LHRH-A原料藥的質(zhì)量研究.pdf

1、多肽類藥物是介于傳統(tǒng)的小分子化學(xué)藥物和蛋白大分子藥物之間的一類藥物。盡管多肽類藥物屬于化學(xué)藥物范疇，但其制備方法、結(jié)構(gòu)鑒定和質(zhì)量研究與其他小分子化學(xué)藥物都有著很大的不同。因此，多肽類藥物的質(zhì)量控制和研究面臨新的挑戰(zhàn)。近年來隨著多肽合成技術(shù)的提高以及多肽藥物在臨床中越來越多的應(yīng)用，合成多肽藥物已經(jīng)成為藥品研發(fā)的熱點領(lǐng)域。
　　LHRH-A原料藥是一種合成的水溶性線性九肽。是一種強(qiáng)效的促性腺激素釋放激素激動劑，是視丘下部所產(chǎn)生的黃體生

2、成激素釋放激素的高活性類似物，臨床上用于激素依賴型腫瘤的治療。其原料藥和制劑在美國藥典和歐洲藥典均有收載，相關(guān)原料藥和制劑在國內(nèi)已經(jīng)有上市產(chǎn)品，但在中國藥典尚未收載;且國內(nèi)對LHRH-A原料藥的質(zhì)量研究也還未有詳細(xì)報道。本文主要對LHRH-A原料藥的結(jié)構(gòu)確證研究、雜質(zhì)譜研究和有關(guān)物質(zhì)分析方法的建立方面予以重點闡述，以期為多肽類藥物質(zhì)量研究控制提供參考。
　　(1)結(jié)構(gòu)確證研究:依據(jù)多肽結(jié)構(gòu)確證指導(dǎo)原則，結(jié)合LHRH-A自身的結(jié)構(gòu)特

3、點，對其進(jìn)行如下研究:USP標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和LHRH-A原料藥的紅外光譜、紫外光譜、核磁共振譜、HPLC保留時間比對，氨基酸組分分析、MS分子量測定、比旋度測定。以上各方法均確證了LHRH-A的結(jié)構(gòu)特征。
　　(2)雜質(zhì)譜研究:通過對LHRH-A的合成工藝和可能降解途徑進(jìn)行研究，同時參考美國和歐洲藥典中LHRH-A各論項下的指定雜質(zhì)，歐洲藥典對于合成多肽雜質(zhì)的推薦控制限度，研展LHRH-A的雜質(zhì)譜研究。最終確定本生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的LHRH-

4、A原料藥，無大于0.5％的雜質(zhì)，大于0.1％的雜質(zhì)如下:主峰相鄰前雜為雜質(zhì)B(2-D-His-LHRH-A)，主峰相鄰后雜為雜質(zhì)M(缺失肽4-Ser-LHRH-A)。
　　(3)RP-HPLC有關(guān)物質(zhì)分析方法建立:采用Sepax GP-C18(150mm×4.6mm，3μm)為色譜柱，以三乙胺緩沖液-正丙醇乙腈混合溶液為流動相，進(jìn)行等度洗脫90分鐘;流速:0.9mL/min;柱溫:35℃;檢測波長:220nm;進(jìn)樣量:20μL。L

5、HRH-A與各已知雜質(zhì)及強(qiáng)制破壞產(chǎn)生的降解產(chǎn)物均分離良好;雜質(zhì)B和雜質(zhì)M在0.001mg/mL～0.02mg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系（r2≥0.999，n=6），且校正因子（相對于LHRH-A）均為1.09;雜質(zhì)B和雜質(zhì)M的平均回收率(n=9)分別為96.1％和108.3％，RSD分別為1.6％和3.0％;重復(fù)性試驗雜質(zhì)B、雜質(zhì)M和總雜RSD(n=6)分別為0.85％、1.9％和1.7％;各考察項下進(jìn)樣精密度主峰面積RSD(n=