儀器設(shè)備一713主要實驗方法82實驗結(jié)果133第一部分附錄圖表15第二部分PADMDA7／IL24腺病毒表達(dá)載體的構(gòu)建L81實驗材料與方法1811主要實驗材料L812主要儀器設(shè)備2113主要實驗方法222實驗結(jié)果303第二部分附錄圖表3L第三部分ADMDA一7／IL24腺病毒感染喉癌細(xì)胞HEP2及對HEP2的生物學(xué)影響351實驗材料與方法3511主要實驗材料3512主要儀器設(shè)備3713主要實驗方法382實驗結(jié)果4L3第三部分附錄圖表42討論“44，J、結(jié)48參考文獻(xiàn)49文獻(xiàn)綜述52攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文6L虱【謝62

簡介：前言嚴(yán)重急性呼吸綜合征SEVEREACUTERESPIRATYSYNDROME，SARS是21世紀(jì)在全球暴發(fā)的第一種烈性傳染病，2002年11月我國廣東佛山市曾經(jīng)發(fā)生一起家族聚集性SARS疫情，2003年2月下旬從香港開始向其他國家蔓延。我國既是SARS暴發(fā)的起源地，也是疫情最嚴(yán)重的地區(qū)。SARS是由一種新型冠狀病毒引起的疾病，此型冠狀病毒基因組結(jié)構(gòu)與已知的其他冠狀病毒基因組結(jié)構(gòu)類似，完整的病毒顆粒呈球形，有包膜，核心由無分段的單股正鏈RNA和堿性磷酸蛋白N組成，包膜表面覆蓋有規(guī)則排列的2040NM長的棒狀或花瓣狀刺突；包膜上主要有三種糖蛋白S蛋白、M蛋白和E蛋白，其中S和M蛋白是主要的結(jié)構(gòu)性表面抗原，由病毒基因組S和M基因編碼。M蛋白是病毒顆粒中含量最豐富的糖蛋白，它是由一個短的N端、3個連續(xù)的跨膜區(qū)和一個位于毒粒內(nèi)部的C端結(jié)構(gòu)域組成的一種Ⅲ型糖蛋白。編碼M蛋白的開放閱讀框F總長為666個核苷酸，編碼221個氨基酸殘基。M蛋白的主要功能包括宿主高爾基體的整合膜蛋白、引發(fā)病毒顆粒的組裝、與病毒核衣殼N蛋白相互作用、形成病毒內(nèi)核的鞘和誘導(dǎo)Α干擾素等，而其中參與包膜的形成和參與核心的組成是M蛋白最主要的功能；此外M蛋白富含有效的中和表位，在誘發(fā)機體免疫系統(tǒng)生成抗體及產(chǎn)生細(xì)胞毒性T細(xì)胞免疫反應(yīng)上起著重要的作用，因此研究M蛋白的結(jié)構(gòu)和功能對于了解SARS的免疫損傷機理、制備有效的疫苗都具有十分重要的意義。SARS病毒通過肺組織損傷而引發(fā)肺纖維化已有報道，但對其具體的表現(xiàn)形式和發(fā)病機制尚缺乏認(rèn)識。近年來我們課題組對肺纖維化發(fā)病機制已做了相當(dāng)?shù)难芯?，根?jù)以往的研究發(fā)現(xiàn)肺間質(zhì)成纖維細(xì)胞的功能及分化、ECM合成和降解的平衡是肺纖維化發(fā)生發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。隨著防治SARS工作的不斷深入，研究肺纖維化發(fā)生發(fā)展的規(guī)律和機制、探索防治方法及途徑己成為當(dāng)務(wù)之急。由于SARS具有很高的傳染性，所以對于SARS相關(guān)樣本方面的研究必須遵守相應(yīng)的生物安全防護(hù)規(guī)則，世界衛(wèi)生組織和中國衛(wèi)生部制定了SARS相關(guān)操作所必須遵守的生物安全原則，鑒于開展活病毒研究的條件尚不具備、人體材料的應(yīng)用局限以及動物SARS模型制備的條件限制，我們考慮先從SARS致肺纖維化的細(xì)胞模型入手，利用重組有SARS結(jié)構(gòu)蛋白基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入肺間質(zhì)成纖維細(xì)胞來觀察它對FB生長特性和生物學(xué)功能的影響。目的觀察轉(zhuǎn)SARSCOVM基因的大鼠肺間質(zhì)成纖維細(xì)胞生長特性及部分生物學(xué)功能的改變；初步探討SARS病毒致肺組織損傷并最終引發(fā)肺纖維化的可能的機制和途徑。方法利用堿裂解法擴增純化質(zhì)粒包括重組質(zhì)粒PCDNA31M和空載體PCDNA31；酶消化法分離大鼠肺間質(zhì)成纖維細(xì)胞采用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法瞬時轉(zhuǎn)染質(zhì)粒入FB；采用免疫熒光染色、RTPCR和WESTERNBLOT的方法鑒定轉(zhuǎn)染結(jié)果；在轉(zhuǎn)染后24、48和72小時用MTT比色法測定細(xì)胞生長情況收集轉(zhuǎn)染后48小時的細(xì)胞采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測大鼠肺成纖維細(xì)胞的生長周期；收集轉(zhuǎn)染后48小時的細(xì)胞總RNA采用RTPCR和REALTIMEPCR的方法觀察MMP2的表達(dá)情況。