簡介：■’’一●分類號(hào)．．S墨23窆密級(jí)玉洳≥J、唼博士學(xué)位論文⑧單位代碼Q3三耋學(xué)號(hào)Q魚ZQ2Q中文論文題目奶牛乳腺上皮細(xì)胞葡萄糖攝取的調(diào)控及其對(duì)乳成分合成的影響研究英文論文題目．STUDIESONTHEREGULATIONOFGLUCOSETRANSPORTAND．叢II蘭銎IQ墜I衛(wèi)墜QYIN￡啦盆啦幽壘￡Y￡P(guān)IH金I曼￡￡L墨指導(dǎo)教師劉建新教授專業(yè)名稱動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究方向分子和細(xì)胞生物學(xué)所在學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院I■，▲■●■■■，奶牛乳腺上皮細(xì)胞葡萄糖攝取的調(diào)控及其對(duì)乳成分合成的影響研究論文作者簽名起至要指導(dǎo)教師簽名論文評(píng)閱人五位博導(dǎo)隱名評(píng)審答辯委員會(huì)主席朱偉云教授南京農(nóng)業(yè)大學(xué)委員1劉建新教授浙江大學(xué)委員2委員3委員4委員5委員6．O委員7答辯日期2011年6月8日

簡介：分類號(hào)S8521學(xué)校代碼10129UDC577學(xué)號(hào)2009301021荷斯坦奶牛乳腺上皮細(xì)胞Β防御素MRNA的表達(dá)及可能信號(hào)通路的初步研究PREMILINARYRESEARCHOFEXPRESSIONOFΒDEFENSINSMRNAINVOLVEDSIGNALINGPATHWAYINMAMMARYEPITHELIALCELLSFROMHOLSTEINCOWS申請(qǐng)人程蘭玲學(xué)科門類農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)研究方向動(dòng)物組織胚胎與發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師曹貴方教授論文提交日期二〇一二年十月摘要防御素是一種富含精氨酸的陽離子低分子短肽，對(duì)G、G菌，真菌、包膜病毒和螺旋體等都有廣譜的殺傷作用。它不僅是新型高效的抗菌多肽，能直接殺菌，抵御入侵機(jī)體的病原微生物，而且能調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答、調(diào)節(jié)組織創(chuàng)傷修復(fù)、在介導(dǎo)獲得性免疫反應(yīng)過程中起著重要作用。防御素是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)防御系統(tǒng)中重要的成員，提示防御素可能在奶牛乳腺中抵抗微生物感染、維持乳腺健康方面起著至關(guān)重要的作用。在奶牛發(fā)生乳腺炎時(shí)，防御素應(yīng)參與了乳腺的防御過程，但防御素產(chǎn)生了怎樣的變化，在變化的過程中又是如何調(diào)控的仍不清楚。目前防御素在抗乳腺炎和其防御機(jī)制方面的研究報(bào)道非常少，而關(guān)于Β防御素抗乳腺炎的作用過程更是少之又少，也未見其在奶牛乳腺中的表達(dá)調(diào)控機(jī)制方面的研究。為此我們初步研究了Β防御素基因在奶牛乳腺的表達(dá)情況和LPS誘導(dǎo)時(shí)Β防御素基因的表達(dá)變化及其可能調(diào)控的信號(hào)通路。其結(jié)果如下1、克隆了奶牛乳腺組織EBD、TAP、LAP、BNBD4、BNBD5和BNBD7基因。以奶牛乳腺組織為材料，提取乳腺組織總RNA，根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫中牛Β防御素CDNA的保守序列分別設(shè)計(jì)特異性引物，采用RTPCR技術(shù)擴(kuò)增基因片段，純化后連接PMD19T載體，轉(zhuǎn)化入大腸桿菌后挑取陽性重組質(zhì)粒測序，測序結(jié)果證實(shí)EBD、TAP、LAP、BNBD4、BNBD5和BNBD7在奶牛乳腺組織有表達(dá)。2、建立穩(wěn)定的奶牛乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系，并確定乳腺上皮細(xì)胞6種Β防御素基因的表達(dá)情況。采用膠原酶消化法和胰蛋白酶選擇性消化法對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行分離、培養(yǎng)和純化。對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)以及傳1代細(xì)胞的傳代培養(yǎng)。經(jīng)形態(tài)學(xué)、核型分析和運(yùn)用RTPCR方法檢測Α酪蛋白基因的表達(dá)，繪制生長曲線等方法對(duì)所培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定和分析，結(jié)果證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞為上皮細(xì)胞，細(xì)胞生長狀態(tài)良好，符合細(xì)胞生長規(guī)律。在成功培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞的基礎(chǔ)上，提取乳腺上皮細(xì)胞總RNA，運(yùn)用RTPCR方法擴(kuò)增6種Β防御素（EBD、BNBD4、BNBD5、BNBD7、LAP、TAP），測序結(jié)果證明6種Β防御素基因在奶牛乳腺上皮細(xì)胞有表達(dá)。3、獲得奶牛乳腺組織與乳腺上皮細(xì)胞6種Β防御素MRNA的基礎(chǔ)表達(dá)水平。通過RTQPCR方法對(duì)6種Β防御素進(jìn)行擴(kuò)增及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果表明，乳腺組織中6種Β防御素基因的相對(duì)表達(dá)量有顯著性差異（P001），僅BNBD4與BNBD5之間的相對(duì)表達(dá)量沒有顯著性差異，其中LAP相對(duì)表達(dá)量最多，BNBD7、EBD、BNBD5、BNBD4次之，TAP的相對(duì)表達(dá)量最低。奶牛乳腺上皮細(xì)胞中6種Β防御素基因MRNA水平的相對(duì)表達(dá)量有顯著性差異（P001），僅EBD與BNBD4之間的相對(duì)表達(dá)量沒有顯著性差異，其中LAP相對(duì)表達(dá)量最多，BNBD7、BNBD5、BNBD4、EBD次之，TAP的相對(duì)

