簡(jiǎn)介：加介次掌碩士論文奶牛乳腺炎主要病原菌的調(diào)查以凝固酶陰性葡萄球菌為重點(diǎn)作者姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)所在學(xué)院提交日期中國(guó)杭州INVESTIGATIONONMAJBOVINEMASTITIS一CAUSINGBACTERIAWITHEMPHASISONCOAGULASE一NEGATIVESTAPHYLOEOECIADISSERTATIONSUBMITTEDFORDEGREEOFMASTERBYTINGHESUPERVISORSONGHUAHUDEPARTMENTOFVETERINARYMEDIEINE，COLLEGEOFANIMALSEIENEESZHEJIANGUNIVERSITY，HANGZHOU，ZHEJIANG，CHINAMAY2010

簡(jiǎn)介：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文中藥對(duì)奶牛乳腺抗氧化作用的影響姓名張宇翔申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)動(dòng)物生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師高學(xué)軍20090618東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文IIEFFECTOFHERBSONANTIOXIDATIVEACTIVITIESOFBOVINEMAMMARYGLABSTRACTCHINESEHERBSWHICHISEXCLUSIVEINOURCOUNTRYMADEOFPLANTSHAVEAUNDANTNATURALRESOURCESALONGHISTYTHEYCANSOLVETHEPROBLEMOFRESIDUESINBODYCHEMICALRESISTANCEINSTOCKFARMINGSOITISWELLKNOWNTHATHERBSBARELYDOHARMTOANIMALSSOMEOFTHEMWHICHCONTAINSLOTSOFPROTEINSVITAMINSMINERALELEMENTSHAVEPHARMACODYNAMICACTIONNUTRITIONASWELLRECENTLYWITHTHERAPIDDEVELOPMETINLIVINGSTARDPEOPLEHAVEALARGERLARGERREQUIREMENTOFMILKPRODUCTSRAISINGDIARYCOWSHOWSGREATDEVELOPMENTOUTLOOKTHOUGH“CHINASMELAMINEMILKCRISIS“IN2008HASCREATEDAVERYBADIMPRESSIONITISIMPTANTEMERGENTTOCHOOSESAFEHIGHEFFICIENTCHINESEHERBSADDITIVESFIMPROVINGTHELACTATIONOFDIARYCOWWEEDSEVENCHINESEHERBSAMONGTHECOMPOUNDRECIPESEXTENSIVELYUSEDINHUMANBEINGSTOINCREASETHELEVELOFMILKWHICHWERECOWHERBSEEDASTRAGALUSMEMBRANACEUSRHAPONTICUMUNIFLUMCLEMATISARMIIMEDULLATETRAPANACISTARAXACUMOGONOMANISPENTADACTYIALINNAEUSJUICEFROMTHEHERBSAFTERBOILINGWASEXTRACTEDTOBEUSEDINCELLCULTURETHETOPICSTUDIEDDAIRYCOWSINCLUDEEXPERIMENTSINVITROANIMALEXPERIMENTSTHETOPICDETECTEDFREERADICALSANTIOXIDASEANTIOXIDANTAGENTANTIOXIDATIVEMICROELEMENTTOTALANTIOXIDATIVECAPABILITYINBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSMILKTHETOPICALSODETECTEDTHECHANGEOFMILKYIELDMILKQUALITYTHEINTENSIONISTOINVESTIGATETHEEFFECTSOFHERBSONANTIOXIDATIVEACTIVITIESOFBOVINEMAMMARYGLASWELLASITSMECHANISMTHERESULTSSHOWEDASFOLLOWSEXCEPTFCLEMATISARMIIALLTHEOTHERHERBSCANRESTRICTREMOVEFREERADICALSREDUCINGTHEGENERATIONOFMDASURPRESSPEROXIDATICREACTIONREINFCINGANTIOXIDATIVEACTIVITIESOFBOVINEMAMMARYGLINBOTHANIMALEXPERIMENTSEXPERIMENTSINVITRO（P005）CLEMATISARMIIONLYENHANCEDANTIOXIDANTACTIVITYINVITRO（P005）THESTUDYREVEALEDTHATCHINESEHERBSCOULDSIGNIFICANTLYENHANCETHEANTIOXIDANTFUNCTIONOFANTIOXIDANTSYSTEMREDUCEOXIDATIVEDAMAGEOFMAMMARYTISSUETHEYGUARANTEEDHEALTHNMALFUNCTIONOFBREASTINDAIRYCOWSINCREASEDTHEMILKYIELDPROVIDEDANEWWAYFTHEPREVENTIONOFMAMMARYGLINCREASELACTATINGOFMILKANIMALSKEYWDSDIARYCOWHERBSMAMMARYGLANTIOXIDANTACTIVITYCIDATEZHANGYUXIANGSPECIALITYANIMALBIOCHEMISTRYMOLECULARBIOLOGYSUPERVISPROFGAOXUEJUN

