一種靶向-穿膜肽的設(shè)計(jì)、合成及活性研究.pdf

1、藥物遞送系統(tǒng)是指在空間、時(shí)間及劑量上全面調(diào)控藥物在體內(nèi)分布的技術(shù)體系。現(xiàn)在市場(chǎng)上的許多藥物，特別是需要跨過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)發(fā)揮作用的抗腫瘤藥物，普遍存在的問題是跨膜效率低和藥物靶向性差，由此引起的一系列副反應(yīng)，影響了藥物的應(yīng)用和發(fā)展。細(xì)胞穿膜肽，是由幾個(gè)到四十幾個(gè)氨基酸組成的多肽分子，可以跨過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞，自發(fā)現(xiàn)以來，以其低毒、高效的跨膜特性受到業(yè)內(nèi)的廣泛關(guān)注。目前大量研究已經(jīng)證實(shí)，環(huán)形細(xì)胞穿膜肽具有更好的跨膜特征。細(xì)胞靶向肽，利用

2、靶向細(xì)胞和非靶向細(xì)胞之間的差異，如受體表達(dá)類型、pH等，選擇性的定位到特定病灶部位，協(xié)助藥物更好的發(fā)揮生物學(xué)作用。
　　本課題中利用環(huán)形細(xì)胞穿膜肽與細(xì)胞靶向肽相連，以提高其對(duì)腫瘤細(xì)胞的靶向性和攜帶藥物穿過細(xì)胞膜的能力，從而降低對(duì)正常細(xì)胞的毒副作用。流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，藥物濃度為5μmol/L，作用時(shí)間2h，結(jié)果表面多肽載體可以攜帶更多的熒光(FITC)標(biāo)記進(jìn)入細(xì)胞，而且相同條件下的激光共聚焦實(shí)驗(yàn)顯示，酰胺成環(huán)cTAT和cR9類似物在DU

3、-145、U251和PC-3腫瘤細(xì)胞系中不僅可以進(jìn)入細(xì)胞并在細(xì)胞核中有明顯分布，這與FITC對(duì)照組只是黏附在細(xì)胞膜表面形成鮮明的對(duì)比，并且可以觀察到細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯變化，這是細(xì)胞死亡的開始。刃天青實(shí)驗(yàn)，藥物載體濃度為50μmol/L，25μmol/L和12.5μmol/L，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明單獨(dú)的多肽藥物載體對(duì)非腫瘤細(xì)胞HEK-293A細(xì)胞具有較低的殺傷作用，細(xì)胞的存活率在80％以上，腫瘤細(xì)胞系U251細(xì)胞存活60%以上。綜上所述，多肽載體可