簡介：I刪I刪刪舢刪舢刪舢刪刪Y2361893ANALYSISOFMIRNASPROFILINGANDTHERELATEDMIRNASOFSPLICEVARIANTSOF曰刪D≤M2GENEINMLAMM瞼RYGLANDOFDAIRYC』U門’LEBYHOUQINLEISUPERVISORAPHANGSUQINANDHUANGJINMINGATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORMASTERDEGREEOFAGRONOMYANIMALGENETICSBREEDINGANDREPRODUCTIONCOMPLETEDINDECEMBER2011COMMENCEMENTINDECEMBER2011目錄目錄摘要IABSTRACTIII英文縮寫V文獻(xiàn)綜述11奶牛乳腺炎發(fā)病原因、危害與免疫111奶牛乳腺炎的發(fā)病原因112奶牛乳腺炎與免疫113奶牛乳腺炎的危害L2MIRNA與免疫反應(yīng)L21MIRNA16對(duì)炎癥的基本調(diào)控222MIRNA146A對(duì)先天性免疫反應(yīng)的負(fù)調(diào)控223MIRNA181A對(duì)B細(xì)胞分化與CD4T細(xì)胞激活的調(diào)控324MIRNA223對(duì)中性粒細(xì)胞增殖與激活的調(diào)控33可變剪接體與免疫反應(yīng)331可變剪接體的基本模式432可變剪接的調(diào)節(jié)機(jī)制433可變剪接體對(duì)免疫功能的影響54BOLADQA2基因與免疫65基因研究中應(yīng)用技術(shù)概述66本研究目的和意義9參考文獻(xiàn)10試驗(yàn)1奶牛乳腺組織MIRNAS表達(dá)譜分析131材料與方法1411乳腺組織樣品的獲取及總RNA的提取1412SOLEXA測序1413生物信息學(xué)分析。152結(jié)果與討論1621總RNA的質(zhì)量鑒定1622小RNA的分類注釋1623MIRNAS的鑒定與表達(dá)譜分析1724與免疫有關(guān)MIRNAS的表達(dá)分析18

簡介：分類號(hào)S8158學(xué)校代碼10129UDC636學(xué)號(hào)2009201021不同培養(yǎng)代數(shù)及葡萄糖、氨基酸對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白基因表達(dá)的影響EFFECTOFDIFFERENTGENERATIONSGLUCOSEAMINOACIDONCASEINGENEEXPRESSIONOFTHEBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLS申請(qǐng)人韓亞南學(xué)科門類農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究方向反芻動(dòng)物營養(yǎng)指導(dǎo)教師侯先志教授論文提交日期二〇一二年十一月EFFECTOFDIFFERENTGENERATIONSAMINOACIDGLUCOSEONCASEINGENEEXPRESSIONOFTHEBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSABSTRACTINTHEEXPERIMENTLACTATINGHOLSTEINCOW’SMAMMARYEPITHELIALCELLSISOLATEDFROMTHETISSUEWERETAKENASRESEARCHSUBJECTTESTINGEFFECTOFDIFFERENTGENERATIONSOFBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSONCASEINGENEEXPRESSIONONTHEBASISOFITPRIMARYP0SECONDGENERATIONP2WEREUSEDTOEFFECTOFGLUCOSEGLCLYSINEMETHIONINEINFLUENCINGONCASEINGENEEXPRESSIONOFMAMMARYEPITHELIALCELLSRESPECTIVELYINDERTODETERMINETHEAPPROPRIATEGENERATIONPROVIDEATHEETICALBASISFRELATEDRESEARCH1USINGREALTIMEPCRDETECTIONTECHNOLOGYTODETECTCASEINGENEEXPRESSIONOFPRIMARYGENERATIONP0DERIVEDFROMTHEBOVINEMAMMARYTISSUETHEFIRSTP1TOFIFTHGENERATIONP5THERESULTSSHOWEDTHATEXPRESSIONOFTHREETARGETGENES（ΑS1CASEINΒCASEIN，ΚCASEIN）WASATDIFFERENTLEVELSBETWEENTHECELLSOFPRIMARYGENERATIONPASSAGESTHEEXPRESSIONINTHEPRIMARYCELLSWASSIGNIFICANTLYHIGHERTHANP1P5CELLSP005MEOVERFROMP0TOP5THEEXPRESSIONOFΑS1CASEINΒCASEINΚCASEINISGRADUALLYDECREASINGSOP2P3BMECSCOULDBEUSEDASATRIALMATERIAL2REGARDINGPRIMARYP0THESECONDGENERATIONP2COW’SMAMMARYEPITHELIALCELLSASACULTURINGMODELINVITRODETECTINGEFFECTOFGLUCOSELYSINEMETHIONINEADDEDADDITIONALINMEDIUMONCASEINGENEEXPRESSIONOFBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSMEDIUMNONTREATEDWERESEENASCONTROLGROUPADDEDADDITIONALGLUCOSETREATMENTASGROUPⅠLYSINEMETHIONINEASTREATMENTGROUPⅡTHETREATMENTGROUPIIIEMBRACESLYSINEMETHIONIEGLUCOSETHEEXPERIMENTALPERIODOF24HWITH3REPLICATESEACHOFTHEMTESTINGCASEINGENESΑS1CASEINΒCASEINΚ–CASEINEXPRESSIONAFTEREXPERIMENTALTREATMENTEXPERIMENTALRESULTSSHOWEDCASEINGENEEXPRESSIONOFTHEPRIMARYSECONDGENERATIONCELLSIN3TREATEDGROUPSOFBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSOFAREHIGHERTHANTHATOFCONTROLGROUPΑS1CASEINΒCASEINGENEEXPRESSIONOFTHETREATMENTGROUPⅠWASLOWERTHANTHETREATMENTGROUPⅢINTHEPRIMARYBUTTHEDIFFERENCEWASNOTSIGNIFICANTP005GROUPⅢⅠWASSIGNIFICANTLYHIGHERP005ASFTHESECONDGENERATIONCELLSΒCASEININTREATMENTGROUP

