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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本實(shí)驗(yàn)的目的是在制備戊四氮點(diǎn)燃大鼠模型的基礎(chǔ)上,觀察厄多司坦在對(duì)致癇大鼠海馬中超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)活力和及丙二醛(MDA)含量的變化以及神經(jīng)元損傷的影響,研究厄多司坦清除自由基、保護(hù)神經(jīng)元的作用,探討其抗癲癇作用的機(jī)理以及癲癇大鼠神經(jīng)元凋亡與氧化應(yīng)激的關(guān)系。
方法:
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組:健康成年雄性SD大鼠,隨機(jī)分為3組:戊四氮組(n=10),厄多司坦組(n=10)和對(duì)照
2、組(n=10)。
2.癲癇模型的制備及干預(yù):采用Dihel點(diǎn)燃癲癇模型制作方法,對(duì)戊四氮組和厄多司坦組大鼠每日一次腹腔注射戊四氮50mg/kg制作癲癇點(diǎn)燃模型,厄多司坦組于點(diǎn)燃前用厄多司坦50mg/kg腹腔注射進(jìn)行干預(yù)處理。模型動(dòng)物連續(xù)3次達(dá)到錯(cuò)誤!未找到引用源。-錯(cuò)誤!未找到引用源。級(jí)發(fā)作后觀察30分鐘,記錄首次發(fā)作潛伏期與發(fā)作時(shí)間。
3.取材及實(shí)驗(yàn)測(cè)定:達(dá)到點(diǎn)燃標(biāo)準(zhǔn)后全體模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被斷頭取腦,迅速取出海馬組織,
3、采用比色法檢測(cè)大鼠海馬 SOD、GSH-PX活力以及 MDA含量。采用TUNEL染色法及HE染色法觀察大鼠海馬神經(jīng)元損傷情況。
結(jié)果:
1.按照Racine的標(biāo)準(zhǔn),戊四氮組與厄多司坦組動(dòng)物均達(dá)到點(diǎn)燃,對(duì)照組無(wú)癲癇發(fā)作。戊四氮組中一只動(dòng)物死亡,從本實(shí)驗(yàn)排除。厄多司坦組大鼠發(fā)作時(shí)間較戊四氮組顯著減少。兩組首次發(fā)作潛伏期無(wú)顯著性差異。
2.戊四氮組和厄多司坦組大鼠海馬SOD活力與正常組相比較均顯著降低:戊四氮組與
4、對(duì)照組間具有顯著性差異;厄多司坦組與對(duì)照組間也具有顯著性差異。厄多司坦組較戊四氮組SOD活力顯著升高。戊四氮組與對(duì)照組比較,MDA含量顯著升高,厄多司坦組與對(duì)照組比較無(wú)顯著差別。戊四氮組GSH-PX活力顯著低于對(duì)照組和厄多司坦組,厄多司坦組與對(duì)照組之間無(wú)顯著性差異。
3. HE染色結(jié)果:對(duì)照組大鼠海馬神經(jīng)元排列緊密,邊緣清晰,胞漿透明,細(xì)胞核形態(tài)正常,未見(jiàn)嗜酸性神經(jīng)元。厄多司坦組大鼠海馬神經(jīng)元排列較緊密,可見(jiàn)有散在的神經(jīng)元嗜酸
5、性改變。戊四氮組大鼠海馬神經(jīng)元排列散亂、胞體皺縮、胞漿紅染及核固縮。厄多司坦組較戊四氮組嗜酸性神經(jīng)元顯著減少。TUNEL染色結(jié)果:與對(duì)照組相比,厄多司坦組和戊四氮組TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞均顯著增多,厄多司坦組較戊四氮組 TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞顯著減少。
4.癲癇組(戊四氮組與厄多司坦組)大鼠海馬凋亡神經(jīng)元數(shù)量與SOD活力和MDA含量之間的相關(guān)性分析,凋亡神經(jīng)元數(shù)量與SOD活力呈負(fù)相關(guān),凋亡神經(jīng)元數(shù)量與MDA含量呈正相關(guān)。
結(jié)
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