結(jié)果根據(jù)免疫熒光、RTPCR和WESTERNBLOT的結(jié)果，M基因成功地瞬時轉(zhuǎn)染入肺間質(zhì)成纖維細(xì)胞，表達(dá)產(chǎn)物有SARSCOVM蛋白的抗原性；MTT和FCM顯示與轉(zhuǎn)染空載體的細(xì)胞相比轉(zhuǎn)染了PCDNA31M重組質(zhì)粒的細(xì)胞的生長明顯增強，GO／G。期比例下降，S期比例增加，尤其在48小時這個變化最為明顯；轉(zhuǎn)染后48小時細(xì)胞MMP2的表達(dá)較轉(zhuǎn)染空載體的細(xì)胞表達(dá)明顯增強。結(jié)論成功地將攜帶有M基因的真核表達(dá)質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染入大鼠肺間質(zhì)成纖維細(xì)胞，目的基因在肺間質(zhì)成纖維細(xì)胞中表達(dá)并具有與SARSCOVM相似的抗原性；SARSCOVM蛋白可以促進(jìn)大鼠肺間質(zhì)成纖維細(xì)胞的生長；同時MMP2表達(dá)增強。

簡介：J18239南華大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南華大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。作者簽名靼才詞卅年，月；口日南華大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文是本人在南華大學(xué)攻讀艇博／碩士學(xué)位期間在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的學(xué)位論文。本論文的研究成果歸南華大學(xué)所有，本論文的研究內(nèi)容不得以其它單位的名義發(fā)表。本人同意南華大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保留學(xué)位論文；學(xué)?？筛鶕?jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文。同意學(xué)校將論文加入中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫，并按中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。同意授權(quán)中國科學(xué)信息技術(shù)研究所將本學(xué)位論文收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。對于涉密的學(xué)位論文，解密后適用該授權(quán)。作者簽名弱7F目≯口口’年R月口日川T彳、锨H薌H名『到1幣J洲義氧化性低密度脂蛋白對骨髓源性平滑肌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響碩士研究生段才聞導(dǎo)師嚴(yán)鵬科副教授摘要目的建立骨髓間質(zhì)干細(xì)胞源性平滑肌細(xì)胞骨髓源性，BMSCSMC模型，以血管平滑肌細(xì)胞血管源性，VSMC為對照。系統(tǒng)比較OXLDL對兩種來源平滑肌細(xì)胞的增殖、遷移、粘附、泡沫化等生物學(xué)特性的影響，探索骨髓間質(zhì)干細(xì)胞分化的平滑肌細(xì)胞在動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程中的作用。方法采用貼壁法從SD大鼠骨髓中分離骨髓問質(zhì)干細(xì)胞BONEMESENCHYMALSTEMCELL，BMSC，從胸主動脈分離血管平滑肌細(xì)胞VASCULARSMOOTHMUSCLECELLS，VSMC。運用條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)BMSC分化成SMC，采用免疫熒光法分析骨髓問質(zhì)干細(xì)胞及其分化后的細(xì)胞特異性標(biāo)志物。80M∥LOXLDL分別處理骨髓問質(zhì)干細(xì)胞分化的平滑肌細(xì)胞72H，細(xì)胞計數(shù)法觀察兩種細(xì)胞的生長特征，流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞生長周期特征。羥脯氨酸測定法檢測兩種細(xì)胞合成細(xì)胞外基質(zhì)能力，粘附和遷移實驗檢測兩種細(xì)胞的粘附和遷移能力。