家兔蛛網(wǎng)膜顆粒形態(tài)結(jié)構(gòu)及蛛網(wǎng)膜下腔出血后蛛網(wǎng)膜顆粒TGF-β1表達(dá)的研究.pdf

1、第一部分家兔蛛網(wǎng)膜顆粒形態(tài)結(jié)構(gòu)與顱內(nèi)分布的研究
　　 目的:掌握家兔蛛網(wǎng)膜顆粒在顱內(nèi)的分布情況及形態(tài)結(jié)構(gòu)特點。
　　 材料與方法:新西蘭兔20只。靜脈麻醉后,6只經(jīng)皮穿刺小腦延髓池注入亞甲藍(lán)0.6ml,術(shù)后取頭低位。2小時后斷頭處死,去除顱部骨質(zhì),觀察兔顱內(nèi)蛛網(wǎng)膜顆粒的分布情況;8只經(jīng)心臟灌注4％多聚甲醛溶液后取材,將含有蛛網(wǎng)膜顆粒的組織塊按照從左到右順序連續(xù)切片,切片厚度為0.5μm,進(jìn)行HE染色,光鏡下觀察蛛網(wǎng)膜顆粒

2、顱內(nèi)分布情況及大體結(jié)構(gòu);6只兔經(jīng)取材后分別行掃描電鏡和透射電鏡觀察,明確蛛網(wǎng)膜顆粒表面結(jié)構(gòu)和內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)。
　　 結(jié)果:
　　 1 家兔小腦延髓池注入亞甲藍(lán)后觀察,可見蛛網(wǎng)膜下腔、視神經(jīng)鞘部、橫竇及上矢狀竇內(nèi)均有藍(lán)染,以橫竇內(nèi)染料濃集最為明顯,初步認(rèn)為橫竇內(nèi)含有蛛網(wǎng)膜顆粒。
　　 2 HE染色發(fā)現(xiàn)AG大體可以分為頸部、體部和底部三部分;其結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)出多樣性,有球形、分葉狀、花樣等。
　　 3 掃描電鏡顯示蛛

3、網(wǎng)膜顆粒有的獨立存在,有的則成簇聚集在一起形如葡萄串樣,表面有許多大小不等的突起;在AG的頂部和側(cè)面還可見一些小的孔隙。
　　 4 透射電鏡見蛛網(wǎng)膜顆粒外層的上皮細(xì)胞內(nèi)有較多的吞飲小泡、大的空泡以及指狀的微絨毛存在;顆粒的內(nèi)部有細(xì)胞間間隙存在。AG上皮細(xì)胞間連接大多數(shù)連接緊密,但某些部位連接較松弛,細(xì)胞連接間間隙擴張。
　　 結(jié)論:
　　 1 家兔蛛網(wǎng)膜顆粒在橫竇內(nèi)分布最為集中。
　　 2 家兔的AG有孤

4、立存在和成簇聚集兩種形式;其結(jié)構(gòu)與人的AG相似可以分為頸部、體部和底部三部分,側(cè)面和項部有小的孔隙,表面有大小不一形態(tài)各異的突起。AG有球形,分葉形,及菜花樣等多種形態(tài)。
　　 3 AG內(nèi)的空泡和微胞飲小泡以及大的細(xì)胞外池等結(jié)構(gòu)可能在腦脊液循環(huán)過程中發(fā)揮重要作用。腦脊液通過微胞飲和空泡機制進(jìn)行主動轉(zhuǎn)運;而細(xì)胞外池則參與了腦脊液的被動轉(zhuǎn)運。
　　 第二部分家兔SAH后蛛網(wǎng)膜顆粒TGF-β1表達(dá)的研究
　　 目的:建

5、立兔蛛網(wǎng)膜下腔出血模型,研究出血狀態(tài)下蛛網(wǎng)膜顆粒FGF-β1的表達(dá)特點,為闡釋蛛網(wǎng)膜下腔出血后AG的改變提供理論基礎(chǔ)。
　　 材料與方法:新西蘭兔36只,隨機分成對照組和實驗組。對照組6只;實驗組按時間點分為A、B、C、D、E、F等6個亞組,分別代表SAH后1天、3天、5天、7天、10天、12天,每個亞組5只。麻醉后穿刺小腦延髓池抽出針蕊見清亮腦脊液流出后,實驗組取兔耳正中動脈血0.5ml/kg,經(jīng)穿刺針緩慢注入,建立蛛網(wǎng)膜下腔

6、出血模型;對照組注入生理鹽水,需要注意的是注射血液或生理鹽水前應(yīng)先抽取等量的腦脊液。實驗各組到時間點經(jīng)多聚甲醛灌注后取材;對照組在各時間點分別取1只灌注后取材,然后進(jìn)行免疫組化染色,分析各組TGF-β1表達(dá)特點。
　　 結(jié)果:對照組家兔蛛網(wǎng)膜顆粒內(nèi)部偶見有TGF-β1陽性表達(dá)。實驗組中蛛網(wǎng)膜顆粒TGF-β1陽性表達(dá)較為明顯。胞質(zhì)豐富的胞漿內(nèi)可見散在分布棕黃色顆粒。出血后1天即有陽性表達(dá),3天漸增多,5天時表達(dá)量明顯增高,達(dá)到高峰