補氣藥預(yù)防慢性應(yīng)激致海馬神經(jīng)元損傷研究.pdf

1、應(yīng)激導(dǎo)致的海馬神經(jīng)元損傷疾病,呈逐年上升趨勢,嚴(yán)重危害人類健康?；谠擃惣膊“l(fā)病機(jī)制及發(fā)病特點,認(rèn)為該類疾病預(yù)防重于治療。關(guān)于預(yù)防藥物的應(yīng)用尚無相關(guān)報道,利用中藥的自身優(yōu)勢和特點,將其應(yīng)用于該類疾病的預(yù)防是解決此類健康問題的方法之一,中醫(yī)臨床數(shù)據(jù)顯示此類疾病的中醫(yī)分型,兼有脾虛與氣虛癥較多,進(jìn)一步對防治此類疾病的主要中藥類別進(jìn)行文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)健脾補氣類中藥在實驗研究中倍受關(guān)注,且得到一系列的基礎(chǔ)實驗數(shù)據(jù),所以本文以補氣藥為研究對象,就此展

2、開研究探討。
　　 目的:通過在皮質(zhì)酮皮下注射(20mg/kg)制備慢性應(yīng)激致神經(jīng)元損傷的小鼠模型的過程中,給予健脾補氣類中藥水提物,評估該類中藥對慢性應(yīng)激導(dǎo)致的神經(jīng)元損傷的預(yù)防療效。確定有確切療效的中藥作為研究對象,觀察中藥對慢性應(yīng)激損傷神經(jīng)元發(fā)病各環(huán)節(jié)的的影響,探討其作用機(jī)制。主要檢測指標(biāo)包括血清皮質(zhì)激素水平、NF-L(神經(jīng)輕鏈蛋白)、SYP(突觸囊泡蛋白)、BDNF(神經(jīng)營養(yǎng)因子)、GDNF(膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子)、GFA

3、P(膠質(zhì)酸性纖維蛋白)、S-100(酸性Ca2+結(jié)合蛋白)、EATT(酸性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白)等。確定中藥預(yù)防慢性應(yīng)激致神經(jīng)元損傷的有效性及作用機(jī)制。
　　 方法:根據(jù)臨床療效與文獻(xiàn)報道確定補氣藥如人參等中藥為本實驗的研究對象,選用C57BL/6N小鼠為實驗研究動物;采用皮質(zhì)酮皮下注射的方法制備慢性應(yīng)激模型;實驗將動物按體重隨機(jī)分組,造模過程中同時給予中藥水提物(使用臨床應(yīng)用劑量),實驗結(jié)束后分別進(jìn)行體重、免疫器官重量、行為學(xué)表現(xiàn)檢

4、測,應(yīng)用放免法測定血中皮質(zhì)激素水平,應(yīng)用蛋白免疫印記技術(shù)檢測中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。實驗一完成中藥篩選,實驗二再次確定篩選藥物的有效性及其作用機(jī)制,實驗三根據(jù)實驗進(jìn)程設(shè)計實驗進(jìn)一步探討實驗二結(jié)論。
　　 結(jié)果:實驗結(jié)果顯示所選用的各健脾補氣類中藥水提物均表現(xiàn)出對神經(jīng)元保護(hù)作用的趨勢,尤其是人參水提物效果最佳,各項指標(biāo)與模型組比較均顯示出顯著性差異(P＜0.01),借此篩選結(jié)果進(jìn)行更進(jìn)一步的實驗設(shè)計探討人參改善神經(jīng)元損傷的

5、機(jī)理。結(jié)果顯示與模型組相比較:人參水提物能夠改善模型鼠行為學(xué)變化(P＜0.01)及神經(jīng)元結(jié)構(gòu)蛋白的下調(diào)(P＜0.01),同時能夠顯著上調(diào)神經(jīng)系統(tǒng)的營養(yǎng)因子(P＜0.01),且不能改善慢性應(yīng)激導(dǎo)致的血清皮質(zhì)激素水平上升及由其導(dǎo)致的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷標(biāo)志性蛋白的表達(dá),提示應(yīng)用人參水提物后并沒有阻止損傷的發(fā)生,綜合上述結(jié)果提示人參通過增強(qiáng)神經(jīng)元修復(fù)功能發(fā)揮作用。實驗三結(jié)果顯示:在正常情況下人參水提物亦能夠上調(diào)相關(guān)神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)。