簡介：間充質(zhì)干細胞MESENCHYMALSTEMCELLS，MSCS存在于成人體內(nèi)許多組織中，可以治療許多損傷性疾病。盡管在細胞基礎(chǔ)上的研究已經(jīng)取得了很多進展，但是在細胞的來源、擴增和分化成受損組織細胞來修復(fù)損傷等方面，還是有很多需要進一步研究的地方。間充質(zhì)干細胞有很強的克隆形成和擴增能力，并且具有向成骨，脂肪，軟骨，神經(jīng)和內(nèi)皮等多向分化潛能。MSCS已經(jīng)應(yīng)用于很多疾病的I臨床治療，包括肝硬化，急性心梗，自身免疫，輔助骨髓移植，神經(jīng)系統(tǒng)損傷等。本研究的第一部分旨在研究胎兒骨髓源和胎兒脂肪源的間充質(zhì)干細胞的克隆率，基本的表型，分化能力。我們已成功的從胎兒體內(nèi)多種組織骨髓和脂肪分離得到單克隆來源的間充質(zhì)干細胞。從多組織中獲得的干細胞，形態(tài)上基本與骨髓源FLK1CD31CD34多能干細胞相似，它們經(jīng)過體外培養(yǎng)后，均呈成纖維樣；具有穩(wěn)定的表型特征，即FLK1、CD105、CD44、CD29為陽性，內(nèi)皮細胞的特征性表型VONWILLEBRFACTVWF、CD31，造血細胞的表型CD34、CD45、CD11A、CD11B，以及HLADR均為陰性；具有能向三個胚層細胞分化的特性。在第二部分，我們研究了成體脂肪源的間充質(zhì)干細胞能否作為肝纖維化的一種治療手段，圍繞著間充質(zhì)干細胞能否抑制肝臟成纖維細胞的增殖和活化展開研究，初步探討了運用成體脂肪源的間充質(zhì)干細胞治療肝纖維化的可能性及可行性。本論文的第三部分旨在研究人類胎盤組織中分布的干細胞的生物學(xué)特征。首先從胎盤中通過極限稀釋法分離得到FLK1CD31CD34干細胞，它們具有多系分化的潛能，在單細胞水平上能分化成上皮，內(nèi)皮和神經(jīng)樣細胞，分析其形態(tài)、生長方式及主要的免疫表型，均與我們從成人骨髓組織分離得到的干細胞一致，并在單細胞水平上證實胎盤來源的FLKLCD31CD34細胞在適宜條件下能夠向三個胚層的細胞肝細胞；內(nèi)皮細胞；神經(jīng)細胞分化。

簡介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文RNA干擾NPM基因表達對白血病細胞生物學(xué)特性的影響姓名何鵬申請學(xué)位級別碩士專業(yè)臨床檢驗診斷學(xué)指導(dǎo)教師張伶20080501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文HHOURLBLURIABERTALLICULTURE小時LB培養(yǎng)基IRF一1INTERFERONREGULATORYFACTORS，干擾素調(diào)節(jié)因子MINMINUTE分鐘MMLVMMLVREVERSETRANSCRIPTASE鼠白血病源逆轉(zhuǎn)錄酶MRNAMESSENGERRIBONUCLEICACIDNPMNUCLEOPHOSMIN信使核糖核酸核仁磷酸蛋白PBSPHOSPHATEBUFFEREDSOLUTION磷酸鹽緩沖液PCRPOLYMERASECHAINREACTIONRNARIBONUCLEICACIDRNAIRNAINTERFERENCERPMROTAIONPERMINUTE聚合酶鏈反應(yīng)核糖核酸I斟A干擾每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)RTPCRREVERSETRANSCRIPTIONPOLYMERASECHAIN逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)REACTIONSECONDSHRNASHORTHAIRPINRNATAQTBETRISTAQDNAPOLYMERASETRISBORICACIDEDTA秒短發(fā)夾RNA嗜熱DNA聚合酶三羥甲基氨基甲烷硼酸TRISHYDROXYLMETHYLAMINOMETHANE三羥甲基氨基甲烷2

