漢灘病毒重組腺病毒疫苗的基礎(chǔ)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:構(gòu)建漢灘病毒重組腺病毒疫苗并分析其誘導(dǎo)的免疫效果,探索發(fā)展新型的漢灘病毒疫苗.方法:1.分別擴(kuò)增和克隆漢灘病毒的M基因、G1和G2基因并進(jìn)行序列分析.用桿狀病毒載體表達(dá)上述基因編碼的重組蛋白.2.用腺病毒載體構(gòu)建重組腺病毒vAd-G1、vAd-G2及vAd-M,用Western blotting等方法鑒定目的基因的表達(dá).3.采用重組腺病毒單獨(dú)免疫、重組腺病毒與DNA疫苗聯(lián)合免疫的方法接種小鼠,用ELISA、ELISPOT、流式細(xì)胞

2、分析等技術(shù)觀察誘導(dǎo)的體液免疫、細(xì)胞免疫和黏膜免疫反應(yīng).用表達(dá)漢灘病毒M片段的重組痘病毒攻擊免疫的地鼠,分析重組腺病毒疫苗誘導(dǎo)的保護(hù)效果.結(jié)果:1.用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)在昆蟲(chóng)細(xì)胞中成功表達(dá)了漢灘病毒G1和G2蛋白.表達(dá)的重組蛋白與病人血清和用滅活病毒免疫的兔血清均發(fā)生特異性反應(yīng).結(jié)果表明,表達(dá)的蛋白具有良好的抗原性.2.漢灘病毒重組腺病毒疫苗免疫動(dòng)物能誘導(dǎo)特異的免疫應(yīng)答.重組腺病毒vAd-M誘導(dǎo)出較高水平的中和抗體和細(xì)胞免疫應(yīng)答.重組腺病毒

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