簡介：目的檢測ΑMSH及其受體MC1R的瘢痕疙瘩組織中的表達和對瘢痕疙瘩成纖維細胞的生物學作用以正常皮膚和增生性瘢痕組織作對照初步探討ΑMSH在瘢痕疙瘩形成中的作用為瘢痕疙瘩的治療提供依據(jù)方法1、應用細胞培養(yǎng)方法對瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮膚組織來源的成纖維細胞進行培養(yǎng)與擴增2、應用MTT法檢測ΑMSH對瘢痕疙瘩成纖維細胞增殖的作用3、應用流式細胞術(shù)檢測ΑMSH對瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮膚成纖維細胞周期分布和增殖水平的影響4、應用ELISA方法檢測ΑMSH對瘢痕疙瘩成纖維細胞TGFΒ1分泌的影響5、應用免疫組化技術(shù)檢測不同組織中ΑMSH及其受體MC1R的表達以及體外培養(yǎng)的瘢痕疙瘩成纖維細胞MC1R的表達結(jié)論ΑMSH及MC1R在瘢痕疙瘩組織中的高表達、ΑMSH明顯促進瘢痕疙瘩成纖維細胞TGFΒ1的分泌以及瘢痕成纖維細胞對ΑMSH的反應性增強可能在促進瘢痕疙瘩的形成中起重要作用

簡介：少突膠質(zhì)系細胞包括少突膠質(zhì)細胞OLIGODENDROCYTEOLGS和少突膠質(zhì)前體細胞OLIGODENDROCYTEPRECURSCELLSOPCS，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)尤其是白質(zhì)內(nèi)的重要細胞成分。此前較多研究表明，當中樞神經(jīng)損傷時，少突膠質(zhì)細胞的髓鞘成分對于軸突再生具有明顯的抑制作用。但是，目前對于少突膠質(zhì)系細胞在神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮的營養(yǎng)與保護作用，尤其是對相對成熟神經(jīng)元的保護作用，卻研究甚少。近來的實驗發(fā)現(xiàn)，體外培養(yǎng)的OPCS具有向神經(jīng)干細胞NSCS逆向分化能力和無限增殖能力，而腦內(nèi)的成年OPCS與神經(jīng)元存在著突觸聯(lián)系現(xiàn)象，這提示少突膠質(zhì)系細胞有可能在體內(nèi)發(fā)揮著重要而復雜的功能。本課題從少突膠質(zhì)系細胞的體外培養(yǎng)和體內(nèi)移植入手，結(jié)合上丘逆行標記技術(shù)、視神經(jīng)損傷技術(shù)和大鼠視網(wǎng)膜髓鞘形成模型，來研究少突膠質(zhì)系細胞在體內(nèi)外的發(fā)育、分化和營養(yǎng)因子表達情況，及其所具有的神經(jīng)保護作用，以期進一步深入認識少突膠質(zhì)系細胞與神經(jīng)元之間的密切關(guān)系，并為中樞神經(jīng)相關(guān)疾病的治療提供新的思路。為此，本研究采用改良的膠質(zhì)細胞混合培養(yǎng)與差速貼壁方法獲得大鼠OPCS，使用無血清培養(yǎng)基進行擴增、培養(yǎng)，用免疫組織化學和流式細胞技術(shù)對培養(yǎng)細胞的純度進行鑒定，對少突膠質(zhì)系細胞表達部分營養(yǎng)因子的情況進行檢測采用TUNEL、MTT等方法對少突膠質(zhì)系細胞條件培養(yǎng)基對原代培養(yǎng)小腦顆粒神經(jīng)元的保護作用進行檢測；將OPCS移植入成年SD大鼠玻璃體內(nèi)，利用上丘逆行熒光標記技術(shù)，觀察眼內(nèi)移植的OPCS對眶內(nèi)視神經(jīng)切斷時的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞RGCS的保護作用及其持續(xù)時間；將OPCS或NSCS移植入新生和幼年SD大鼠玻璃體或視網(wǎng)膜內(nèi)，觀察不同時期視網(wǎng)膜內(nèi)髓鞘形成與分布特點，分析髓鞘的超微結(jié)構(gòu)，并觀察眼內(nèi)髓鞘形成對損傷神經(jīng)節(jié)細胞的保護作用。主要結(jié)果及結(jié)論如下1利用改良的混合膠質(zhì)細胞原代培養(yǎng)方法，結(jié)合搖床振蕩和差速貼壁，獲得純度大于93％的OPCS擴增培養(yǎng)的OPCS可以表達多種標記物包括NESFIN和GAP43，因子撤除導致細胞自發(fā)向OLGS分化和成熟；短期的血清刺激使OPCS出現(xiàn)克隆樣增殖現(xiàn)象；OPCS與OLGS可以在MRNA和蛋白水平表達BDNF和IGF1；OPCS與OLGS的條件培養(yǎng)基能夠促進原代培養(yǎng)的小腦顆粒神經(jīng)元的存活。2大鼠玻璃體內(nèi)移植的OPCS可在較長時間內(nèi)存活，部分細胞變?yōu)槎鄻O形狀；視神經(jīng)切斷后2周內(nèi)，OPCS移植組的RGCS存活數(shù)量大于對照組，表明少突膠質(zhì)系細胞能夠在體內(nèi)發(fā)揮神經(jīng)保護作用。3OPCS向新生大鼠玻璃體內(nèi)移植后4周，多數(shù)視網(wǎng)膜內(nèi)開始出現(xiàn)成束髓鞘，表明OPCS可在同種視網(wǎng)膜內(nèi)向少突膠質(zhì)細胞分化并成熟；髓鞘只分布于神經(jīng)纖維層，提示視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層具有促使髓鞘形成的作用；髓鞘束出現(xiàn)的比例、分布面積和形態(tài)變化與OPCS移植后大鼠的存活時間相關(guān)；紋狀體NSCS也可以在視網(wǎng)膜內(nèi)向OLGS分化并形成髓鞘。4OPCS向幼年大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)移植后7周，接近半數(shù)的視網(wǎng)膜內(nèi)發(fā)現(xiàn)成束髓鞘，多分布于原移植象限內(nèi)；透射電鏡和免疫組織化學檢測證實視網(wǎng)膜內(nèi)無明顯的RGCS退化現(xiàn)象及異位RGCS存在；形成的髓鞘具有正常的中樞神經(jīng)髓鞘樣特點，髓鞘化軸突的口徑明顯增大；視神經(jīng)切斷后10D內(nèi)，分布于髓鞘形成扇形區(qū)域內(nèi)的RGCS存活數(shù)量大于對照組，同時髓鞘束逐漸崩解消失，表明成熟的OLGS及其髓鞘有可能在體內(nèi)發(fā)揮了神經(jīng)保護作用。