簡介：蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文激發(fā)型CD40單抗5C11對白血病來源樹突狀細胞的誘導(dǎo)作用及其細胞生物學(xué)特性研究姓名王正飛申請學(xué)位級別碩士專業(yè)免疫學(xué)指導(dǎo)教師張學(xué)光顧宗江20030501激發(fā)型CD40單抗5CII對白血病來誨樹突狀細胞的誘導(dǎo)作用及其細胞生物學(xué)特性研究中文摘要用。結(jié)論激發(fā)型CD40單抗5C11聯(lián)合細胞因子能誘導(dǎo)白血病細胞分化為功能性DC，這可能在白血病的過繼免疫療法中具有潛在的應(yīng)用價值。關(guān)鍵詞DC白血病細胞誘導(dǎo)分化激發(fā)型CD40單抗II

簡介：目的1觀察SONICHEDGEHOGSHH信號通路及其下游靶基因NMYC在人髓母細胞瘤MEDULLOBLASTOMA，MB中的表達情況；2分析白藜蘆醇RESVERATROL，RES對人MB細胞系UW2282和UW2283的SHH信號通路及其下游靶基因NMYC表達的影響，探討RES對人MB作用的分子機制，從而為臨床改善MB的治療現(xiàn)狀提供理論依據(jù)。方法從臨床收集18例人MB腦組織及11例大鼠腦組織的石蠟包埋標本，利用自行研制的組織微陣列儀制成石蠟組織微陣列，進行SHH和GLIL的免疫組織化學(xué)染色IHC，觀察這些因子在人MB及大鼠腦組織中的表達情況。UW2282、3細胞系培養(yǎng)于含有10％胎牛血清的DMEMDULBECCOSMODIFIEDEAGLE’SMEDIUM培養(yǎng)基中，用100ΜMRES處理細胞48H。為便于細胞形態(tài)觀察和免疫細胞化學(xué)染色ICC，將無菌細胞爬片預(yù)先置于培養(yǎng)皿中，取出時用冷丙酮固定。同時制備細胞懸液并離心沉淀用于RNA和蛋白質(zhì)的提取。采用RTPCR、WESTERNBLOTTING和ICC等方法分析RES處理前后UW2282，UW2283中SHH、GLIL和NMYC的表達改變情況。結(jié)果1SHH和GLIL在人MB組織中染色陽性率分別為8889％和9444％，均強于對照組；2RES有效抑制UW2282、3生長，誘導(dǎo)其分化和調(diào)亡，在MRNA和蛋白水平上，RES下調(diào)SHH、GLIL和NMYC的表達。結(jié)論1人MB組織中SHH、GLIL和NMYC的表達高于對照組。因此，SHH信號通路在大多數(shù)人MB中處于活化狀態(tài)2首次發(fā)現(xiàn)，RES在抑制人MB細胞系UW2282、3細胞增殖，促進分化并誘導(dǎo)凋亡的同時，還在MRNA和蛋白水平抑制SHH、GLIL和NMYC的轉(zhuǎn)錄與產(chǎn)生。RES對人MB細胞SHH信號通路的抑制可能與其增殖抑制、促分化和凋亡功能有某種內(nèi)在聯(lián)系。

簡介：目的肝細胞癌HEPATOCELLULARCARCINOMA，HCC是我國最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率有逐步上升的趨勢，嚴重危害人民的健康。腫瘤壞死因子TUMNECROSISFACT，TNF和相應(yīng)的腫瘤壞死因子受體TUMNECROSISFACTRECEPT，TNFR結(jié)合，轉(zhuǎn)導(dǎo)凋亡信號進入靶細胞，使靶細胞發(fā)生凋亡，是機體免疫系統(tǒng)清除腫瘤細胞的常見方式，而腫瘤細胞表達死亡因子的誘捕受體是腫瘤逃避機體免疫殺傷的機制之一。近年來新發(fā)現(xiàn)的TNFR超家族成員DCR3通過影響FASL、LIGHT和TLLA的促凋亡作用和免疫調(diào)節(jié)作用而抑制機體的抗腫瘤免疫，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。研究表明HCC組織存在DCR3的過表達，影響TCC細胞的凋亡，且HCC患者DCR3的表達水平與腫瘤的TNM分期、浸潤或轉(zhuǎn)移有關(guān)。這些研究結(jié)果提示，若能抑制DCR3的表達則有助于阻抑腫瘤的發(fā)展與浸潤轉(zhuǎn)移。RNA干擾RNAINTERFERENCE，RNAI是由與靶基因序列同源的雙鏈RNADOTLBLESTREDRNA，DSRNA啟動的一種序列特異性的轉(zhuǎn)錄后基因沉默機制，其介導(dǎo)子是2125NT的小干擾RNASHTINTERFERINGRNA，SIRNA，由細胞內(nèi)的DSRNA特異性核酸內(nèi)切酶DSRNASPECIFICERADONUCLEASE，DICER酶切產(chǎn)生。