簡(jiǎn)介：ANHUIAGRICULTURALUNIVERSITYMASTERDISSERTATIONEFFECTSOFCHINESEHERBALMEDICINEEXTRACTSONMAMMARYEPITHELIALCELLPROLIFERATIONINMICEANSWERERZHOUFANADVISOR一WUJINIIE’______I________●一一L______●_______●_____I●____●●__●______一MAJORRESEARCHFIELD篁堡曼INARYCLINICALDIAGNOSTIC’‘‘■‘’。。‘’。’’‘__一一____________________一INSTITUTE￡Q星絲QFAMIMALSCIENCEANDTECHNOLOGY，1?！??！?。。。‘’。I一1R，_______L_●____●一ANSWERCOMMITTEECHAIRMANJUNE2010獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝二凸二思0學(xué)位論文作者簽名二恥簽字日期加／。年‘月戶日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文件，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文，向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書。學(xué)位論文作者簽名盟簽字日期≯／。年／月卜日學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向工作單位通信地址指導(dǎo)教師簽名單簽字日期矽L口年易月F口日電話郵編

簡(jiǎn)介：CANDIDATESUPERVISORACADEMICDEGREEAPPLIEDFORSPECIALITYDATEOF0RALEXAMINATIONUNIVERSITY脅ZEXUANASSOCIATEPROFQUJUANJUANMASTEROFSCIENCEMICROBIOLOGYMAY2010NORTHEASTAGRICULTURALUNIVERSITY●L■■●LRF，置皇曼暑寰曼量暑詈皇詈曼鼉曼鼉暑皇皇鼉暑暑鼉皇葛鼉呈主圣鼉暑詈皇曼鼉鼉曼一|IIIIFIIIIRLILLLRLFLIIIIIIIIIIIIIIIIIIRLL11IIF量皇獸曼曼詈詈皇詈曼鼉墨鼉暑鼉皇置皇鼉量皇皇詈鼉暑詈暑詈皇詈皇曼曼皇量皇葛曼皇詈量魯F|目錄Y1787389中文摘要I英文摘要II1前言111奶牛乳腺炎的危害112誘發(fā)奶牛乳腺炎的病因2121金黃色葡萄球菌2122大腸桿菌2123鏈球菌213奶牛乳腺免疫學(xué)機(jī)制3131體液免疫3132細(xì)胞免疫314金黃色葡萄球菌奶牛乳腺炎的生物防治3141金黃色葡萄球菌的生物學(xué)特性。4142金黃色葡萄球菌的致病機(jī)理4143金黃色葡萄球菌黏附素的種類、結(jié)構(gòu)與功能。4144抗金黃色葡萄球菌奶牛乳腺炎疫苗的研究615課題研究思路92材料和方法1021材料。10211質(zhì)粒、菌株和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物L(fēng)O212主要試劑LO213主要溶液及配置方法10214主要儀器LO22實(shí)驗(yàn)方法LO221基因的克隆LO222重組表達(dá)載體的構(gòu)建15223大腸桿菌DH5A感受態(tài)細(xì)胞的制作15224重組表達(dá)載體的轉(zhuǎn)化15225質(zhì)粒DNA小量純化試劑盒提取質(zhì)粒16226重組表達(dá)質(zhì)粒的鑒定16227目的蛋白的真核表達(dá)16228目的蛋白的原核表達(dá)18229疫苗的制作192210小鼠免疫20221LELISA檢測(cè)抗體水平202212血清活性實(shí)驗(yàn)2L2213小鼠乳腺炎模型攻毒實(shí)驗(yàn)223結(jié)果與分析。2331目的基因的PCR擴(kuò)增結(jié)果2332重組表達(dá)載體的酶切鑒定結(jié)果2533序列分析結(jié)果2734WESTERNBLOTTING鑒定目的蛋白在293T細(xì)胞中表達(dá)的結(jié)果3LR

