雷公藤對1型糖尿病大鼠Foxp3基因表達(dá)的作用研究.pdf

1、目的研究Foxp3基因在大鼠1型糖尿病模型中的表達(dá)及雷公藤對其表達(dá)的影響，以期探討Foxp3基因表達(dá)的變化在1型糖尿病發(fā)病機(jī)制中的意義。 方法：將Wistar大鼠隨機(jī)分成三組：Ⅰ組為正常對照，Ⅱ組為糖尿病組、Ⅲ組為雷公藤組，Ⅱ組、Ⅲ組采用完全福氏佐劑聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法制備大鼠1型糖尿病模型，成模后Ⅲ給予雷公藤多甙(GTT)灌胃，1次/d，連續(xù)3個月，其中每隔1個月每組各處死一批。處死大鼠后分離血清用間接

2、ELISA法測定自身抗體的水平；取胰腺做HE染色觀察其病理變化；淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(MTT法)檢測脾單個核細(xì)胞增殖活性；提取外周血及脾單個核細(xì)胞總RNA，實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time PCR)檢測Foxp3 mRNA的表達(dá)；應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測淋巴結(jié)和脾組織中Foxp3蛋白的表達(dá)，并與對照組進(jìn)行比較。 結(jié)果：小劑量多次腹腔注射STZ成功制造了大鼠1型糖尿病模型，成模率87.88％。成模后Ⅱ、Ⅲ組血糖均較I組明顯

3、升高(P<0.01)，此后3個月一直維持在高水平；胰島相關(guān)自身抗體檢測結(jié)果顯示Ⅱ、Ⅲ組大鼠血清平均自身抗體的水平明顯高于Ⅰ組(P<0.05)；胰腺HE染色示Ⅱ、Ⅲ組大鼠胰腺間質(zhì)及胰島中可見以淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞浸潤，Ⅲ組在給藥2個月后炎性細(xì)胞浸潤程度較Ⅱ組減輕，3個月后減輕更加明顯；Ⅱ、Ⅲ組單個核細(xì)胞增殖活性均較Ⅰ組明顯升高(P<0.01)，用藥后3個月中Ⅲ組呈下降趨勢，Ⅱ組持續(xù)在高水平；Ⅱ、Ⅲ組在成模后1、2、3個月中外周

4、血及脾單個核細(xì)胞Foxp3 mRNA水平均較Ⅰ組升高(P<0.05)，其中，Ⅲ組表達(dá)水平較Ⅱ組進(jìn)一步升高(2、3月后升高明顯)，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。3個月中隨著時間的推移，Ⅰ組組間無明顯變化，Ⅲ組間外周血和脾單個核細(xì)胞Foxp3 mRNA表達(dá)水平呈升高趨勢，而Ⅱ組組問呈降低趨勢；Foxp3蛋白表達(dá)水平Ⅱ、Ⅲ組均普遍高于Ⅰ組(P<0.05)，Ⅲ組表達(dá)水平較Ⅱ組有所升高，但差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論：F