由于SIRNA具有特異性高、抑制作用強、穩(wěn)定性高、細胞攝取相對容易等優(yōu)點，因此，RNAI技術(shù)目前已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于基因功能研究和基因治療方面。本研究擬通過RNA干擾技術(shù)抑制HCC細胞系HEPG2中DCR3的表達，檢測DCR3干擾后HEP62細胞增殖、凋亡、遷移等生物學(xué)特性的改變，從而探討DCR3在HCC發(fā)生發(fā)展與浸潤轉(zhuǎn)移中的作用。材料與方法1應(yīng)用RTPCR方法檢測人HCC細胞系HEPG2、癌旁肝細胞系QSG7701及正常肝細胞系HL7702中DCR3的表達情況。2設(shè)計并合成針對DCR3基因的特異性SIRNA，采用陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑LIPOFECTAMIM2000將SIRNA轉(zhuǎn)染至高表達DCR3的HCC細胞系HEPG2，通過熒光顯微鏡下觀察和應(yīng)用流式細胞儀鑒定和檢測轉(zhuǎn)染效率。3應(yīng)用半定量RTPCR方法篩選有效的靶序列，將篩選出的有效靶序列轉(zhuǎn)染HEPG2細胞，免疫細胞化學(xué)法檢測其對HEPG2細胞DCR3蛋白表達的影響。4應(yīng)用MTT法檢測細胞增殖能力的改變。5應(yīng)用流式細胞儀測細胞周期的變化。6應(yīng)用流式細胞儀、DNALADDER方法檢測細胞的凋亡情況。7通過劃痕實驗檢測細胞體外遷移能力的變化。結(jié)果1人HCC細胞系HEPG2細胞中DCR3MRNA呈現(xiàn)高表達，而癌旁肝細胞系QSG7701和正常肝細胞系HL7702細胞中無DCR3MRNA表達。2LIPOFECTAMIM2000能有效地將SIRNA轉(zhuǎn)染至細胞內(nèi)，轉(zhuǎn)染效率約為85％。3各特異性DCR3SIRNA均有抑制DCR3MRNA表達的作用，其中以SIRNA4的作用更明顯，干擾作用達629％，SIRNA1、SIRNA2、SIRNA3的干擾作用分別為607％、321％、23O％轉(zhuǎn)染SIRNA1、SIRNA2、SIRNA3、SIRNA4組的DCR3MRNA表達與空白對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。選擇抑制作用最明顯的SIRNA4轉(zhuǎn)染HEPG2細胞作為特異性組進行后續(xù)實驗。免疫細胞化學(xué)結(jié)果顯示，空白對照組、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染組及非特異性SIRNA轉(zhuǎn)染組細胞DCR3蛋白呈陽性表達，特異性DCR3SIRNA4轉(zhuǎn)染組細胞蛋白呈陰性或弱陽性表達，特異性DCR3SIRNA4轉(zhuǎn)染組與前三組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。結(jié)論特異性DCR3SIRNA能有效抑制肝癌細胞系HEPG2的DCR3表達，使細胞周期阻滯于G1S期，能有效地誘導(dǎo)細胞凋亡，并能抑制HEPG2的增殖和細胞的遷移能力。

簡介：點擊查看更多胰腺癌的蛋白質(zhì)組學(xué)分析及annexin II siRNA對胰腺癌細胞的生物學(xué)效應(yīng)的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：山東醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文BFGF和FN對牙周組織三種細胞生物學(xué)活性的影響姓名葛少華申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師楊丕山20000401L、牙齦成纖維細胞的增殖速度明顯’陜于牙周韌帶細胞和牙槽骨細胞。BFGF和FN對三種細胞均有促增殖作用，但對于不同的細胞，BFGF和FN各自作用的最佳效應(yīng)濃度不同。2、牙槽骨細胞的堿性磷酸酶活性顯著高于牙周韌帶細胞和牙齦成纖維細胞，而牙周韌帶細胞的蛋白合成量又顯著高于其它兩種細胞。