簡(jiǎn)介：ASSOCIATIONOFCHEMOKINERECEPTORGE．NECXCRLPOLYMORPHISMSWITHMASTITISINDAIRYCOWTHESISSUBMITTEDTOQINGDAOAGRICULTURALUNIVERSITYINFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEDEGREEOFMASTEROFAGRONOMYZHOULEIDEPARTMENTOFANIMALSCIENCEANDVETERINARYMEDICINESUPERVISORPROF．LIUNANQINGDAO，CHINAJUNE’20062．2．3CXCRL和CXCR2的處理2．2．4基因型分型2．2．5測(cè)序2．2．6統(tǒng)計(jì)分析2．3試驗(yàn)材料2．4主要儀器設(shè)備和藥品試劑2．4．1主要儀器設(shè)備2．4．2實(shí)驗(yàn)主要試劑162．4．3主要試劑的配制2．5實(shí)驗(yàn)方法2．5．1奶牛DNA的提取2．5．2DNA溶液吸光度的測(cè)定2．5．3瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)2．5．4牛奶體細(xì)胞測(cè)定161718202．5．5巢式PCR弓L物的設(shè)廿與擴(kuò)增2．5．6CRS．PCR．RFLP的過(guò)程2．5．7CXCRL基因第2外顯子各SNP位點(diǎn)多態(tài)性分析2．5．8聚丙烯酰胺凝膠電泳2．5．9銀染檢測(cè)2．6數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法2．6．】數(shù)據(jù)收集和處理2．6．2基因頻率和基因型頻率的計(jì)算2．6．3HARDY．WEINBERG平衡檢驗(yàn)2．6．4遺傳多態(tài)性分析2．6．5不同基因型與生產(chǎn)性狀的相關(guān)分析2．6．6CXCRICXCR2基因單倍型分析3．結(jié)果與分析?283．1DNA的抽提結(jié)果3．2牛CXCRL基因的PCR結(jié)果303030孔M衛(wèi)篤拍”一

簡(jiǎn)介：在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的，學(xué)位論文中不包含其他個(gè)四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已山IOM∥月H日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)人學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留力向國(guó)家有關(guān)部I’J或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印什平電子版，允許論文被商閱和借閱，可以采JLJ影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意四川I農(nóng)業(yè)人學(xué)可以川不同方式住不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生繇蒯巷導(dǎo)師簽名寥鄉(xiāng)山／，拜6月己2日。乒崢≮S試陋本實(shí)驗(yàn)研究由㈣舢㈣㈣刪Y18014石岑山東省中青年科學(xué)家基金B(yǎng)S2009NY002，山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新課題2009現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)體系NYCYTX一0107提供資助

簡(jiǎn)介：分類號(hào)S8521學(xué)校代碼10129UDC577學(xué)號(hào)08201057Β防御素5MRNA在荷斯坦奶牛乳腺上皮細(xì)胞中的表達(dá)THEEXPRESSIONOFΒDEFENSIN5MRNAINMAMMARYEPITHELIALCELLSOFHOLSTEINCOWS申請(qǐng)人凃勇學(xué)科門類農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)研究方向動(dòng)物組織胚胎與發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師曹貴方教授論文提交日期二〇一一年四月THEEXPRESSIONOFΒDEFENSIN5MRNAINMAMMARYEPITHELIALCELLSOFHOLSTEINCOWABSTRACTCOWMASTITISISACOMPLEXCOMPREHENSIVEBREASTDISEASEITCANBECAUSEDBYMANYPATHOGENICMICROGANISMSINVADINGMAMMARYGLSOITISDIFFICULTTOPREVENTCOWMASTITISCURRENTLYTHERESEARCHESTHATUSINGΒDEFENSINTOTREATMASTITISARERAREFIRSTLYINTHISSTUDYWEUSEDCOLLAGENASEDIGESTIONTRYPSINCHOSENDIGESTIONMETHODTOISOLATEPURIFYBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSAFTERTHATESTABLISHINGMAMMARYEPITHELIALCELLSMODELOFEXPERIMENTALMASTITISBYADDINGLPSPRODUCEDMAINLYBYECOLIINFECTIONREALTIMEPCRWASUSEDTODETECTTHELEVELSOFMRNAEXPRESSIONOFSOMECYTOKINEINMAMMARYEPITHELIALCELLSINCLUDINGIL6TNFΑΑCASEINBNBD5THERESULTSSHOWTHATTHEMRNAEXPRESSIONOFINFLAMMATYFACTIL6IL12TNFΑINMAMMARYEPITHELIALCELLSWERENOTABLELYUPREGULATEDP001COMPAREDWITHTHECONTROLGROUPTHEMRNAEXPRESSIONOFΑCASEINWASMARKEDLYDOWNREGULATEDP001WHICHILLUSTRATEDTHATADDITIONOFLPSINDUCEDCERTAININFLAMEINEPITHELIALCELLSFURTHERMETHEEXPRESSIONOFBNBD5WASATTHEHIGHESTLEVELWHENMAMMARYEPITHELIALCELLSWERETREATEDBY300NGMLLPSF48HOURSTHEREWASSIGNIFICANTDIFFERENCEP001COMPAREDWITHTHECONTROLGROUPTHERESULTSCONFIRMTHATBNBD5MAYPARTICIPATEINTHEDEFENSEMECHANISMOFMASTITISBYADDINGLPSTHERESULTSOFTHISSTUDYWILLPROVIDEFURTHERFOUNDATIONFUSINGBNBD5TOTREATMASTITISKEYWDSMAMMARYEPITHELIALCELLS；BNBD5；LPS；EXPRESSIONOFMRNADIRECTEDBYPROFCAOGUIFANGAPPLICANTFMASTERDEGREETUYONGHISTOLOGYDEVELOPMENTALBIOLOGYTHECOLLEGEOFVETERINARYANIMALSCIENCEINNERMONGOLIAAGRICULTURALUNIVERSITYHUHHOT010018CHINA

