LHRH-A原料藥的質量研究.pdf

1、多肽類藥物是介于傳統(tǒng)的小分子化學藥物和蛋白大分子藥物之間的一類藥物。盡管多肽類藥物屬于化學藥物范疇，但其制備方法、結構鑒定和質量研究與其他小分子化學藥物都有著很大的不同。因此，多肽類藥物的質量控制和研究面臨新的挑戰(zhàn)。近年來隨著多肽合成技術的提高以及多肽藥物在臨床中越來越多的應用，合成多肽藥物已經(jīng)成為藥品研發(fā)的熱點領域。
　　LHRH-A原料藥是一種合成的水溶性線性九肽。是一種強效的促性腺激素釋放激素激動劑，是視丘下部所產(chǎn)生的黃體生

2、成激素釋放激素的高活性類似物，臨床上用于激素依賴型腫瘤的治療。其原料藥和制劑在美國藥典和歐洲藥典均有收載，相關原料藥和制劑在國內已經(jīng)有上市產(chǎn)品，但在中國藥典尚未收載;且國內對LHRH-A原料藥的質量研究也還未有詳細報道。本文主要對LHRH-A原料藥的結構確證研究、雜質譜研究和有關物質分析方法的建立方面予以重點闡述，以期為多肽類藥物質量研究控制提供參考。
　　(1)結構確證研究:依據(jù)多肽結構確證指導原則，結合LHRH-A自身的結構特

3、點，對其進行如下研究:USP標準物質和LHRH-A原料藥的紅外光譜、紫外光譜、核磁共振譜、HPLC保留時間比對，氨基酸組分分析、MS分子量測定、比旋度測定。以上各方法均確證了LHRH-A的結構特征。
　　(2)雜質譜研究:通過對LHRH-A的合成工藝和可能降解途徑進行研究，同時參考美國和歐洲藥典中LHRH-A各論項下的指定雜質，歐洲藥典對于合成多肽雜質的推薦控制限度，研展LHRH-A的雜質譜研究。最終確定本生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的LHRH-

4、A原料藥，無大于0.5％的雜質，大于0.1％的雜質如下:主峰相鄰前雜為雜質B(2-D-His-LHRH-A)，主峰相鄰后雜為雜質M(缺失肽4-Ser-LHRH-A)。
　　(3)RP-HPLC有關物質分析方法建立:采用Sepax GP-C18(150mm×4.6mm，3μm)為色譜柱，以三乙胺緩沖液-正丙醇乙腈混合溶液為流動相，進行等度洗脫90分鐘;流速:0.9mL/min;柱溫:35℃;檢測波長:220nm;進樣量:20μL。L

5、HRH-A與各已知雜質及強制破壞產(chǎn)生的降解產(chǎn)物均分離良好;雜質B和雜質M在0.001mg/mL～0.02mg/mL濃度范圍內呈良好的線性關系（r2≥0.999，n=6），且校正因子（相對于LHRH-A）均為1.09;雜質B和雜質M的平均回收率(n=9)分別為96.1％和108.3％，RSD分別為1.6％和3.0％;重復性試驗雜質B、雜質M和總雜RSD(n=6)分別為0.85％、1.9％和1.7％;各考察項下進樣精密度主峰面積RSD(n=