BFGF對牙周韌帶細胞和牙槽骨細胞的堿性磷酸酶水平及蛋白合成有抑制作用，而FN對這兩種細胞的作用正好與BFGF相反。兩種因子對牙齦成纖維細胞的堿性磷酸酶水平及蛋白合成均無顯著影響。3、牙槽骨細胞的礦化率商于牙周韌帶細胞，而牙齦成纖維細胞則無礦化結(jié)節(jié)形成。BFGF對牙槽骨細胞和牙周韌帶細胞的礦化結(jié)節(jié)蝴；成有抑制作用，而FN對礦化結(jié)節(jié)形成的促進作用不顯著Y7結(jié)論BFGF能促進細胞的增殖，但卻抑制細胞的分化成熟；而FN亦能促進細胞的增殖及蛋白合成，但其促進細胞分化的能力有限，尚需其它生長因子的協(xié)助以促進組織再生。關(guān)鍵詞堿性成纖維細胞生長因子纖維結(jié)合蛋白牙周韌帶細胞增殖分化，J7|＼

簡介：南方醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文腫瘤翻譯調(diào)控蛋白（TCTP）對結(jié)腸癌細胞LOVO的生物學(xué)特性影響及安全型慢病毒載體構(gòu)建探索姓名馬強申請學(xué)位級別博士專業(yè)免疫學(xué)指導(dǎo)教師李明20090410中文摘要安全性沒有很好解決，如對導(dǎo)入基因的控制、外緣基因及基因載體本身整合到宿主染色體帶來的一系列問題等；②用于大腸癌理想載體的選擇應(yīng)具有安全性、高效性、靶向性、大容量性和可控性等特點，目前還難以找到可運用到理想的臨床要求載體③缺乏足夠的基因治療靶序列，大腸癌的發(fā)生是一種多基因水平調(diào)控的失控所致單獨基因治療效果差。由此進一步深入研究大腸癌的發(fā)病機制，尋找確定更多更有效的治療靶基因，制備安全高效的基因治療載體是大腸癌基因治療中迫切需要解決的問題。本文第一部分著重研究腫瘤翻譯調(diào)控蛋白TCTP對高轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌細胞株的細胞生物學(xué)影響以及相關(guān)信號傳導(dǎo)通路的研究。第二部分著重研究新型基因治療用慢病毒載體生產(chǎn)體系的改進和優(yōu)化。第一部分通過構(gòu)建靶向TCTP基因的SHRNA質(zhì)粒表達載體，下調(diào)TCTP在LOVO細胞中的表達。通過CCK一8實驗檢測LOVO細胞的增殖速度，粘附實驗檢測LOVO細胞對ECM的粘附能力，趨化實驗和劃痕實驗檢測LOVO細胞的運動能力，侵襲實驗檢澳LJLOVO細胞對于ECM的分解穿透能力，EMSA以及熒光素酶實驗檢I貝OTCTP下調(diào)后對于NFRB活性的影響。通過成瘤實驗檢測TCTP下調(diào)對于LOVO細胞成瘤能力的影響，轉(zhuǎn)移模型實驗檢測LOVO細胞體內(nèi)肝轉(zhuǎn)移能力的影響，通過2D電泳和質(zhì)譜分析鑒定與TCTP相關(guān)蛋白，并初步評價TCTP在正常人以及病人血清中的含量。構(gòu)建SHRNA質(zhì)粒表達載體，質(zhì)粒酶切以及測序鑒定表明質(zhì)粒構(gòu)建成功。下調(diào)TCTP在LOVO細胞中的表達，經(jīng)熒光顯微鏡觀察各組LOVO細胞均出現(xiàn)綠色報告熒光，RT。PCR，WESTERNBLOTTING，QRTPCR分析鑒定TCTP的表達下調(diào)分別達至T82％、89％、73％。TCTP下調(diào)能夠體外減慢LOVO細胞的增殖速度，SHRNATCTP，SHRNATCTPLOVOPARENTAL組分別鋪96孔板，每孔細胞數(shù)2000個。每株細胞5個復(fù)孔，鋪7塊板，連續(xù)測量7天。從第4天開始，SHRNATCTP組生長速度明顯慢于SHNCRNATCTP組和NC組，經(jīng)過統(tǒng)計學(xué)分析后，SL刪ATCTP組在測量第1F1773P005、2F0048，P005、3F7865P005天時，11