簡(jiǎn)介：MECHANISMOFEXPERSSREGULATIONANDFUNCTIONOFCLUSTERINGENEINDAIRYCOWM【ASTITISBYWANGZE舛NGSUPERVISORPROFESSORWANGGENLINATH．置SISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFDLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORDOCTOROFAGRONOMYTHECOLLEGEOFANIMALSCIENCEANDTECHNOLOGYNANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYNANJING，210095，P．RCHINACOMPLETEDINAPRIL，2012COMMENCEMENTINMAY,2012本研究由“十二五’’國(guó)家科技計(jì)劃課題編號(hào)2011BAD28802國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目編號(hào)31000543資助SUPPORTEDBYTHEGRANTSFROMTHEKEYPROJECTSFORDAIRYINDUSTRYFROMMINISTRYOFSCIENCEANDTECHNOLOGYOFCHINANO．2011BAD28802NATIONALNATURALSCIENCEFOUNDATIONOFCHINANO．31000543

簡(jiǎn)介：II獨(dú)創(chuàng)聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得（注如沒有其他需要特別聲明的，本欄可空）或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽字學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)學(xué)校學(xué)?？梢詫W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。（保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書）學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽字簽字日期年月日簽字日期年月日

簡(jiǎn)介：英文題目一EFFECTOFWEANINGONMAMMARY_GLANDINNATE一導(dǎo)專論文提交日學(xué)位授予日期致謝三年的研究生生活一晃而過(guò)，回首走過(guò)的歲月，心中倍感充實(shí)。論文即將完成之日，心里有種即將離開多年來(lái)～直陪伴我的老師和各位同學(xué)，感慨良多。首先誠(chéng)摯地感謝我的導(dǎo)師李宏基副教授。自入學(xué)以來(lái)，導(dǎo)師對(duì)我學(xué)習(xí)、生活，以及個(gè)人能力的培養(yǎng)都倍加關(guān)心，傾注著先生的心血。李老師以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)之道、寬厚仁慈的胸懷、積極樂觀的生活態(tài)度，為我樹立了學(xué)習(xí)的典范，他的教誨與鞭策為我在以后生活道路上受用終生。此外，我對(duì)王月影副教授也由衷的感激。從論文的選題，試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)的操作到論文的撰寫，王老師都傾注了大量心血和勞動(dòng)。嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)風(fēng)，深刻的思想，敏捷的思維，堅(jiān)實(shí)的理論功底，以及高尚的品格，為我樹立了人生的楷模，尤其是王老師高度的責(zé)任感和奉獻(xiàn)精神，更是深深地感染了我。實(shí)驗(yàn)室的和諧氣氛讓我體會(huì)到了集體的溫暖，和他們?cè)谝黄鹩蟹N兄弟姐妹的感情，相處的如此融洽令我不忍想象我即將畢業(yè)。感謝實(shí)驗(yàn)室的楊國(guó)慶老師、楊國(guó)宇老師、邊傳周老師、韓立強(qiáng)老師、郭豫杰老師、鐘凱老師、朱河水老師、魯維飛老師、查光明老師和王林楓老師對(duì)本課題提出寶貴建議和熱情指導(dǎo)，給予了極大的支持和幫助。感謝同屆的研究生陳福偉、謝佳喜、李文林、牛惠、孫婭麗、常磊、高建偉，他們?cè)谏詈驮囼?yàn)中給予了我兄弟姐妹般的關(guān)懷。感謝賀翠婷、孟麗麗、汪新建、胡士峰、周博、李軍濤、蔡德敏、余娟、吳偉、王叢梅、李曉翠師弟師妹對(duì)我的關(guān)心。對(duì)我學(xué)業(yè)最支持的當(dāng)然是家人，感謝他們竭盡所能地為我提供良好的學(xué)習(xí)環(huán)境，用無(wú)私的愛默默支持著我，誠(chéng)樸正直的品質(zhì)，這些都是我受益終身的財(cái)富，并激勵(lì)我積極進(jìn)取、頑強(qiáng)拼搏。感謝所有親人們給予我成長(zhǎng)的關(guān)懷，祝你們永遠(yuǎn)健康平安。