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1、目的:1.通過對(duì)膜穿透肽的分子組成及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)分析,摸擬設(shè)計(jì)新型膜穿透肽序列,為尋找更多更有效的多肽類載體奠定基礎(chǔ).2.通過對(duì)新型膜穿透肽的穿膜功能及穿膜特性研究,為今后將其作為載體應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù),同時(shí)也為進(jìn)一步探討膜穿透肽的穿膜機(jī)制提供線索.方法:利用蛋白質(zhì)分析軟件Peptool life對(duì)大量膜穿透肽序列進(jìn)行系統(tǒng)分析,掌握其空間結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)特點(diǎn),并結(jié)合各種氨基酸的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)特征,設(shè)計(jì)合成具有更強(qiáng)穿透能力的膜穿透肽類似物.然后用此
2、合成肽與體外培養(yǎng)的大鼠肝細(xì)胞在不同環(huán)境條件下進(jìn)行共育,觀察其穿膜運(yùn)動(dòng)情況,通過免疫熒光染色法檢測(cè)鑒定.最后在計(jì)算機(jī)Photoshop軟件上,測(cè)量細(xì)胞熒光灰度值,并應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,研究其穿膜能力與溫度、濃度、時(shí)間及細(xì)胞功能狀態(tài)之間的關(guān)系.結(jié)論:1.這種新型膜穿透肽具有穿膜能力強(qiáng)、穿透速度快的特點(diǎn),可成為一種新的有效的多肽類載體.2.此膜穿透肽的穿膜過程不依靠受體介導(dǎo)、不依賴ATP提供能量,也不是通過內(nèi)吞作用來完成.3.此膜穿
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