簡介：輻射致癌過程大致可以分為啟動、促進及惡性進展三個階段為了在體外完整地建立起可以模擬輻射致癌各階段的細胞模型該研究以該室已建立的Α粒子輻射誘發(fā)的人支氣管上皮細胞惡性轉(zhuǎn)化株BERP35T4為基礎(chǔ)將該細胞接種于裸鼠皮下在裸鼠體內(nèi)連續(xù)傳代三次后觀察到該細胞獲得轉(zhuǎn)移潛能將該腫瘤組織進行體外分離腫瘤細胞并培養(yǎng)建系獲得了具有轉(zhuǎn)移潛能的惡性轉(zhuǎn)化細胞系BERP35T4TA該研究還以三種細胞系BEP2D、BERP35T4及BERP35T4TA為材料分別從免疫組化、增殖速度、錨著獨立生長能力、血清抗性及染色體數(shù)日等方面對這三種細胞系的特性進行了研究還利用TRANSWELL技術(shù)分析了BERP35T4TA的遷移能力并進一步分離出轉(zhuǎn)移細胞最后利用微衛(wèi)星不穩(wěn)定性分析技術(shù)對腫瘤細胞系中抑癌基因的雜合性缺失情況進行了檢測該研究所獲得的主要結(jié)果如下1BERP35T4IMMTALIZEDHUMANBRONCHIALEPITHELIALCELLTRANSFMEDBYΑPARTICLES成瘤性實驗以永生化人支氣管上皮細胞BEP2D為對照將BERP35T4細胞接種于56周齡裸鼠皮下每組接種9只雌雄兼半16周后對照組無一長出腫瘤09BERP35T4組相繼有4只長出腫瘤49其中1只裸鼠在其胸部及后肢出現(xiàn)肉眼可見的轉(zhuǎn)移瘤經(jīng)解剖發(fā)現(xiàn)肺部也出現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶2BEP2D、BERP35T4和BERP35T4TA的細胞生物學(xué)特性研究①細胞增殖能力②錨著獨立生長能力③血清抗性④染色體眾數(shù)⑤細胞的遷移能力綜合以上實驗結(jié)果該文認為BERP35T4TA細胞具有較為典型的惡性腫瘤細胞的表型并且還具有較高的轉(zhuǎn)移能力3微衛(wèi)星不穩(wěn)定性分析技術(shù)檢測抑癌基因的雜合性缺失針對位于肺癌高缺失染色體區(qū)域的9個已知基因FHIT、APC、PRLTS、P16、PTEN、P57、ATM、BRCA1、P53選擇了16個位于基因內(nèi)或與基因緊密連鎖的微衛(wèi)星多態(tài)性位點對上述三種細胞系BEP2D、BERP35T4及BERP35T4TA進行了微衛(wèi)星不穩(wěn)定性分析

簡介：第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文小鼠腫瘤細胞TLR2的表達及其生物學(xué)意義姓名羅冰申請學(xué)位級別碩士專業(yè)免疫學(xué)指導(dǎo)教師富寧劉艷君20060608摘要其他細胞株均擴增出約310BP的特異性擴增帶。PCR產(chǎn)物經(jīng)測序鑒定后，在線運行BLAST2，與MTLR2CDNA序列AFL24741作比較，其同源性均98％。以PE標記的TLR2單抗T25，采用流式細胞檢測技術(shù)檢測各種小鼠腫瘤細胞表面TLR2的表達情況，發(fā)現(xiàn)除YAC一1以外其他所有的細胞株表面都不同程度的表達TLR2，其中上皮細胞癌EMT6和RM一1可表達TLR2蛋白系本課題組首次報道。構(gòu)建反義MTLR2的重組體PCDNA31MTLR2一。PCDNA31和PCDNA31這兩個質(zhì)粒均為54KBP，結(jié)構(gòu)相似，均含有CMV、SV40、T7啟動子，AMP、NEO抗性基因和相同的多克隆酶切位點，但二者的多克隆酶切位點排列方向剛好相反，我們正是利用這一點，以真核表達重組體PCDNA31F_卜MTLR2為模板，擴增出兩端分別加有NOTI和XBAI酶切位點的MTLR2DNA片段，然后與PCDNA31進行連接，剛好使其反向插入，就構(gòu)建成PCDNA31MTLR2反義重組體。經(jīng)測序鑒定，插入T7啟動子下游的目的片段與MTLR2的序列反向互補；NOTI和XBAI雙酶切構(gòu)建的反義重組體，得到約5400BP的載體片段和2350BP的目的片段，表明成功構(gòu)建了反義MTLR2的重組體。將PCDNA31一MTLR2反義重組體在250V電壓和900UF電容的條件下電轉(zhuǎn)進入NS1細胞株，經(jīng)含600MG／LG418的RPMLL640完全培養(yǎng)基篩選培養(yǎng)3周，獲得陽性克隆NS一1MTLR2。同時以PCDNA31一空載體電轉(zhuǎn)NSL細胞株作為陰性對照，所得陽性克隆命名為NS1一PCDNA311。二、TLR2激動劑對腫瘤形成及腫瘤細胞生長影響的初步觀察卡介苗BCG是TLR2的激動劑之一，這里采用包含有BCG的弗氏完全佐劑來處理小鼠腫瘤模型。