感謝朋友在試驗(yàn)進(jìn)行和論文撰寫期間給予了充分的理解和支持，感謝她所給的無(wú)可替代精神安慰。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文密級(jí)粘附素CIFA和CNA對(duì)金黃色葡萄球菌乳腺炎的免疫保護(hù)研究THEIMMNNOPROTECTIONRESEARCHOFADHESINSCLFAANDCNAAGAINSTTHESTAPHYLOCOCCUSAUREUSMASTITIS研究生龔瑞指導(dǎo)教師郭愛珍教授指導(dǎo)小組陳煥春教授金梅林教授周銳教授何啟蓋教授吳斌教授方六榮教授專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)獲得學(xué)位名稱農(nóng)學(xué)碩士研究方向動(dòng)物傳染病學(xué)獲得學(xué)位時(shí)間2010年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院二OO年六月本研究由國(guó)家“十一五“科技攻關(guān)奶業(yè)重大專項(xiàng)“奶牛主要疾病綜合防控技術(shù)研究及開發(fā)’’編號(hào)2006BAD04A05資助

簡(jiǎn)介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO130910790DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREEEFFECTOFGLYCYLTRNASYNTHETASEONLACTOGENESISANDCELLPROLIFERATIONOFBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSCANDIDATEGUXINYUSUPERVISORPROFGAOXUEJUNDEGREECATEGORYMASTEROFSCIENCECOLLEGECOLLEGEOFLIFESCIENCEFIRSTLEVELDISCIPLINEBIOLOGYSECONDLEVELDISCIPLINEBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGY一一HARBINCHINAJUNE2016東北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文3結(jié)果與分析2231BMECS的原代培養(yǎng)2232加MET、FBS后對(duì)BMECS乳合成以及細(xì)胞增殖的影響23321加MET、FBS后對(duì)BMECS乳糖分泌的影響23322加MET、FBS后對(duì)BMECSTG分泌的影響24323加MET、FBS后對(duì)BMECS增殖的影響25324MET、FBS調(diào)節(jié)BMECS中相關(guān)基因的表達(dá)26325加MET、FBS后對(duì)PGIYRS核定位的影響2733GLYRS過(guò)表達(dá)后可上調(diào)BMECS的乳合成及細(xì)胞增殖29331GLYRS過(guò)表達(dá)后增加BMECS乳糖的分泌29332GLYRS過(guò)表達(dá)后增加BMECSTG的分泌29333GLYRS過(guò)表達(dá)后促進(jìn)DNA合成及加快細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換30334GIYRS過(guò)表達(dá)后增加IMOALT2的MRNA表達(dá)量32335GIYRS過(guò)表達(dá)后增加相關(guān)蛋白的表達(dá)3234GLYRS抑制后可下調(diào)BMECS的乳合成及細(xì)胞增殖33341GLYRS干擾片段的篩選33342GLYRS抑制后減少BMECS乳糖的分泌35343GLYRS抑制后減少BMECSTG的分泌36344GIYRS抑制后減少DNA合成及減緩細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換37345GIYRS抑制后降低184GALT2的MRNA表達(dá)量39346GLYRS抑制后降低相關(guān)蛋白水平的表達(dá)一394討論4141BMECS的原代培養(yǎng)、純化及鑒定4142MET和FBS對(duì)BMECS乳合成及細(xì)胞增殖的影響一41421MET和FBS對(duì)乳蛋白、乳脂及乳糖合成的影響41422MET和FBS對(duì)BMECS增殖能力的影響42423MET和FBS對(duì)GLYRS表達(dá)的影響42424MET和FBS對(duì)PGLYRS表達(dá)及入核的影響4243GLYRS對(duì)BMECS乳合成以及細(xì)胞增殖的影響43431GLYRS對(duì)BMECS乳蛋白合成的影響43432GLYRS對(duì)BMECS乳脂合成的影響43433GLYRS對(duì)BMECS乳糖合成的影響43434GIYRS過(guò)表達(dá)與抑制對(duì)PGIYRS表達(dá)的影響44435GIYRS對(duì)細(xì)胞增殖的影響445結(jié)論46致謝47參考文獻(xiàn)48附錄55II