簡介：STUDIESONEXPRESSIONANDCONSTRUCTIONOFMAMMARYGLANDEXPRESSIONVECTORFORHIMANLACTOFERRD叮GENET垣EDL蜘’EDBYTHESLEEPINGBEAUTYTRANSPOSONSYSTEMBYSONGYANGSUPERVISEDBYPROFWANGFENGADISSERTATIONSUBMITTEDTONANJINGAGRICUTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORMASTERDEGREEOFAGRONOMYCOMPLETEDINMAY2012COMMENCEMENTINJUNE2012本研究由國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)“高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)轉(zhuǎn)基因奶羊新品種培育“項(xiàng)目編號(hào)2008ZX08008004資助SUPPORTEDBYNATIONALMAJORSPECIALPROJECTONNEWVARIETIESCULTIVATIONFORTRANSGENICORGANISMSNO2008ZX08008004

簡介：CONSTRUCTIONOFGOAT611日僵AA仰僵ARYGLANDSPECIFICGENETARGETINGVECTORANDMODIFIEDFETALFIBROBLASTCELLLINEBYTIANQISUPERVISORSPRO￡YANGQIANATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICUITURALUNIVERSI坶INPARTIALFULFILIMENTOFTHEREQUIREMENTSFORMASTERDEGREEOFAGRONOMYC0MPLETEDINDECEMBER2011COMMENCEMENTINDECEMBER2011目錄目錄IJI言I摘量要III第一部分文獻(xiàn)綜述L第一章甜在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究中的應(yīng)用L1山羊馴的研究進(jìn)展。111甜的分布與其在山羊乳腺血漿中的含量變化1126J可的生物學(xué)功能分析一22甜轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究進(jìn)展421馴與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物522轉(zhuǎn)甜基因山羊的生物安全性分析523小結(jié)6參考文獻(xiàn)8第二章乳腺基因打靶載體的研究進(jìn)展111基因打靶載體的基礎(chǔ)理論1L1。1基因打靶技術(shù)的原理和方法。LL12影響基因打靶效率的因素1213基因打靶技術(shù)的安全性研究進(jìn)展142乳腺基因打靶技術(shù)1521乳蛋白基因位點(diǎn)1522啟動(dòng)子和增強(qiáng)子1723非翻譯區(qū)一183乳腺體細(xì)胞基因打靶核移植技術(shù)在家畜轉(zhuǎn)基因研究中的應(yīng)用1831胚胎干細(xì)胞基因打靶技術(shù)1832體細(xì)胞基因打靶核移植技術(shù)1933乳腺體細(xì)胞基因打靶核移植技術(shù)的應(yīng)用前景與存在的問題19參考文獻(xiàn)21第二篇試驗(yàn)研究一25第三章山羊B一酪蛋白基因5’和3’調(diào)控元件克隆及功能驗(yàn)證251材料和方法2611材料和儀器2612試驗(yàn)方法272結(jié)果與分析3321山羊基因組DNA的提取3323B一酪蛋白3’端調(diào)控元件的克隆。3624GFP基因CDNA的克隆3725基因打靶載體PGFP的構(gòu)建和酶切驗(yàn)證3826PGFP質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染BCAP一37細(xì)胞檢測GFP的表達(dá)393討侖41

簡介：IIR1LLLLIJIIRLLLLLLHIIRLLLLLLY3224367分類號(hào)8572UDC旦LL密級(jí)公開學(xué)校代碼10712研宄生學(xué)號(hào)2014050643⑧西北農(nóng)林稈捉大學(xué)2017屆攻讀碩士學(xué)位研究生學(xué)位畢業(yè)論文奶牛乳腺炎中成纖維細(xì)胞分泌的SDF一1對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的作用及機(jī)制研究學(xué)科專業(yè)基焦簦醫(yī)堂研究方向麴絲瘞瘟筮生的盆王扭趔研究生塑掛良指導(dǎo)教師壹?jí)欎值桔铀芡瓿蓵r(shí)間2QZ堡旦本研究由IULLLLIILLLLLLIIIULY3224367國家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目項(xiàng)目編號(hào)31402165西北農(nóng)林科技大學(xué)中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)項(xiàng)目編號(hào)2014YB016提供資助THISWORKWASPPORTEDBYGRANTSFROMSSUPPORTEDLAYGRANTSIROMTHENATURALSCIENCEFOUNDATIONOFCHINANO31402165ANDTHEFUNDAMENTALRESEARCHFUNDSFORTHECENTRALUNIVERSITIESOFNORTHWESTAFUNIVERSITYNO2014YB016

