一株新城疫病毒強毒株的分離鑒定及致病性研究.pdf

1、新城疫是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus，NDV)引起的一種急性、敗血性傳染病，該病可造成雞的大量死亡，對養(yǎng)雞業(yè)危害嚴重。加強對該病的診斷方法和致病性的研究對預防和控制雞新城疫的發(fā)生，保護和促進養(yǎng)雞業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。本研究內(nèi)容包括兩部分：
　　 一、新城疫病毒RT-PCR診斷方法的建立
　　 根據(jù)GenBank中新城疫F基因序列設計合成了1對引物擴增相對保守的550bp的目的片段，建立了新

2、城疫病毒病的RT-PCR診斷方法。該方法能從新城疫病毒SD株擴增到550bp的特異性片段，而傳染性法氏囊病毒、H9N2亞型流感病毒、雞馬利克病毒擴增結果為陰性，敏感性試驗最低檢出量的cDNA濃度為3pg/μL。表明所建立的RT-PCR方法特異性強、敏感性高。
　　 二、新城疫病毒致病性研究
　　 在本研究中從山東省的發(fā)病雞群中分離了1株病毒，經(jīng)HA、HI試驗和病毒回歸試驗確定所分離的毒株為新城疫病毒，命名為SD株。按常規(guī)

3、方法測得SD株的生物學毒力指標MDT、ICPI和IVPI分別為47.4h、1.975和2.85，雞胚半數(shù)致死量LD50為10-9.6。通過RT-PCR擴增出了SD株的F基因，通過分析其融合蛋白氨基酸序列發(fā)現(xiàn)，SD屬于基因Ⅶ型，其多肽裂解位點為112-RRQKRF-117。表明SD株為NDVⅦ型強毒株。新城疫SD株與近幾年國內(nèi)外分離的基因Ⅶ型同源性較高，在93.5％-98.3％；與近幾年分離的鵝源＼鴨源同源性也較高在95.2％-96.5％