簡(jiǎn)介：ANHUIAGRICULTURALUNIVERSITYMASTERDEGREETHESISPRODUCTIONOFTRANSGENICPIGSBREEDINGMATERIALSPOTENTIALLYRESISTANTTOPORCINEDIARRHOEABYRNAINTERFERENCEANDMAMMARYGLANDBIOREACTORPOSTGRADUATECANDIDATECHENJIANWENACADEMICSUPERVISORASSOC．PROF．ZHANGYUNHAIPROF．ZHANGXIAORONGC011EGEOFANIMALSCIENCEANDTECHNOL。GY，ANHUIAGRICULTURALUNIVERSITY，HEFEI，230036ANHUI，P．R．CHINAJUNE，2012獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名牲時(shí)間3,07Z／年伽，秒日關(guān)于論文使用授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生虢Z墾熬導(dǎo)師簽名時(shí)間加F2，年莎月／稠／時(shí)間勱T礦么月廠。日

簡(jiǎn)介：T工’L’龕J分類學(xué)校代碼Q墨魚ICS學(xué)號(hào)螋籩萎￡≈芰事3萋‘碩士學(xué)位論文牛乳腺炎無(wú)乳鏈球菌PGK基因抗原優(yōu)勢(shì)區(qū)序列的克隆與原核表達(dá)CIONINGANDPROKARYOTICEXPRESSIONOFPGKGENEAMTIGENICPREVAIENTSEQUENCESOFBOVINEMASTITISSTREPTOCOCCUSAGALACTIAE申請(qǐng)人張海寶學(xué)科專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向畜禽傳染病發(fā)病機(jī)制及防制技術(shù)研究指導(dǎo)教師布日額教授論文提交日期二。一一年四月摘要目的構(gòu)建無(wú)乳鏈球菌PGK基因抗原優(yōu)勢(shì)區(qū)序列的重組原核表達(dá)載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌中表達(dá)，并對(duì)其表達(dá)蛋白的反應(yīng)原性進(jìn)行鑒定。方法提取無(wú)乳鏈球菌臨床分離菌株基因組DNA，根據(jù)GENBANK公布的無(wú)乳鏈球菌PGK基因序列，應(yīng)用DNASTAR軟件的PROTEAN程序預(yù)測(cè)PGK基因抗原表位、親水性和抗原性指數(shù)等參數(shù)，并設(shè)計(jì)引物，PCR擴(kuò)增出PGK基因抗原優(yōu)勢(shì)區(qū)序列。將其插入至表達(dá)質(zhì)粒PET一30A的多克隆位點(diǎn)MCS，構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒PGKPET一30A，將PGKPET一30A轉(zhuǎn)入BL21DE3，IP，ILG誘導(dǎo)表達(dá)并優(yōu)化誘導(dǎo)表達(dá)條件J應(yīng)用SDSPAGE電泳分析表達(dá)蛋白圖譜。利用WESTERNBLOT驗(yàn)證重組表達(dá)蛋白的反應(yīng)原性，運(yùn)用NI2親和層析法在自然條件下純化并獲得重組蛋白。結(jié)果經(jīng)測(cè)序和酶切分析結(jié)果表明，克隆獲得了無(wú)乳鏈球菌PGK基因抗原優(yōu)勢(shì)區(qū)序列，且插入片段讀碼框架正確，原核表達(dá)重組質(zhì)粒構(gòu)建正確。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)，PGKPET一30A／BL21DE3表達(dá)出相對(duì)分子質(zhì)量為35KD的可溶性融合蛋白，表達(dá)量占菌體總蛋白量的438％。WESTERN咱LOT結(jié)果表明重組蛋白具有良好的反應(yīng)原性，純化后蛋白含量為503MG／ML。結(jié)論成功克隆牛乳腺炎無(wú)乳鏈球菌PGK基因抗原優(yōu)勢(shì)區(qū)序列，該序列長(zhǎng)度為984BP，編碼328個(gè)氨基酸殘基，構(gòu)建的重組表達(dá)載體在大腸桿菌中獲得高效可溶性表達(dá)，并驗(yàn)證了重組PGK蛋白的反應(yīng)原性，為奶牛乳腺炎的檢測(cè)及流行病學(xué)調(diào)查提供理論和技術(shù)上的支持。關(guān)鍵詞牛乳腺炎；無(wú)乳鏈球菌；PGK基因；克隆；原核表，、