蛋白免疫印記法檢測細(xì)胞清道夫受體CD36和SRA、膽固醇逆轉(zhuǎn)運蛋白ABCAL和小凹蛋白CAVEOLIN1的表達(dá)變化。結(jié)果1、分離的BMSC經(jīng)含堿性成纖維細(xì)胞生長因子BFGF和轉(zhuǎn)化生長因子TGFP的條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)分化15天后，誘導(dǎo)分化的細(xì)胞形態(tài)呈梭形平滑肌樣，表達(dá)平滑肌細(xì)胞特異性蛋白標(biāo)志物伐肌動蛋白SMQACTIN和平滑肌肌球蛋白重鏈LSMMC1，呈平滑肌細(xì)胞表型。2、BMSCSMC和VSMC細(xì)胞的生長曲線均大致呈S型，兩種細(xì)胞的倍增時間分別約為20小時和32小時。經(jīng)80M∥LOXLDL處理后，BMSCSMC和VSMC

簡介：分類號VDC博士學(xué)位論文密級HIF1Q特異性抑制劑YC1對缺氧條件下人膀胱癌細(xì)胞株T24細(xì)胞生物學(xué)行為的影響EFFECTSOFYC1TARGETINGHYPOXIAINDUCIBLEFACTOR1ALPHAINHYPOXICHUMANBLADDERUROTHELIALCARCINOMACELLLINET24作者姓名李楊樂學(xué)科專業(yè)泌尿外科學(xué)院、系所指導(dǎo)教師湘雅二醫(yī)院趙曉昆教授答辯委員會主席中南大學(xué)二O一一年五月原創(chuàng)性聲明LLIIIIIIIIIIIIIIIIT111IY1918231本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。爭作者簽名么絲顯韭日期且年』月旦日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。才一FLL作者簽名塾翌生導(dǎo)師簽名復(fù)墊日期巫年上月旦日

簡介：浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文周期性牽張力對鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)特性及RANKL、MCSF蛋白表達(dá)的影響姓名張烈焚申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師劉麗20060501游程大學(xué)磷士研究生掌氌論文研究目的1零實驗通過一乖爭先進(jìn)靜誨井細(xì)胞拉律掬力裝置，對甑骨髓基菔繃胞系ST2施加生理性及瘸理性周期牽張力，觀察細(xì)胞受力前厝細(xì)胞形態(tài)殿增殖活性靜變位。2對飄骨髓基溪綱胞系S豫分剮施加生璦性及病理餓靜周期幢舉張力，觀察分泌型及膜擻RANKL和MCSF蛋白的液達(dá)變化。材料釋方法1體外細(xì)胞加力裝置及力學(xué)刺激細(xì)胞煙力采用華中電子科披大學(xué)硬制的隧贏彎蕊細(xì)臌力學(xué)搬載儀。將ST2接靜翔特毒4的塑料培養(yǎng)稷上，繼續(xù)壤葬24H，培養(yǎng)扳上靜細(xì)胞生長弼80％匯合，將培養(yǎng)板放入加力皿內(nèi)，在加力裝鬣上進(jìn)行加力。細(xì)胞所受的張力大，L、E曩彈性板的簿越位移MM裘示，位移越大，彤變越大，表示鏹胞受牽張力越大。本實驗加力頻率潮定為O5HZ，位移為LLLLM和2MM，邸張力為1785USTRAIN及3570ⅡSTRAIN。2，騏W法測定機械力對ST2緇脆壤建的影睫細(xì)胞農(nóng)特制的培養(yǎng)扳上生長到對數(shù)生長覯對，隨機分為3組，第L組靜置不加力，第2組加力位移LMM，第3組加力位移2MM，加力時間6H。鴦鞋力后綢腿鞋2LQ4黥密度接秘予96孔扳，每緦梭靜2L魏，每魏艇200UL完全培養(yǎng)旗。以只如寵全培養(yǎng)液的孔作為空自對照組。每24H各組測定3個孔，每孑L加入20U1們T溶液59／L，繼續(xù)培養(yǎng)3H，吸去培養(yǎng)液，加入200ULD疆S0，振蕩LO趣IN，在酶聯(lián)兔疫監(jiān)濺儀上戳570N瓤測定光啜收僮A。。3。ELISA檢測機械力刺激下細(xì)胞培養(yǎng)液中分泌型RANKL、MESF的禽量細(xì)胞在特制的培養(yǎng)板上生長到對數(shù)生長期時，隨機分為2組，第L組熱力位移LM聚，第2綴艇力位移2辯難，熱力噩重閹12H。熱力_L遣程中，分裂在OH、O5H、LH、2H、3H、6H、9H、12H等8個時間點扶加力臌中各取200U1培養(yǎng)液樣品，按ELISA試劑盒的攖求進(jìn)行檢測。在酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上以450N班涮是先啜牧擅氏。4免疫沉淀WESTERNBLOT梭測機械力刺激下膜型RANL、MCSF含量一2一