SWISS小鼠各10只，分別腹腔注射02ML的弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑，10天后，各組小鼠再追加注射02ML的弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑。之后第15天，以小鼠骨肉瘤S180細胞株接種小鼠背部皮下，10103個／只；對照組僅接種相同數(shù)量的腫瘤細胞。觀察成瘤時問平瘤體大小。結(jié)果顯示注射弗氏完全佐劑的小鼠形成腫瘤的潛伏期較長，并且生存時問也較長，與弗氏不完全佐劑組相比較，具有顯著性差異P0023，但與空白對照組沒有顯著性差異P0147；弗氏完全佐劑組形成較大實體瘤的數(shù)量為3只30％，與空白對照組8只，80％相比較具有顯著性差異P0032，但是與刁I完全佐劑組7只，70％相比較，則沒有顯著性差異P0078。以SWISS小鼠骨肉瘤S180細胞株1010’個／只接種小鼠背部皮下，其中實II

簡介：蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文HSP90抑制劑17AAG對人腎癌細胞生物學(xué)行為影響的體外研究姓名晏湘山申請學(xué)位級別碩士專業(yè)泌尿外科學(xué)指導(dǎo)教師嚴春寅20090501HSP90抑制劑17．AAG對人腎癌細胞生物學(xué)行為影響的體外研究中文摘要指標DO、SF2、DQ均呈現(xiàn)不同程度的下降，DO增敏比達到1．3169。結(jié)論在缺氧狀態(tài)下，HSP90抑制劑17．AAG對人腎癌細胞株CAKI．1具有明顯的增殖抑制作用，促進腫瘤細胞發(fā)生凋亡。其誘導(dǎo)人腎癌細胞株CAKI．1細胞凋亡的機制與其下調(diào)HIF．2A的表達有關(guān)。在缺氧狀態(tài)下，17．AAG可以提高人腎癌細胞株CAKI一1細胞的放射敏感性。關(guān)鍵詞腎細胞癌；缺氧誘導(dǎo)因子．2A；熱休克蛋白90；17一AAG；CAKI1；II作者晏湘山指導(dǎo)教師嚴春寅

簡介：遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文血管瘤內(nèi)皮細胞的生物學(xué)特性和重組人血管內(nèi)皮抑制素對血管瘤內(nèi)皮細胞作用的實驗研究姓名曹江申請學(xué)位級別碩士專業(yè)小兒外科指導(dǎo)教師俞松20090501遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文血管瘤內(nèi)皮細胞的生物學(xué)特性和重組人血管內(nèi)皮抑制素對血管瘤內(nèi)皮細胞作用的實驗研究結(jié)論1用組織塊法培養(yǎng)人血管瘤增殖期內(nèi)皮細胞易成活。分離的細胞能貼壁生長，生長曲線的停滯期、穩(wěn)定期長，于三周后才達到對數(shù)生長期。2重組人血管內(nèi)皮抑制素不僅對血管瘤內(nèi)皮細胞增殖有抑制作用，而且能促進其早期凋亡。關(guān)鍵詞血管瘤；血管內(nèi)皮細胞；細胞培養(yǎng)；重組人血管內(nèi)皮抑制素；增殖凋亡

簡介：山東大學(xué)博士學(xué)位論文EGF、雌二醇和生長抑素對人肝癌細胞生物學(xué)行為影響的研究姓名王文奇申請學(xué)位級別博士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（消化系?。┲笇?dǎo)教師劉倩20060417山東大學(xué)博士學(xué)位論文EGF、雌二醇和生長抑素對人肝癌細胞生物學(xué)行為影響的研究博士研究生王文奇導(dǎo)師劉倩摘要目的原發(fā)性肝癌是我國、也是世界上最常見的惡性腫瘤之一，嚴重危害人類的健康。自20世紀90年代以來，我國肝癌的死亡率已上升到腫瘤死亡率的第二位。近年我國肝癌治療效果得到明顯提高，但由于肝癌發(fā)生機制尚未闡明，治療效果仍不滿意。肝癌發(fā)生是一個多因素、多步驟的復(fù)雜生物學(xué)過程。HBV、HCV、表皮生長因子EGF、性激素、細胞因子、癌基因及抑癌基因等多種因素參與并促進了腫瘤的發(fā)生。EGF促進肝癌細胞DNA的合成，促進肝癌的發(fā)生與發(fā)展。