HBV及其抗原成分拮抗α干擾素抗病毒活性的初步研究.pdf

1、目的：探討HBV及其抗原成份對(duì)α干擾素（IFN-α）抗病毒活性可能存在的拮抗機(jī)制。
　　 方法：逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)IFN-α處理的HepG2.2.15細(xì)胞在不同處理時(shí)間點(diǎn)的STAT1、STAT2、IRF-9 mRNA表達(dá)水平，并比較分析干擾素抗病毒蛋白MxA mRNA在HepG2和HepG2.2.15細(xì)胞中的表達(dá)；以表達(dá)抗病毒蛋白MxA的重組質(zhì)粒pcDNA3.1-Flag-MxA (wild-type) 轉(zhuǎn)染

2、肝胚瘤細(xì)胞株HepG2.2.15細(xì)胞，采用ELISA和Real-time PCR法分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染的HepG2.2.15細(xì)胞上清HBV抗原和細(xì)胞外HBV DNA；將HBV核心蛋白表達(dá)質(zhì)粒（pHBc-EGFP）轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞，通過(guò)RT-PCR法分析IFN-α抗病毒蛋白MxA、PKR和2'-5'OAS mRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：研究發(fā)現(xiàn)IFN-α處理后HepG2.2.15細(xì)胞STAT1、STAT2、IRF-9 mRNA表達(dá)水平

3、明顯升高，抗病毒蛋白MxA mRNA在HepG2.2.15細(xì)胞中未被檢測(cè)到，而在HepG2細(xì)胞中卻能表達(dá)；轉(zhuǎn)染 MxA重組質(zhì)粒的HepG2.2.15細(xì)胞能夠表達(dá)MxA，并顯示MxA具有一定的抗HBV活性；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)染HBV核心蛋白（HBc）表達(dá)質(zhì)粒的HepG2細(xì)胞中，抗病毒蛋白PKR和2'-5'OAS mRNA表達(dá)水平未見(jiàn)明顯改變，而MxA mRNA表達(dá)水平顯著降低。
　　 結(jié)論：HBV及其抗原成份（HBc）并不影響α干