簡介：山東大學(xué)博士學(xué)位論文乳腺癌細(xì)胞耐藥株的生物學(xué)特性改變與多藥耐藥、侵襲轉(zhuǎn)移的探討姓名宋科瑛申請學(xué)位級別博士專業(yè)外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師李兆亭孫靖中200151中文摘要類型。V連環(huán)素VCATENIN，YCTN，又稱斑珠蛋白PLAKO西OBIN，與D連環(huán)素高度同源60％1J上的序列相同，并結(jié)合于ECADHERIN同一部位上。V連環(huán)素的作用尚不清楚，但如果沒有V璉環(huán)素的參與，ECDCAT復(fù)合體不能改變細(xì)胞的行為。ECADLLERIN通過連環(huán)素與肌動蛋白ACTIN相連，對維持細(xì)胞形態(tài)和調(diào)節(jié)粘附具有重要作用。同質(zhì)性粘附是指同種細(xì)胞與同種細(xì)胞之間的粘附，同質(zhì)性粘附下降能促進(jìn)瘤細(xì)胞從瘤體上脫落下來，促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。ECDCAT復(fù)合體對于維持細(xì)胞同質(zhì)性粘附發(fā)揮重要作用。異質(zhì)性粘附是指瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞或宿主基質(zhì)的粘附。瘤細(xì)胞脫離瘤體侵襲到基底膜或穿過基底膜遭遇宿主基質(zhì)和宿主細(xì)胞，這一過程就是一個異質(zhì)性粘附的過程。CD44分子是分布極為廣泛的細(xì)胞表面跨膜糖蛋白。其中CDV6與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，它通過促進(jìn)癌細(xì)胞與宿主細(xì)胞或宿主基質(zhì)的異質(zhì)性粘附，使腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移能力加強。MCF7及MCF7／ADR細(xì)胞是乳腺癌研究中常用的腫瘤細(xì)胞系，后者是前者接觸阿霉素后產(chǎn)生的耐藥株。除阿霉素外，MCF7／ADR細(xì)胞還對多種藥物交叉耐藥，能穩(wěn)定地過度表達(dá)P糖蛋白PGLYCOPROTEIN，PGP，具有典型的多藥耐藥性。因此許多學(xué)者運用這兩株細(xì)胞在探索多藥耐藥機理和逆轉(zhuǎn)機制方面做了大量工作。國內(nèi)外對多藥耐藥和侵襲轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系卻缺乏相關(guān)、的文獻(xiàn)報道寸目的形態(tài)學(xué)觀察與多藥耐藥密切相關(guān)的MCF7和MCF7／ADR兩株細(xì)胞的生物學(xué)差異，對比檢測ECADLLE血、Y連環(huán)素、CD村V6的表達(dá)情況，檢測兩者超微結(jié)構(gòu)的差異。本研究的重點并非是對腫瘤的耐藥機理進(jìn)行研究，而是通過研究耐藥細(xì)胞的生物學(xué)特性嘗試揭示腫瘤化療耐藥及侵襲轉(zhuǎn)移與細(xì)胞生物學(xué)特性差異方面的內(nèi)在聯(lián)系。分析乳腺癌細(xì)胞MCF7和

簡介：復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文SOX2在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其對神經(jīng)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響姓名楊少波申請學(xué)位級別博士專業(yè)兒科學(xué)（外科）指導(dǎo)教師肖現(xiàn)民20120410SO【2在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其對神經(jīng)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響墮主堡窒壅I墮細(xì)胞核中表達(dá)，而瘤旁組織中表達(dá)呈陰性。REMTEEPCR及WESTERNBLOT結(jié)果均顯示神經(jīng)母細(xì)胞瘤組織中SOX2的表達(dá)水平明顯高于瘤旁組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義PO．05。經(jīng)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)SOX2在高分期腫瘤中的表達(dá)水平高于低分期腫瘤P0．