簡介：SECRECYNOCHINESEACADEMYOFAGRICULTURALSCIENCESMASTERDISSERTATIONTHERATIOBETWEENLYSINEANDMETHIONINEONCASEINSYNTHESISINBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSMSCANDIDATEXIYANLIADVISORASSOCIATEPROFHONGYANGWEICOADVISORPROFWANGJIAQIMAJORANIMALNUTRITIONANDFEEDSCIENCESPECIALTYRUMINANTNUTRITIONCHINESEACADEMYOFAGRICULTURALSCIENCESJUNE201L獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名夸毒粒時(shí)間汐，J年6月牛日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議論文作者簽名彎車把導(dǎo)師簽名瓏勿伊?xí)r間知11年占月砷日時(shí)間弦，，年多月；眵日

簡介：分類號(hào)S8231學(xué)校代碼10129UDC636學(xué)號(hào)2009201018采用自制培養(yǎng)基培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞可行性研究FEASIBILITYSTUDYONTHEHOMEMADEMEDIUMWASUSEDTOCULTUREBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLS申請(qǐng)人曹琪娜學(xué)科門類農(nóng)學(xué)學(xué)科專業(yè)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究方向動(dòng)物營養(yǎng)與畜產(chǎn)品品質(zhì)指導(dǎo)教師敖長金教授論文提交日期二〇一二年五月摘要該研究在建立了奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)方法的基礎(chǔ)上，研究了自制培養(yǎng)基對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞生物學(xué)功能的影響，分別從細(xì)胞生長曲線、細(xì)胞增殖能力、酪蛋白基因表達(dá)及酪蛋白合成方面進(jìn)行了初步探討。該研究的目的旨在驗(yàn)證自制培養(yǎng)基是否會(huì)對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞的生物學(xué)功能造成負(fù)面的影響，為下一步試驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。主要研究內(nèi)容與結(jié)果如下（1）采用酶消化和乳汁分離法分別對(duì)乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，根據(jù)成纖維細(xì)胞和乳腺上皮細(xì)胞對(duì)胰蛋白酶的敏感性不同對(duì)原代培養(yǎng)的乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行純化，并進(jìn)行傳代、凍存與復(fù)蘇，對(duì)得到的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)、生長特性、免疫組織化學(xué)鑒定。結(jié)果顯示分離得到的細(xì)胞培養(yǎng)后呈鵝卵石鋪路石樣，細(xì)胞之間連接緊密且界限清晰，單層生長；細(xì)胞生長曲線呈S形，具有明顯的潛伏期、指數(shù)生長期、平臺(tái)期，細(xì)胞于第3D進(jìn)入指數(shù)生長期于第7D進(jìn)入平臺(tái)期，符合一般的細(xì)胞生長規(guī)律；CK18（細(xì)胞角蛋白18）的免疫組化鑒定結(jié)果呈現(xiàn)出強(qiáng)陽性，說明分離得到的細(xì)胞屬典型的上皮細(xì)胞。（2）研究了自制培養(yǎng)基對(duì)乳腺上皮細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。試驗(yàn)采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)照組為DMEMF12培養(yǎng)基，試驗(yàn)組為自制培養(yǎng)基。每個(gè)處理均設(shè)三個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)三個(gè)平行。試驗(yàn)結(jié)果如下使用自制培養(yǎng)基的乳腺上皮細(xì)胞指數(shù)生長期的細(xì)胞活力要明顯弱于DMEMF12培養(yǎng)基，但是在延遲期（接種48H）內(nèi)細(xì)胞的增值活力并不弱于DMEMF12培養(yǎng)基；自制培養(yǎng)基在接種后48H內(nèi)對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的增殖活力要顯著高于（P005）；與DMEMF12培養(yǎng)基相比，自制培養(yǎng)基對(duì)乳腺上皮細(xì)胞ＡS及Β酪蛋白的合成的影響差異并不顯著（P0188P0548）。關(guān)鍵詞奶牛乳腺上皮細(xì)胞；自制培養(yǎng)基；基因表達(dá)；酪蛋白

簡介：SINGLENUCLEOTIDEPOLYMORPHISMOFLISP701ANDHSP32GENEANDTHEIRCORRELATIONSWITHPRODUCTIONTRAITSANDMASTIFFSRESISTANCEINCHINESEHOLSTEINDAIRYCOWSBY，JIANGXIAOQIANGSUPERVISORPROFWANGGENLINATHESISSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORMASTERDEGREEOFAGRONOMYTHECOLLEGEOFANIMALSCIENCEANDTECHNOLOGYNANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYNANJING，210095，PRCHINACOMPLETEDINNOVEMBER，2012COMMENCEMENTINDECEMBER，2012原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者需親筆簽名荔。J、；功，2年1月占日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密口。請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”學(xué)位論文作者需親筆簽名錛，J＼圾J口，2年月舌日學(xué)位論文作者需親筆簽名琵7J＼；致J口，2年月臺(tái)日導(dǎo)師需親筆簽名L誦杏立17，乙年月I占日