EGFR廣泛分布于肝細胞及腫瘤細胞，與細胞增殖、分化調(diào)節(jié)、腫瘤轉(zhuǎn)化密切相關(guān)。EGF和EGFR在肝癌存在過表達，與肝癌的形成關(guān)系密切。雌二醇E2主要在肝臟代謝和滅活，可以誘導(dǎo)肝原癌基因活化。雌激素受體ER調(diào)控基因表達，與肝癌發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后有關(guān)。生長抑素SST和生長抑素受體SSTR在體內(nèi)分布廣泛，SST及其類似物SSTA在體外可以抑制多種人肝癌細胞株生長，可以分別對EGF、EGFR、E2、ER產(chǎn)生抑制作用，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。在EGF、E2、SST及其受體的信號傳導(dǎo)途徑中，有絲分裂原活化蛋白激酶MAPK發(fā)揮了重要作用，成為它們之I司相互作用的基礎(chǔ)。EGF、E2、SST及其受體與人肝癌細胞增殖的關(guān)系及其相互作用機制尚未闡明，且缺少系統(tǒng)研究的報道。本課題試圖通過研究人重組表皮生長因子RHEGF、人B一雌二醇13一E2和人生長抑素HSST對人肝癌HEPG2細胞增殖的影響和HEPG2細胞EGF、EGFR、E2、ER、SST和SSTR的變化，探討上述諸因素在肝癌發(fā)生中的相互作用及其機制，為應(yīng)用生長抑素治療肝癌提供實驗及理論基礎(chǔ)。

簡介：點擊查看更多4種納米顆粒對人胃癌BGC-823細胞的生物學(xué)效應(yīng).pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的樹突狀細胞DENDRITICCELLS，DCS是一種最具潛能的抗原提呈細胞，其對抗原進行捕獲、加工，處理后提呈給組織相容性復(fù)合物MAJHISTOCOMPABILITYCOMPLEX，MHCⅠ、Ⅱ類分子，誘導(dǎo)T淋巴細胞的增殖，在增強或調(diào)節(jié)細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)中起著決定性作用。乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUS，HBV感染者DCS的相關(guān)研究目前愈來愈受到眾多學(xué)者的關(guān)注。本課題擬研究慢性乙型肝炎不同感染階段外周血來源DCS的功能特點，比較DCS中HBV不同滴度時DCS的功能差異，并研究CPGODN能否促進DCS成熟，增強DCS功能，從而進一步揭示HBV感染不同狀態(tài)下DCS的免疫功能。方法本研究對10例慢性乙型肝炎患者、10例HBV攜帶者及10例健康對照者外周血來源DCS進行體外培養(yǎng)，應(yīng)用流式細胞技術(shù)檢測DCS的表面分子HLADR、CD80、CD86的表達，ELISA檢測DCS培養(yǎng)上清IL12水平，以比較DCS在慢性乙型肝炎不同感染階段的功能特點；同時運用熒光定量PCR的方法，對12例慢性乙型肝炎血清HBVDNA陽性患者及10例血清HBVDNA陰性患者外周血來源DCS內(nèi)的HBVDNA進行了檢測，并比較DCS中HBV不同滴度時DCS的功能差異；通過予以含非甲基化CPG基序的寡脫氧核苷酸鏈UNMETHYLATEDCPGMOTIFCONTAININGOLIGODEOXYNUCLEOTIDES，CPGODN干預(yù)，研究CPGODN能否有效促進DCS成熟，增強DCS功能。結(jié)果1實驗結(jié)果顯示，體外用含10％胎牛血清FBS的RPMI1640完全培養(yǎng)基加GMCSF和IL一4誘導(dǎo)人的外周血單個核細胞PERIPHERALBLOODMONONUCLEARCELLS，PBMCS來培養(yǎng)DCS，24小時后可見貼壁單核細胞聚集成大小不等葡萄串狀，粘附于培養(yǎng)板底，第3天可見這部分細胞體積增大，第4天可見部分細胞懸浮于細胞培養(yǎng)液，第5天可見這部分細胞數(shù)目增多，部分細胞出現(xiàn)許多毛刺。第7天培養(yǎng)液中飄浮著大量有明顯樹突狀的大個細胞或細胞團。