05，且未經(jīng)化療的腫瘤其SOX2的表達(dá)水平高于經(jīng)化療的腫瘤PO．05。SOX2在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)水平與性別、年齡、腫瘤部位、大小、病理分型等參數(shù)無相關(guān)性均胗O．05。2．SO【2對神經(jīng)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響RT．PCR結(jié)果顯示在神經(jīng)母細(xì)胞瘤BE2．C細(xì)胞系中可檢測到SO【2基因RNRNA水平表達(dá)。利用慢病毒載體感染BE2．C細(xì)胞成功構(gòu)建SOX2高表達(dá)BE2CSOX2】和低表達(dá)【BE2一CSHRNM穩(wěn)定細(xì)胞。CCK．8活細(xì)胞數(shù)檢測顯示72H時BE2．C．SOX2細(xì)胞的AV值1．465±0．046高于BE2．C細(xì)胞1．01±0．018，差異有統(tǒng)計學(xué)意義PO．05；而BE2．C．SHRNA細(xì)胞的AV值0．912±0．020低于BE2．C細(xì)胞1．201±0．018，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P0．05。流式細(xì)胞儀細(xì)胞周期分析顯示BE2．C．SOX2組S期細(xì)胞百分比55．2±4．3％高于BE2．C組細(xì)胞38．6±3．5％，BE2．C．SHRNA組S期細(xì)胞百分比21．8±5．7％低于BEO．C組細(xì)胞，三組組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義火O．05，而三組細(xì)胞G0／G1期細(xì)胞百分比的比較情況呈現(xiàn)出相反的結(jié)果；BE2．C．SOX2、BE2．C及BE2．C．SHRNA組的細(xì)胞增殖指數(shù)分別為65．2±5．6％、36．3±2。8％、51．7±4．6％，三組組問比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義尸O．05。RA或BRDU干預(yù)后WESTERNBLOT檢測細(xì)胞標(biāo)志蛋白P嘶PHEDN、NF．68、VIMENTIN、S一100顯示，經(jīng)RA或BRDU干預(yù)的BE2．C．SOX2細(xì)胞其標(biāo)志蛋白表達(dá)量低于經(jīng)同種藥物干預(yù)的BE2．C細(xì)胞和空載體細(xì)胞尺O．05；而經(jīng)RA或BRDU干預(yù)的BE2．CSHRNA細(xì)胞其標(biāo)志蛋白表達(dá)量高于經(jīng)同種藥物干預(yù)的BE2．C細(xì)胞和空載體細(xì)胞尺O．05。平板克隆形成實驗顯示BE2．C。SOX2細(xì)胞的克隆形成數(shù)目103±18和克隆形成率20．6％均高于BE2．C細(xì)胞75±12，15％，而BEE。C．SHRNA細(xì)胞的克隆形成數(shù)目42±7和克隆形成率8．4％均低于BE2．C細(xì)胞，三組組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義火0．05。軟瓊脂克隆形成實驗未成功，細(xì)胞均死亡。裸鼠成瘤實驗顯示BE2．C．SOX2接種組腫瘤的生長速度和體積均大于BE2一C接種組，而BE2．C．SHRNA接種組腫瘤的生長速度和體積均低于BE2．C接種組，三組組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義PO．05。3．基因芯片檢測SOX2下調(diào)時神經(jīng)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞基因表達(dá)譜變化SOX2基因表達(dá)下調(diào)時基因表達(dá)譜芯片篩得差異表達(dá)的基因有596條，其中差異顯著的基因有FMNL、GFRA2、HISTLH2BK、CARTPT、AHNAK2、PLP2、TSPAN8、TIMP2、EPO和PRRLL等。經(jīng)REM．TIMEPCR驗證，證實芯片篩選的結(jié)果可靠。4