簡介：奶山羊泌乳性狀的遺傳力較低，采用常規(guī)育種手段雖使其獲得了一定的遺傳進(jìn)展，但進(jìn)展較為緩慢，故尋找主效遺傳標(biāo)記對(duì)提高嶗山奶山羊的泌乳性能是十分必要的。本研究分析ACACA基因啟動(dòng)子PⅢ和SCD基因外顯子3及側(cè)翼序列的多態(tài)性及其對(duì)泌乳性狀的影響，探討與嶗山奶山羊泌乳性狀相關(guān)聯(lián)的分子遺傳標(biāo)記，為嶗山奶山羊的品種選育提供分子依據(jù)。本研究以174只嶗山奶山羊泌乳母羊作為研究對(duì)象，利用PCRDHPLC技術(shù)和直接測序法相結(jié)合檢測ACACA基因啟動(dòng)子PⅢ序列多態(tài)性；用PCR產(chǎn)物直接測序法檢測SCD基因外顯子3及側(cè)翼序列多態(tài)性；用POPGEN32軟件分析多態(tài)性位點(diǎn)的遺傳多態(tài)性；用SAS92軟件分析體尺、體重指標(biāo)與泌乳性狀間的相關(guān)性以及基因多態(tài)性與泌乳性狀間的關(guān)聯(lián)效應(yīng)。結(jié)果表明⑴在ACACA基因啟動(dòng)子PⅢ部分序列中檢測到3個(gè)SNPS，即第1206位的BD，1255位的AC和1322位的MN，其等位基因和基因型頻率在種羊場F和農(nóng)戶P兩個(gè)群體中分布不均衡，但均處于HARDYWEINBERG平衡狀態(tài)P005。在SCD基因外顯子3及側(cè)翼區(qū)檢測到4個(gè)SNPS，即E315EE、E368HH，內(nèi)含子3的I346RR和I355QQ，其等位基因和基因型頻率在樣本群中均處于HARDYWEINBERG平衡狀態(tài)P005。其中E315EE和I355QQ的分布情況一致，呈緊密連鎖關(guān)系。⑵體重、體高和體長與各乳成分呈顯著或極顯著負(fù)相關(guān)，體長與產(chǎn)奶量呈顯著正相關(guān)，體重和胸圍與產(chǎn)奶量呈極顯著正相關(guān)。⑶在整個(gè)樣本群體中，大部分泌乳性狀均存在顯著的場別效應(yīng)P005，在F群體的1206位點(diǎn)上，等位基因B為乳蛋白率、乳糖率、非脂肪物性狀的有利等位基因，BB基因型與BD基因型的乳蛋白率和乳糖率性狀差異極顯著P005。在F群體的1322位點(diǎn)上，等位基因N為乳糖率的有利等位基因，為300D產(chǎn)奶量的不利等位基因，MN基因型與MM基因型的300D產(chǎn)奶量和乳糖率性狀差異顯著P⑷SCD基因E315和I355位點(diǎn)的EEQQ基因型與基因型EEQQ的所有乳成分性狀差異顯著P005。E368位點(diǎn)HH基因型與HH和HH基因型的所有乳成分性狀差異顯著P005。在不同試驗(yàn)群體中分析SCD基因多態(tài)性與泌乳性狀的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)F群體中，各突變位點(diǎn)的不同基因型在泌乳性狀上的差異顯著性較低；而P群體中不同基因型間所有乳成分性狀的差異顯著較高。可見SCD基因在嶗山奶山羊樣本群中對(duì)泌乳性狀的效應(yīng)主要來源于對(duì)P育種群的影響。

簡介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文奶牛乳腺上皮細(xì)胞系的建立及生理功能鑒定姓名李艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)指導(dǎo)教師趙國琦20110617ESTABLISHMENTANDPHYSIOLOGICALFUNCTIONIDENTIFICATIONOFBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSPOSTGRADUATELIYAHADVISORPROFZHAOGUOQICOLLEGEOFANIMALSCIENCEANDTECHNOLOGYYANGZHOUUNIVERSITY225009ABSTRACTINTHISSTUDYWEUSEDEXPLANTCULTUREMETHODTOSEPARATEBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSBMEG，ANDADOPTEDMANYMETHODSTOPURIFIEDCELLSTHESECELLSWEREIDENTIFIEDFORTHEIRMORPHOLOGYANDPHYSIOLOGICALFUNCTIONREALTIMEPCRTECHNIQUEWASEMPLOYEDTOEXAMINETHEMRNAEXPRESSIONFORIL6，IL8ANDTNF噸BYSTIMULATIONOF16THPASSAGECELLWITHLPS，MEANTIMEWEINVESTIGATEDTHEEFFECTSONMILKPROTEINSYNTHESISANDSECRETEOF16THPASSAGEWIMLACTOGENICHORMONEANDLYSINEBYTHISWAY，WETHOUGHT吐LATOURLABHADSUCCESSFULLYESTABLISHEDBMECLINEWIMTHENORMALFUNCTIONS，THESEWORKSHADPROVIDEDMOREADVANTAGESFORFURTHERESTABLISHINGIMMORTALIZEDCELLLINESEXPERIMENTLALARGENUMBEROFPRIMARYBMECCOULDBEGAINEDFROMTISSUECULTURE，THENPURIFIEDCELLSWEREOBTAINEDBYTWICEDIGESTIONANDADHERENCESCRAPINGANDSINGLECELLCLONETHEPROLIFERATIONCAPACITYOFEPITHELIALCELLSDECLINEDAFTER25PASSAGESTHEMORPHOLOGYANDMILKPROTEINGENESEXPRESSINGOFBMECINVITROWEREDETECTEDBYFLUORESCENCEIMMUNOCYTOCHEMICALMETHOD，KARYOTYPEANALYSISANDBETACASEINEXPRESSIONNLERESULTSSHOWEDTHATTHESECELLSHADATYPICALCHARACTERISTICOFTHEEPITHELIALCELLSANDEXPRESSIONCYTOKERATIONL8OFMARKERPROTEIN，ANDTHESECELLSCOULDEXPRESSLOWBETACASEINGENEEXPERIMENT2WESELECTEDSUITABLECONCENTRATIONOFLPSWHICHSTIMULATEDBