慢性應(yīng)激對大鼠海馬神經(jīng)元突觸后膜谷氨酸AMPA受體的影響.pdf

1、目的:本研究圍繞慢性應(yīng)激是如何影響海馬神經(jīng)元突觸后膜AMPA受體，進(jìn)而導(dǎo)致海馬空間認(rèn)知功能的改變這一問題，從空間認(rèn)知功能，血清皮質(zhì)酮，谷氨酸能傳遞(AMPA受體亞基)，及相關(guān)蛋白(PICK1、PSD-95)四方面，深入探討慢性應(yīng)激對海馬突觸后膜谷氨酸受體的影響。
　　方法:雄性Sprague-Dawley大鼠48只，隨機(jī)分配到對照組(n=16)、應(yīng)激組(n=16)和恢復(fù)組(n=16)，建立慢性不可預(yù)見性應(yīng)激模型，并對恢復(fù)組大鼠在3

2、5天慢性應(yīng)激后給予5周時間的自然恢復(fù)。應(yīng)激模型和恢復(fù)模型結(jié)束后進(jìn)行行為測試，考察大鼠海馬空間學(xué)習(xí)和記憶功能的變化，行為實驗包括曠場實驗、巴恩斯迷宮實驗。行為實驗后，通過Elisa測量血清皮質(zhì)酮含量;免疫組織化學(xué)方法檢驗谷氨酸AMPA受體亞基GluA1，GluA2，GluA3在海馬不同亞區(qū)的表達(dá)分布變化;并通過探索其相關(guān)蛋白PICK1和PSD-95的表達(dá)分布變化來探索其調(diào)節(jié)機(jī)制。
　　結(jié)果:①從曠場試驗的行為學(xué)結(jié)果和皮質(zhì)酮檢測的生理

3、學(xué)結(jié)果顯示，慢性應(yīng)激模型建立成功，且在恢復(fù)期得到一定恢復(fù)。②從巴恩斯迷宮的行為學(xué)結(jié)果可知，慢性應(yīng)激導(dǎo)致大鼠空間記憶的獲得，保持，提取能力下降。對照組與恢復(fù)組在在巴恩斯迷宮學(xué)習(xí)階段第三天比模型組相比顯著減少。在測試階段，對照組、恢復(fù)組在尋找洞數(shù)上顯著多于模型組，且在目標(biāo)洞區(qū)域重復(fù)尋找次數(shù)的模型組顯著高于其他兩組。③從皮質(zhì)酮Elisa實驗結(jié)果可知，慢性應(yīng)激引起血清皮質(zhì)酮含量上升，顯著高于對照組和恢復(fù)組。④慢性應(yīng)激對大鼠海馬谷氨酸受體AMPA

4、亞基產(chǎn)生影響，主要表現(xiàn)為模型組海馬的GluA1，GluA2，GluA3蛋白表達(dá)上升，顯著高于對照組和恢復(fù)組。在不同海馬分區(qū)，模型組海馬的GluA2，GluA3和GluA3均顯著高于對照組，恢復(fù)組。模型組海馬GluA1在CA1區(qū)域、CA3區(qū)域與對照組恢復(fù)組差異不顯著。⑤慢性應(yīng)激對大鼠海馬谷氨酸受體AMPA亞基相關(guān)蛋白的影響:模型組海馬DG區(qū)，CA1區(qū)，CA3區(qū)，模型組PICK1蛋白表達(dá)顯著高于對照組，恢復(fù)組。而對于PSD-95，三組蛋白表

5、達(dá)水平?jīng)]有顯著差異。
　　結(jié)論:①慢性應(yīng)激導(dǎo)致的大鼠記憶和行為等空間認(rèn)知能力障礙，可在應(yīng)激源移除35天后得到恢復(fù)，表明慢性應(yīng)激對大鼠認(rèn)知能力的影響是可逆的。②大鼠血清皮質(zhì)酮水平的變化表明，皮質(zhì)酮在慢性應(yīng)激過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用，慢性應(yīng)激對記憶和行為的影響與糖皮質(zhì)激素的水平相關(guān)。③慢性應(yīng)激條件下，大鼠海馬谷氨酸AMPA受體及其亞基發(fā)生改變，表明AMPA受體蛋白表達(dá)水平的改變，是慢性應(yīng)激通過改變海馬結(jié)構(gòu)，進(jìn)而影響海馬功能的重要機(jī)制。