疫苗接種對我國新城疫病毒進化的影響及新城疫LaSota疫苗株全長cDNA克隆.pdf

1、新城疫是由新城疫病毒引起的一種烈性病毒性傳染病,是當今全球范圍內(nèi)最嚴重的家禽傳染病之一,也是我國所有雞病中危害最大的一種,被國際獸疫局列為A類傳染病.該病發(fā)病急、致死率高,對養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展構(gòu)成嚴重的威脅.
　　在我國主要廣泛接種新城疫疫苗來控制該病的感染,由于減毒活疫苗使用相對方便,因此它常被用于群體免疫.我國NDV免疫密度和次數(shù)也遠遠超過世界水平.由于大面積的疫苗使用,新城疫得到了較好的控制,但近些年來,NDV出現(xiàn)了一些新的疫情,

2、在免疫過的雞群中即使能產(chǎn)生高的抗體滴度,新城疫仍時有爆發(fā).而且大量使用的疫苗株難免流失到環(huán)境中,目前那些散落在環(huán)境中的疫苗毒株對新城疫病毒本身造成的影響并沒有完全了解.
　　為了確定在我國廣泛應用的新城疫疫苗是否對該病毒進化進程產(chǎn)生影響,在本研究中,我們對在我國流行的新城疫病毒進行了系統(tǒng)發(fā)生和重組分析,獲得了一系列NDV間疫苗參與的同源重組的證據(jù),表明疫苗可能通過同源重組影響我國新城疫病毒的進程.由于疫苗與流行株之間的重組可能導致

3、出現(xiàn)疫苗接種失敗的后果,因此,在臨床上應當盡可能避免疫苗與野生株之間的重組.故在NDV防治過程中,應該采用合適的免疫程序避免這種重組的發(fā)生.
　　由于負鏈RNA病毒重組率很低的觀點被廣泛接受,因此尚沒有人系統(tǒng)研究過NDV之間是否存在重組現(xiàn)象.當然,這個問題在NDV疫苗使用過程中也一直被忽略,至今沒有任何有關(guān)NDV疫苗參與病毒進化方面的報道.NDV間重組的機制完全未知.通過評估病毒重組在NDV生物學性狀,特別是疫苗重組后對病毒毒力變

4、化中的影響,了解重組對NDV遺傳多樣性方面究竟有多大作用,以確定NDV是否能夠開發(fā)為一種安全的疫苗載體.因此有必要建立NDV同源重組的實驗系統(tǒng),為NDV疫苗株和流行株的重組提供實驗室證據(jù).反向遺傳系統(tǒng)的建立是研究NDV同源重組的前提,因此,本研究擬以廣泛用來預防新城疫的一種弱毒疫苗的NDV LaSota株為材料,構(gòu)建NDV反向遺傳系統(tǒng).首先我們對其進行了純化和擴增.然后針對NDV LaSota株設(shè)計了十二對引物,然后采用RT-PCR對全