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文檔簡介
1、 本實驗室從發(fā)病鵝群中分離到數(shù)十株NDV強毒，并對其部分生物學(xué)特性進行了鑒定。同時，對其中的ZJI分離株進行了全基因組測序，首次研究發(fā)現(xiàn)該毒株的基因組核苷酸總數(shù)為15192bp而不是以往所報道的15186bp?！ ”狙芯繕?gòu)建了含該毒株NP、P和L基因的表達載體并對P基因進行了融合表達鑒定；利用ZJI株NDV微型基因組對3個表達載體進行了功能鑒定；應(yīng)用基因定點突變技術(shù)對該毒株全基因組cDNA克隆進行了定點突變；將基因組cDNA克隆和輔
2、助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染BSR-T7/5細胞繼而接種SPF雞胚后，拯救出了有感染性的ZJI株NDV強毒，并通過血凝(HA)和血凝抑制(HI)、間接免疫熒光(IFA)、電鏡觀察和序列測定等方法對獲救病毒進行了鑒定；同時，對獲救病毒與野生型病毒進行了部分生物學(xué)特性比較，結(jié)果表明拯救出的NDV強毒株與野生型病毒具有相同的生物學(xué)特性。鵝源NDV強毒株的拯救成功為國內(nèi)外首次報道，所建立的鵝源NDV反向遺傳系統(tǒng)將成為NDV功能基因組研究和新型疫苗研制等研究中強
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