簡(jiǎn)介：分類號(hào)S8167學(xué)校代碼10129UDC636學(xué)號(hào)08201029陰外動(dòng)脈灌注葡萄糖對(duì)奶山羊乳腺攝取乳成分前體物的影響EFFECTOFPERFUSINGGLUCOSEINTOEXTERNALPUDICARTERYONUPTAKEOFMILKCOMPONENTPRECURSSOFMAMMARYGLINMILKGOAT申請(qǐng)人馮子琪學(xué)科門類農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)研究方向動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與畜產(chǎn)品品質(zhì)指導(dǎo)老師敖長(zhǎng)金教授論文提交日期二〇一一年五月EFFECTOFPERFUSINGGLUCOSEINTOEXTERNALPUDICARTERYONUPTAKEOFMILKCOMPONENTPRECURSSOFMAMMARYGLINMILKGOATABSTRACTTHEPAPERSTUDIEDTHEEFFECTSOFPERFUSINGTHEDIFFERENTGRADIENTGLUCOSEINTOEXTERNALPUDICARTERYONMAMMARYGLINTAKERELATEDHMONERECEPTMRNAEXPRESSIONOFMAMMARYGLTISSUEINDAIRYGOATSIX23YEARSOLDDAIRYGOATSWERECHOSEWHICHHAVESIMILARBODYWEIGHT4565215KGMILKYIELD02501KGWITHTHEVESSELINTUBATIONOFEXTERNALPUDICARTERYMILKVEINSIXDAIRYGOATISSIXREPEATSEVERYDAIRYGOATWASPERFUSEDDIFFERENTCONCENTRATIONSGLUCOSENOPERFUSEDISCONTROLGROUPUSEDARTERIOVENOUSCONCENTRATIONDIFFERENCETECHNIQUETORESEARCHTHEEFFECTOFPERFUSEDGLUCOSE20GD40GD60GDONMAMMARYGLINTAKEDMILKCOMPONENTSPRECURSSUSEDRTPCRTECHNIQUETORESEARCHTHEEFFECTOFDIFFERENTCONCENTRATIONSGLUCOSEONRELATEDHMONERECEPTMRNAEXPRESSIONOFMAMMARYGLTISSUE1THEEXPERIMENTUSEDPAHTOMEASURETHEBLOODFLOWOFSIXDAIRYGOATTHERESULTSSHOWEDTHATTHEAVERAGEMAMMARYGLBLOODFLOWIS12476LDTHEAVERAGEMAMMARYGLPLASMAFLUXIS8317LDCALCULATEDTHERATIOOFMAMMARYGLBLOODFLOWMILKYIELD12476025THERESULTSFIT5001INPRINCIPLE2THEGROUPPERFUSEDGLUCOSEINCREASEDMILKYIELDOFDAIRYGOATSP005THEUPTAKEOFSERF60GDTREATMENTGROUPWASSIGNIFICANTLYDECREASEDCOMPAREDWITHCONTROLGROUPP005THEUPTAKEOFΒHBWASSTEPUPBUTNOTSIGNIFICANTLYP0053AFTERPERFUSEDGLUCOSETHEBLOODPLASMAGHOFTREATMENTGROUPSWASHIGHERTHANCONTROLGROUPP005THEBLOODPLASMAPRLOF40GD