簡介：分類號分類號R782學(xué)校代碼學(xué)校代碼10392學(xué)科專業(yè)代碼學(xué)科專業(yè)代碼100302學(xué)號號2100904278福建醫(yī)科大學(xué)碩士研究生畢業(yè)論文微弧氧化水熱處理微弧氧化水熱處理TLM鈦合金鈦合金對人牙齦成纖維對人牙齦成纖維細(xì)胞細(xì)胞生物學(xué)行為生物學(xué)行為的影響的影響EFFECTSOFMICROARCOXIDATIONHYDROTHERMALTLMALLOYONTHEBIOLOGICALBEHAVISOFHUMANGINGIVALFIBROBLAST學(xué)位類型型醫(yī)學(xué)碩士醫(yī)學(xué)碩士所在學(xué)院院口腔醫(yī)口腔醫(yī)學(xué)院學(xué)院研究生生劉瑜瑜劉瑜瑜學(xué)科學(xué)科、專業(yè)專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)口腔臨床醫(yī)學(xué)導(dǎo)師師陳江陳江教授教授研究起止日期研究起止日期2011年7月至月至2013年3月答辯日期期2013年5月24日二○一○一三年五月1目錄英文縮略詞索引2中文摘要4英文摘要7前言10第一部分微弧氧化水熱處理TLM鈦合金理化性能的研究和人牙齦成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)13第二部分微弧氧化水熱處理TLM鈦合金對人牙齦成纖維細(xì)胞早期黏附、細(xì)胞形態(tài)及增殖的影響24第三部分LPS誘導(dǎo)下微弧氧化水熱處理的TLM鈦合金對HGF分泌IL6、MMP1表達(dá)量的影響34全文總結(jié)44參考文獻(xiàn)46綜述54個人簡歷65致謝66

簡介：第一部分目的研究SNAIL基因在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MSCS中的轉(zhuǎn)染和表達(dá)，SNAIL對骨髓基質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)性狀及生長等方面的影響，探討骨髓基質(zhì)細(xì)胞作為SNAIL基因受體細(xì)胞的可行性。方法采用密度梯度離心法、貼壁篩選法并結(jié)合傳代對成人骨髓MSC進(jìn)行純化和體外擴增，觀察細(xì)胞形態(tài)和表面標(biāo)志物的表達(dá)特點，流式細(xì)胞儀檢測骨髓MSC表面抗原表達(dá)，脂質(zhì)體法將重組真核表達(dá)載體PCAGGSNEOSNAILHA及對照空質(zhì)粒PCAGGSNEO轉(zhuǎn)染MSCS，G418篩選穩(wěn)定表達(dá)，繪制轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的生長曲線，分別于轉(zhuǎn)染后48小時和4周利用免疫熒光染色技術(shù)及免疫印跡法檢測MSCS報告基因HA及目的基因SNAIL表達(dá)情況。結(jié)果成人骨髓MSC培養(yǎng)3天后有散在呈針尖狀的貼壁細(xì)胞，7～10天后形成集落或融合呈纖維狀，3周左右細(xì)胞生長可匯合至8090％，間充質(zhì)樣細(xì)胞呈長梭形，走向趨向一致，傳代后1周左右即可融合，3～5代后基本純化，細(xì)胞形態(tài)單一，細(xì)胞排列具有典型的旋渦狀結(jié)構(gòu)。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示CD34表達(dá)陰性及CD29表達(dá)陽性；500ΜGML的G418是最適篩選濃度，PCAGGSNEOSNAILHA轉(zhuǎn)染后不同時期的MSCS在蛋白水平均可檢測到目的基因SNAIL及報告基因HA的表達(dá)；生長曲線示重組真核表達(dá)載體PCAGGSNEOSNAILHA及對照空質(zhì)粒PCAGGSNEO轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞即MSCSSNA和MSCSNEO生長曲線與未轉(zhuǎn)染的同代MSCS相比，倍增時間稍稍延長，一代時間約比未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞多一天，而MSCSSNA和MSCSNEO之間倍增時間及一代時間沒有明顯差異。結(jié)論分離培養(yǎng)的細(xì)胞為間充質(zhì)干細(xì)胞且成分單一，第3、5代細(xì)胞很純且生長旺盛，適用于做轉(zhuǎn)染或以后的研究，PCAGGSNEOSNAILHA可以在MSCS內(nèi)獲得瞬時和長期表達(dá)，且SNAIL表達(dá)對MSCS的生長速度無明顯影響。MSCS可以作為SNAIL基因的受體細(xì)胞，為下一步研究SNAIL對MSCS遷移趨化、存活抗凋亡及基質(zhì)金屬蛋白酶2分泌等生物學(xué)特性的影響奠定基礎(chǔ)。