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLUSINGREALTIMEPCRTECHNIQUEWEGOTTHERESULTOFMRNAEXPRESSIONFORIL6，IL一8，N、『FATHERESULTSHOWEDTHATBMECSTIMULATEDBYLPSFOR24HINCREASEDTHEMRNALEVELSOFTHEGENESOFLL一6ANDIL一8，TNF0【EXPRESSEDATTHETOPOFLPSFOR4H111ECELLLINEHADTHEVALUABLEAPPLICATION，THECELLLINECOULDUSEASAMODELTOSTUDYMASTITISMECHANISM，ANDTHEYHADANIMPORTANTROLEINTHECELLINNATEIMMUNITYEXPERIMENT3RELATIVEQUANTITATIVEREALTIMEPCRWASEMPLOYEDTOEXAMINETHEMRNAEXPRESSIONFORBETACASEIAALPHA1ACTALBUMINANDIACTOFERRINWIMTHESTIMULATIONOFDIFFERENTCOMBINATIONOFHORMONETHERESULTSHOWEDTHATTHEMRNALEVELSOFTHEGENESOFTHESEPROTEINSA11WEREMORESIGNIFICANTLYHIGHERTHANTHOSEINCONTROLGROUPWHENPROTACTIN，HYDROCORTISONEANDINSULINWEREINTHEPRESENCETHESALLLECOMBINATIONABOVEMENTIONEDADDITIONOFLYSINE，THEMRNALEVELSOFTHEGENESHADINCREASEDTRENDBUTRIOTCHANGEDSIGNIFICANTLYINORDERTOCONFIRMTHERESULTSOFRELATIVEQUANTITATIVEREALTIMEPCRWEUSEDTHEMETHODOFELISATOANALYSETHEPROTEINEXPRESSIONLEVELOFBETACASEINANDLACTOFERRINTHERESULTSSHOWEDTHATTHESEPROTEINLEVELEXPRESSIONPATTERNSWEREACCORDED謝MMRNALEVELSITSUGGESTEDTHATBOVINEMAMMARYEPITHELIALCEILSDIDNOTTRANSFORMANDHADTHENORMALPHYSIOLOGICALFUNCTIONKEYWORDMAMMARYEPITHELIALCELLS，BOVINE，MILKPROTEIN，EYTOKINE，LIPOPOLYSAECHARIDE，HORMONE，LYSINE

簡介：1H●1●●●●1EXORESSIONINDNLERENTTISSUESANDEXPRESSIONOFLEPTINGENEINDIFFERENTTISSUESOFGOATANDITSMETHYLATIONANALYSISOFMAMMARYGLANDINDIFFERENTPERIODTHESISSUBMITTEDT01LAESISSUQINGDAOAGRICULTURALUNIVERSITYINFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEDEGREEOFMASTEROFAGRONOMY1●一●GAOWDCOLLEGEOFANIMALSCIENCEANDVETERINARYMEDICINESUPERVISORPROFMINLINGJIANGQINGDAO，CHINAJUNE，2012青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要瘦素LEPTIN基因在山羊不同組織中的表達(dá)及在乳腺發(fā)育不同時(shí)期的甲基化分析摘要為了研究LEPTIN基因的表達(dá)對(duì)山羊乳腺發(fā)育的影響，V級(jí)TLEPTIN基因的甲基化與基因表達(dá)的關(guān)系，本實(shí)驗(yàn)采用定量PCR方法對(duì)不同時(shí)期文登奶山羊、嶗山奶山羊、波爾山羊乳腺組織QLEPTIN基因的表達(dá)進(jìn)行檢測，并利用亞硫酸鹽測序法，分析了相應(yīng)時(shí)期LEPTIN基N的甲基化水平，目的是要發(fā)現(xiàn)青春期中期、妊娠中期、泌乳期和退化期，文登奶山羊、嶗山奶山羊和波爾山羊乳腺組織畔LEPTIN基因的表達(dá)以及甲基化的變化規(guī)律，揭示LEPTIN基因在三個(gè)不同品種山羊不同發(fā)育時(shí)期乳腺組織中的甲基化與基因表達(dá)的關(guān)系。因?yàn)槭菟卦趧?dòng)物體的幾乎各個(gè)器官都表達(dá)，分析測定三印砌的分布和含量等信息對(duì)了解LEPTIN的作用至關(guān)重要，可以為深入研究三印砌的生物學(xué)作用及其機(jī)制提供參考。根據(jù)山羊乳腺發(fā)育特點(diǎn)，我們分別以青春期中期、妊娠期中期、泌乳中期和退化期四個(gè)時(shí)期為采樣時(shí)間點(diǎn)。分別以4個(gè)時(shí)期文登奶山羊、嶗山奶山羊、波爾山羊乳腺組織的EDNA為模板，以∥ACTIN為內(nèi)參基因，每一組織設(shè)3個(gè)重復(fù)，進(jìn)行定量PCR擴(kuò)增，檢測LEPTIN基因的表達(dá)情況。LEPTIN基因的定量結(jié)果顯示，三個(gè)品種的山羊在青春期中期和退化期LEPTIN的表達(dá)量比較高，妊娠中期和泌乳期表達(dá)量差不多都明顯低于青春期中期和退化期，并且相同品種山羊在乳腺發(fā)育的青春期和退化期與妊娠期和泌乳期比較差異情況均顯著P嶗山奶山羊波爾山羊且除了在泌乳期文登奶山羊與嶗山奶山羊差異不顯著P00675005以外別的時(shí)期差異均顯著P005。為了分析檢測LEPTIN基因的甲基化情況，分別取文登奶山羊、嶗山奶山羊和波爾山羊4個(gè)時(shí)期的乳腺組織為試驗(yàn)點(diǎn)，采用亞硫酸鹽對(duì)樣本DNA進(jìn)行處理，測序分析LEPTIN基因的甲基化水平。文登奶山羊在青春期中期、妊娠中期、泌乳中期、退化期甲基化的CPG位點(diǎn)的數(shù)目分別為55、58、58、60；甲基化比率分別7857％，8286％，8286％，8571％；嶗山奶山羊在各個(gè)時(shí)期甲基化的CPG位點(diǎn)數(shù)目分別為59、61、58、60；甲基化比率分別為8429％，8714％，8286％，8571％。波爾山羊在各個(gè)時(shí)期的甲基化CPG位點(diǎn)數(shù)目分別為61、60、61、59，甲基化比率為8714％，8571％，8714％，8429％。統(tǒng)計(jì)后發(fā)現(xiàn)，三種山羊在乳腺發(fā)育的不同四個(gè)時(shí)期5’UTRCG位點(diǎn)差不多均被甲基化，而且比率在78％88％之間。三種山羊無論是在同一時(shí)期不同品種之間還是同一品種不同發(fā)育時(shí)期均

