根癌農桿菌介導的Barnase和iaaM基因轉化柑橘的研究.pdf

1、柑橘是世界上最重要的水果之一。近30年來，世界鮮食柑橘品種的改良主要圍繞品質和成熟期等育種目標進行，而果實無核、易剝皮、風味濃和有香味又是決定品質優(yōu)良的標準。運用傳統(tǒng)的育種手段進行柑橘果實品質的改良，具有周期長、受珠心胚干擾、自交不親和及基因間的緊密連鎖等因素的影響，因而進程緩慢。植物基因工程的出現(xiàn)，成為實現(xiàn)目標性狀改良的一種快速、有效的途徑。通過基因工程誘導單性結實或特異表達種子切除的細胞毒素基因（Barnase）策略成為柑橘無核分子

2、育種的主要手段。本實驗利用根癌農桿菌介導的遺傳轉化體系，將目的基因TA29：Barnase及AGL5：iααM轉入特色多核柑橘品種，以期獲得高品質的無核柑橘新種質。主要研究結果如下：
　　 1．對卡那霉素及頭孢霉素進行不同濃度梯度的敏感性試驗分析，發(fā)現(xiàn)卡那霉素篩選濃度為50 mg/L，頭孢霉素的濃度為400 mg/L時，有利于抗性植株的篩選再生，并可有效地抑制“逃逸體”的產(chǎn)生。
　　 2．優(yōu)化選擇早實枳實生苗莖段和椪柑上

3、胚軸切段不定芽的再生體系。結果表明早實枳實生苗莖段和椪柑上胚軸切段不定芽再生的最佳培養(yǎng)基分別為：MT+BA0.5 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L和MT+BA0.5 mg/L+NAA0.1mg/L、MT+BA0.5 mg/L+IAA0.2mg/L。
　　 3．利用早實枳實生苗莖段和椏柑上胚軸切段進行遺傳轉化，結果表明早實枳不定芽再生率明顯高于椪柑。同時利用椪柑不同的外植體材料，如：子葉、上胚軸切段、根軸連接