第二部分目的探討SNAIL基因修飾對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移力的影響，及磷脂酰肌醇3激酶PHOSPHATIDYLINOSITAL3KINASE，PI3K、細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶12EXTRACELLULARSIGNALREGULATEDKINASE，ERK12及P38絲裂原活化的蛋白激酶P38MITOGENACTIVATEDPROTEINKINASE，P38MAPK等信號通路在SNAIL轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移能力改變中的調(diào)控作用。方法采用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)、WESTERNBLOT方法檢測SNAIL基因修飾后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)PI3K、ERK12和P38MAPK信號通路的表達(dá)變化，用跨膜遷移實驗TRANSWELL實驗來評價MSCS的侵襲遷移能力，比較轉(zhuǎn)染SNAIL質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染對照空質(zhì)粒的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的差異，并比較用和不用各信號通路干預(yù)劑的差異。結(jié)果WESTERNBLOT結(jié)果表明，MSCSSNA細(xì)胞PERK12與總ERK12的比值顯著高于MSCSNEO組。同時，MSCSSNA細(xì)胞內(nèi)PAKT與總AKT的比值較MSCSNEO組亦顯著性增加。免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色顯示PERK12、PAKT在MSCSNEO中均為較弱的綠色熒光，且多分布在細(xì)胞胞漿內(nèi)。而在MSCSSNA中PERK12、PAKT熒光強度明顯增強，核內(nèi)亦存在較多分布。PP38在MSCSNEO和MSCSSNA細(xì)胞核和胞漿中均呈陰性表達(dá)。TRANSWELL體外跨膜侵襲遷移實驗顯示SNAIL質(zhì)粒轉(zhuǎn)染MSCSMSCSSNA較對照空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染MSCSMSCSNEO細(xì)胞遷移率增加，PI3K信號通路特異性抑制劑WTMANNIN和ERK通路抑制劑PD98059能顯著抑制此遷移率的增加。各濃度P38通路抑制劑SB203580對MSCSNEO和MSCSSNA的跨膜遷移數(shù)量均無明顯抑制作用。結(jié)論SNAIL基因修飾可增加骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞AKT、ERK12磷酸化水平，并促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的遷移，PI3K通路的特異性抑制劑WTMANNIN和ERK通路抑制劑PD98059可分別抑制SNAIL修飾誘導(dǎo)的AKT、ERK12的磷酸化，降低骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移能力；SB203580對SNAIL的促細(xì)胞遷移作用無明顯影響。PI3K和ERK信號通路在SNAIL基因促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移功能的調(diào)控中可能發(fā)揮了重要作用。第三部分目的觀察MSCS在SNAIL基因修飾后細(xì)胞膜表面相應(yīng)特異性受體CXCR4表達(dá)水平、及對SDF1的趨化能力的變化。為探索提高M(jìn)SCS移植后向受損后局部常高表達(dá)SDF1的器官組織趨化遷移能力的方法提供研究基礎(chǔ)。方法采用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色、熒光標(biāo)記流式細(xì)胞儀技術(shù)及RTPCR技術(shù)檢測SNAIL基因修飾后的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞上CXCR4受體的表達(dá)水平；采用體外TRANSWELL跨膜趨化實驗評價MSCS向SDF1的趨向遷移能力，觀察大小不同濃度的抗CXCR4中和抗體對趨化實驗的干預(yù)作用。