簡介：精氨酸對(duì)乳腺上皮細(xì)胞中酪蛋白合成的影響及其調(diào)控機(jī)制研究生徐柏林導(dǎo)師王洪榮教授揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，225009摘要該研究以體外培養(yǎng)的中國荷斯坦奶牛乳腺上皮細(xì)胞CCMEC為試驗(yàn)?zāi)Ｐ?，研究培養(yǎng)基中不同水平精氨酸ARG對(duì)乳腺上皮細(xì)胞中酪蛋白合成的影響，在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究ARG影響酪蛋白合成的機(jī)制，分別從細(xì)胞增殖水平，乳酪蛋白基因、酪蛋白合成信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因MRNA轉(zhuǎn)錄水平等方面來進(jìn)行初步探討。旨在得出ARG影響乳酪蛋白合成的一般規(guī)律，篩選出酪蛋白最大合成量時(shí)ARG的濃度；揭示ARG影響酪蛋白合成的細(xì)胞分子機(jī)制，以為提高牛奶中乳蛋白含量、改善牛奶質(zhì)量提供理論依據(jù)。研究包括四個(gè)部分試驗(yàn)一奶牛乳腺上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)該試驗(yàn)以健康的中國荷斯坦奶牛的泌乳期乳腺組織為試驗(yàn)材料，采用膠原酶消化法在體外培養(yǎng)得到奶牛乳腺上皮細(xì)胞，根據(jù)成纖維細(xì)胞和乳腺上皮對(duì)胰蛋白酶的敏感性不同進(jìn)行奶牛乳腺上皮細(xì)胞的純化，對(duì)分離純化的細(xì)胞進(jìn)行傳代、凍存與復(fù)蘇。并對(duì)得到的細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)、生長特性、免疫組織化學(xué)、生物學(xué)功能的鑒定。利用臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)法繪制細(xì)胞生長曲線，采用免疫組化法對(duì)上皮細(xì)胞特異性蛋白CK一18的表達(dá)進(jìn)行鑒定，采用RTPCR技術(shù)對(duì)乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)編碼酪蛋白合成的基因CSNLSL、CSNLS2、CSN2、CSN3的表達(dá)進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示分離得到的細(xì)胞呈鵝路石樣，細(xì)胞之間連接緊密且界限清晰，單層生長；細(xì)胞生長曲線呈S形，具有明顯的潛伏期、指數(shù)生長期、平臺(tái)期，細(xì)胞于第三天進(jìn)入指數(shù)生長期于第七天進(jìn)入平臺(tái)期，符合一般的細(xì)胞生長規(guī)律；CK一18的免疫組化鑒定結(jié)果呈現(xiàn)出強(qiáng)陽性，說明分離得到的細(xì)胞屬典型的上皮細(xì)胞；RTPCR結(jié)果顯示，CSNLSL、CSNLS2、CSN2、CSN3基因在細(xì)胞內(nèi)均能有效的表達(dá)，說明分離得到的細(xì)胞具有乳腺上皮細(xì)胞的特異性生物功能。試驗(yàn)二精氫酸對(duì)乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)酪蛋白合成的影響該試驗(yàn)以體外培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細(xì)胞為試驗(yàn)?zāi)Ｐ停芯颗囵B(yǎng)基中不同水平的ARG對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)QS、13一酪蛋白合成的影響。試驗(yàn)采用單因素7水平完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以無ARG的培養(yǎng)基即ARG0倍組000MG／L為對(duì)照，ARG025倍組69500MG／L、05倍組13900MG／L、1倍組27800MG／L、2倍組55600MG／L、4倍組111200關(guān)鍵詞精氨酸；奶牛乳腺上皮細(xì)胞；酪蛋白合成；調(diào)控機(jī)制RESPONSESOFARGININETOMILKCASEINSYNTHESISANDITSMANIPULATINGMECHANISMINMAMMARYEPITHELIALCELLSFROMLACTATINGCOWPOSTGRADUATEXUBOLINADIVISORPROFWANGHONGRONGCOLLEGEOFANIMALSCIENCEANDTECHNOLOGYYANGZHOUUNIVERSITY225009ABSTRACTINTHISEXPERIMENT，THEMAMMARYEPITHELIALCELLOFHOLSTEINLACTATINGCOWCCMECWASUSEDFORTHEMODELTOASSAYTHEEFFECTSOFDIFFERENTARGCONCENTRATIONSONCASEINSYNTHESISANDITSMECHANISMINVITROTHESTUDYWASCONDUCTFROMTHELEVELOFCELLPROLIFERATION、MRNATRANSCRIPFIONOFCASEINGENEANDSIGNALTRANSDUCTIONRELATEDWITHCASEINSYNTHESISGENESTHEPURPOSEISTOOBTAINEDAGENERALREGULARITYOFWHICHARGCANAFFECTCASEINSYNTHESIS，SCREENINGTHEBESTARGCONCENTRATIONWHENCASEINSYNTHESISWASHIGHEST，REVEALTHECELLULARANDMOLECULARMECHANISMS，ANDPROVIDEATHEORETICALBASISFORIMPROVINGMILKPROTEINANDQUALITYTHESTUDYINCLUDEDTHREEPARTSEXP1CULTUREOFMAMMARYEPITHELIALCELLSINVITROTHEMAMMARYEPITHELIALCELLSWEREOBTAINEDWITHCOLLAGENASEDIGESTIONMETHODFROMHEALTHYHOLSTEINLACTATINGCOWANDPURIFIEDBYTRYPSINPUREEPITHELIALCELLSWEREPERFORMEDBYPASSAGESCULTURE、CELLCRYOPRESERVATIONANDRECOVERYTHEABTAINEDCELLSWEREIDENTIFICATEDBYMORPHOLOGYGROWTHCHARACTERISTICS，IMMUNOHISTOCHEMISTRYANDBIOLOGICALFUNCTIONSTHECELLGROWTHCURVEWASMADEBYTRYPANBLUECOUNTINGMETHODANDEXPRESSIONOFCK一18WASIDENTIFICATEDBYIMMUNOHISTOCHEMICALMETHODRTPCRTECHNIQUEWASUSEDFORDETECTINGGENEEXPRESSIONOFCSNLSL，CSNL2、CSN2、CSN3MOSTOFTHEISOLATEDANDRESUSCITATEDCELLSWEREEXHIBITEDACOBBLESTONELIKESHAPE，CONNECTEDTIGHTLYWITHACLEARBOUNDARYANDEXTENDEDMONOLAYERTHEGROWTHCURVECONFORMEDTOTHERULEOF“S’’SIGMOIDCURVEFORPROLIFERATINGCELLSWITHALAGPHASE，EXPONENTIALPHASE，ANDSTEADYPHASTHETIMEFORCELLWENT

簡介：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文紫杉醇對(duì)犬乳腺腫瘤CHMP和CHMM細(xì)胞周期調(diào)控因子影響的研究姓名陳萌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)獸醫(yī)學(xué)；臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師劉云20120530ABSTRACTSTUDIESONPACLITAXELONCANINEMAMMARYTUMORSCHMPANDCHMMCELLCYCLEREGULATORYFACTORSABSTRACTCANINEMAMMARYTUMORS1SANEOPLASTICDISEASESINCLINICALVETERINARYCANINEBREASTCANCERHASMANYLIKENESSESWITHHUMANBREASTCANCER，ASANEXCELLENTMODELFORHUMANBREASTCANCERTHERESEARCHSHOWEDTHATTHEREISALARGEPROPORTIONOFMALIGNANTTUMORSWHICHINVASIONTOOTHERORGANSINCLINICALDIAGNOSEDTUMOROCCURRENCE，DEVELOPMENTANDTRANSFERARERELATEDTOTHEABNORMALREGULATIONOFCELLCYCLENETWORKCLOSELYTHESTUDYINDEPTHOFITWILLOPENUPANEWIDEATOTUMORCONTROLANDTREATMENTITCANPROVIDEANEWROLEOFTARGETNOTONLYFORTUMORIMMUNOLOGYTHERAPYANDANTICANCERDRUGDEVELOPMENTBUTALSOFORTHEVARIOUSKEYPOINTSWHICHAREINTHECELLCYCLEREGULATORYNETWORKTOCONTROLCELLGROWTH，DIVISIONTOPREVENTTHEPROLIFERATIONOFCANCERCELLSTAXOLWASDEVELOPEDINTHELATE20THCENTURYITISANANTICANCERNATURALDRUG，ANDITHASBEENUSEDINTHECLINICALTREATMENTOFTUMORSWIDELYTHEMECHANISMOFPACLITAXEIINTHEPRIMARYANDMETASTATICTUMORSHASNOTYETBEENREPORTINTHISEXPERIMENT，ASPECIFICSERIESOFSTUDIESTOSOLVETHISPROBLEMHASBEENDONETHENATURALOCCURRINGCANINEMAMMARYTUMORSINPRIMARYANDMETASTASISCELLLINESVITROCHMPANDVITROCHMMARECOLLECTED，BYTHECONCENTRATIONOF0PMOL／L，01PMOL／L，1GMOL／L，109MOL／LPACLITAXELFOROH，12H，24H，48H，72HRESPECTIVELYUSINGTHELIGHTCYCLER20REALTIMEQUANTITATI、EPCRINSTRUMENTANDSYBRDYEMETHODMETHODTOTESTCYCLIND1MRNA、P27KIPMRNA、PCNAMRNA、BCL2MRNA、P53MRNAINVITROCHMPANDVITROCHMMUSEDTHELIGHTCYCLERSOFTWARE4ITOANALYSISTHEEXPERIMENTDATA，PLOTTEDTHESTANDARDCURVE，OBTAINEDTHEAMPLIFICAIONEFFICIENCYOFTHEREFERENCEANDTARGETGENE，CALCULATEDTHECONTROLGROUPCTBLANKGROUPCTANDTHEEXPERIMENTALGROUPCTTHERESULTSHOWEDTHATPACLITAXELCANINDUCETHEPRIMARYANDMETASTICCANINEMAMMARYTUMORSVITROCHMPANDCHMMAPOPTOSISINCHMP，CYCLIND1MRNAWASLOWERED，SIGNIFICANTDIFFERENTAFTER24HP001，BUTINCHMM，SIGNIFICANTDIFFERENTAFTER1GMOL／LPACLITAXEL12HP001INCHMP，P27KIPMRNAWASINCREASED，SIGNIFICANTDIFFERENTIN1I，TMOL／LPACLITAXELFOR12HP005，ANDFOR48HP27KIPMRNAWASINCREASEDTOTHEHIGHESTINCHMM，SIGNIFICANTDIFFERENTAFTER12HP001，AND01GMOL／LPACLITAXELFOR72HOURSWASINCREASEDTOTHEHIGHESTINCHMPANDCHMM，PCNAMRNAWASLOWEREDBYTHECONCENTRATIONANDTIMEOFPACLITAXEL，SIGNIFICANTDIFFERENTAMONGEACHGROUPPOO1，ITWASTHECONCENTRATIONTIMEEFFECTIII