將培養(yǎng)7天的DCS收集在透射電鏡下觀察，每個視野充滿DCS，可見細胞體積較大，細胞表面突起比較豐富，胞漿內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富，線粒體結(jié)構(gòu)較清楚，溶酶體豐富，核大而圓，核膜清晰，染色質(zhì)分布較均勻。慢性乙型肝炎患者及HBV攜帶者HLADR、CD80和CD86的表達率較正常對照組普遍降低，但HLADR、CD80和CD86的表達水平在慢性乙型肝炎患者及HBV攜帶者之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。ELISA檢測培養(yǎng)第7天DCS上清IL12水平，發(fā)現(xiàn)在DCS培養(yǎng)上清液中，IL12的表達水平在慢性乙型肝炎患者及攜帶者明顯低于正常人，而慢性乙型肝炎患者與攜帶者之間則無明顯差異。2對12例慢性乙型肝炎血清HBVDNA陽性患者及10例血清HBVDNA陰性患者外周血來源DCS內(nèi)的HBVDNA進行檢測發(fā)現(xiàn)12例血清HBVDNA陽性患者，其中有7例其DCS內(nèi)可檢測到HBVDNA，5例DCS內(nèi)未檢出HBVDNA，DCS內(nèi)HBVDNA檢出率為583％。流式細胞儀分析顯示，正常人的HLADR、CD80和CD86的表達陽性率均在58％以上，而慢性乙型肝炎血清HBVDNA陽性組及血清HBVDNA陰性組HLADR、CD80和CD86的表達率較正常人組普遍降低，尤以血清HBVDNA陽性組下降更為明顯。7例DCSHBVDNA陽性組及15例DCSHBVDNA陰性組HLADR、CD80和CD86的表達率亦較正常人組普遍降低，尤以DCSHBVDNA陽性組下降更為明顯。DCS培養(yǎng)上清IL12水平在血清HBVDNA陽性組明顯低于血清HBVDNA陰性組及正常人組，血清HBVDNA陽性組又低于血清HBVDNA陰性組。而IL12的表達水平在DCSHBVDNA陽性組明顯低于DCSHBVDNA陰性組及正常人組，DCSHBVDNA陰性組又低于正常人組。相關(guān)分析顯示，DCS表面分子的表達及DCS分泌IL12水平與血清及DCSHBV載量均呈顯著負相關(guān)。3將培養(yǎng)第6天的DCS，加入CPGODN繼續(xù)培養(yǎng)24小時后，透射電鏡觀察CPGODN刺激后DCS與完全培養(yǎng)基對照組DCS相比，其表面的突起豐富、增粗，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增多，空泡減少甚至消失。用流式細胞儀分析顯示，CPGODN刺激組CD80、CD86及HLADR的表達陽性率在慢性乙型肝炎組、HBV攜帶者組及正常人組均完全培養(yǎng)基對照組明顯升高。完全培養(yǎng)基對照組HLADR、CD86、CD80的表達陽性率在慢性乙型肝炎組、攜帶者組及正常人組之間比較發(fā)現(xiàn)慢性乙型肝炎組及攜帶者組HLADR、CD86、CD80的表達陽性率較正常人組明顯下降，但慢性乙型肝炎組和攜帶者組之間比較卻無顯著性差異。CPGODN刺激組HLADR、CD86、CD80的表達陽性率在慢性乙型肝炎組、攜帶者組及正常人組之間比較發(fā)現(xiàn)慢性乙型肝炎組HLADR、CD86的表達陽性率較攜帶者組及正常人組明顯下降，但攜帶者組和正常人組之間比較卻無顯著性差異；慢性乙型肝炎組及攜帶者組CD80的表達陽性率正常人組明顯下降，但慢性乙型肝炎組和攜帶者組之間比較卻無顯著性差異。ELISA檢測CPGODN刺激組及完全培養(yǎng)基對照組IL12的水平，發(fā)現(xiàn)CPGODN刺激組DCS分泌IL12的水平無論在慢性肝炎組、攜帶者組及正常人組均較完全培養(yǎng)基對照組明顯升高。完全培養(yǎng)基對照組及CPGODN刺激組DCS分泌IL12水平在慢性乙型肝炎組、攜帶者組及正常人組之間比較發(fā)現(xiàn)慢性乙型肝炎組及攜帶者組DCS分泌IL12水平較正常人組明顯下降，但慢性乙型肝炎組和攜帶者組之間比較卻無顯著性差異。結(jié)論1慢性乙型肝炎患者及無癥狀攜帶者均存在著DCS表型和功能的缺失。2慢性乙肝患者外周血DCS亦能受到HBV的感染，而且DCS的表型以及分泌IL12能力與血清及DCS內(nèi)HBV載量均呈顯著負相關(guān)關(guān)系。3CPGODN能夠明顯促進慢性乙型肝炎患者外周血DCS成熟，為CPGODN成為治療慢性乙型肝炎的一種新方法提供了實驗基礎(chǔ)。