結(jié)果流式細(xì)胞儀熒光檢測顯示，MSCSNEO和MSCSSNA細(xì)胞表面均有CXCR4受體的表達(dá)，其中MSCSSNA的陽性表達(dá)率明顯高于MSCSNEO的陽性表達(dá)率6425％±722％VS745％±091％，P結(jié)論SNAIL可上調(diào)MSCS趨化因子受體CXCR4分子的表達(dá)，并可通過這一環(huán)節(jié)促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對相應(yīng)趨化因子SDF1的趨化作用，這提示了通過上調(diào)SNAIL的表達(dá)而提高M(jìn)SCS向正調(diào)節(jié)表達(dá)SDF1的受損組織例如腦的缺血半暗帶等部位遷移效率的可行性，為提高M(jìn)SCS的遷移能力及移植效率的研究方向提供了新思路和實驗依據(jù)，并為以后進(jìn)一步開展提高M(jìn)SCS向受損組織器官遷移的在體實驗研究提供了實驗基礎(chǔ)。第四部分目的觀察SNAIL對骨髓MSCS在離體無血清培養(yǎng)下細(xì)胞骨架的變化及凋亡的影響，并研究SNAIL對MSCS在含IL4培養(yǎng)基中發(fā)生凋亡的保護(hù)作用，為探索提高M(jìn)SCS移植后存活能力的方法提供研究基礎(chǔ)。方法MSCSSNA及MSCSNEO于體外無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，ΒACTIN免疫熒光細(xì)胞染色觀察細(xì)胞骨架，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞SUBG1凋亡峰，及ANNEXINVPI雙標(biāo)法檢測細(xì)胞早期凋亡率ANNEXINVPI％，并比較SNAIL轉(zhuǎn)染及未轉(zhuǎn)染的MSCS即MSCSNA及MSCNEO在以上方面的差異。同樣的方法，MSCSSNA及MSCSNEO在含IL420NGML和不含IL4的完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時后，收集細(xì)胞流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果無血清培養(yǎng)24小時后，MSCSSNA細(xì)胞骨架排列保持正常有序分布狀態(tài)，細(xì)胞長極存在較長的應(yīng)力纖維束，細(xì)胞輪廓清晰；而MSCSNEO細(xì)胞骨架排列出現(xiàn)紊亂，基本細(xì)胞形態(tài)尚保持。結(jié)論經(jīng)SNAIL基因修飾，MSCS骨架結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性及在體外無血清培養(yǎng)或IL4等促凋亡因素存在的環(huán)境中抗凋亡能力增加。第五部分目的研究SNAIL基因修飾對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MMP2表達(dá)的影響，及細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶12EXTRACELLULARSIGNALREGULATEDKINASE，ERK12和PI3KAKT信號通路在SNAIL轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞MMP2表達(dá)改變中的調(diào)控作用。方法應(yīng)用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法將攜帶SNAIL基因的重組載體PCAGGSNEOSNAILHA導(dǎo)入體外培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中，用G418篩選獲得陽性細(xì)胞。采用RTPCR檢測細(xì)胞內(nèi)MMP2MRNA的表達(dá)，明膠電泳酶譜分析細(xì)胞上清液中基質(zhì)金屬蛋白酶2MMP2的活力，并比較轉(zhuǎn)染SNAIL質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染對照空質(zhì)粒的MSCS的差異；阻斷實驗以不同濃度ERK激酶特異性抑制劑PD98059或和PI3K通路特異性抑制劑WTMANNIN干預(yù)后WESTERNBLOT檢測MSCS細(xì)胞ERK、AKT磷酸化水平變化，確定PD98059和WTMANNIN分別抑制SNAIL誘導(dǎo)的MSCS細(xì)胞ERK激酶和AKT激酶磷酸化的有效濃度，進(jìn)而研究其對SNAIL轉(zhuǎn)染MSCSMMP2MRNA水平及培養(yǎng)上清中MMP2活性的影響。結(jié)論SNAIL能促進(jìn)MSCS的MMP2的轉(zhuǎn)錄及MMP2蛋白的表達(dá)。MMP2可能是MSCS的細(xì)胞內(nèi)受轉(zhuǎn)錄因子SNAIL調(diào)控作用的耙基因之一，且ERK12及PI3K轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活在此過程中具有調(diào)控作用。