簡介：蘇州大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所提交的學位論文是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學或其它教育機構(gòu)的學位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人承擔本聲明的法律責任。論文作者簽名2塑篁日期刃，≯’甲‘3蘇州大學學位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解蘇州大學關(guān)于收集、保存和使用學位論文的規(guī)定，即學位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學。本學位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。蘇州大學有權(quán)向國家圖書館、中國社科院文獻信息情報中心、中國科學技術(shù)信息研究所含萬方數(shù)據(jù)電子出版社、中國學術(shù)期刊光盤版電子雜志社送交本學位論文的復印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存和匯編學位論文，可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索。涉密論文口本學位論文屬在年月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文口論文作者簽名，弓M片￡日期7R堅’∽導師簽名笪翌鴦竺日期壘竺呈圣

簡介：目的新生兒中性粒細胞由于其殺菌機制不成熟導致新生兒高死亡率。新生兒中性粒細胞功能的研究說明新生兒中性粒細胞存在多方面功能不成熟，但是沒有一個統(tǒng)一的理論來解釋這種功能上的差異。本研究利用定量蛋白質(zhì)組學技術(shù)尋找新生兒和成人中性粒細胞的蛋白質(zhì)表達差異，從而解釋新生兒中性粒細胞功能不成熟的原因。方法ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學分析兩組臨床樣本新生兒臍帶血和健康成人靜脈血。KEGG分析差異蛋白的功能。WESTERNBLOT用于認證ITRAQ的蛋白表達結(jié)果。結(jié)果共有1332個蛋白被檢測到，其中98％蛋白被定量。當把差異表達蛋白倍數(shù)設定為124時，127個蛋白在新生兒和成人中性粒細胞中存在差異（P結(jié)論研究提供了一個整體的新生兒中性粒細胞與成人中性粒細胞的蛋白表達差異的全貌，揭示了臍帶血中性粒細胞的多種功能缺陷。此外，臍帶血新生兒S組份的下降有可能是S在臍帶血中性粒細胞中形成推遲的原因。

簡介：中山大學博士學位論文Y’’768013神經(jīng)生長因子及其受體對前列腺癌細胞生物學特性的影響及其機制THEEFFECTANDMOLECULARMECHANISMOFNGFANDITSRECEPTORTOPROSTATECANCER專業(yè)人體解剖與組織胚胎學博士研究生陳昌杰導師何蘊韶教授答辯委員會主席答辯委員會成員‰填厶淞泓彬俐2啷鉗月刪L砂拗飛VC神經(jīng)生長因子及其受體對前列腺癌細胞生物學特性的影響及其機制凋亡，具有抑制NGF刺激TSUPRL、PC3前列腺癌細胞株增殖的能力。研究還發(fā)現(xiàn)，與正常前列腺上皮細胞中的表達情況不同，在前列腺癌細胞形成的過程中，P75逐漸失去其表達，在四種轉(zhuǎn)移性前列癌細胞株中P75完全不表達。文獻報道，在正常上皮細胞中P75受體的表達率為100％，但在癌形成過程中，特別是在分化良好的腫瘤中其表達減少到37％，分化中等的下降到36％，分化較差的僅僅為16％。P75基因表達與前列腺腫瘤病理學分級呈負相關(guān)，P75受體和血清PAS水平可以作為前列腺癌的輔助診斷工具。有研究表明，在前列腺癌細胞株P(guān)C3中表達P75受體，可導致細胞凋亡增加，抑制微衛(wèi)星癌的形成，更深入地研究證實，對前列腺癌而言，P75是一種新的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因。P75與TRKA受體協(xié)同性的提高NGF對TRKA受體反應性，P75又與IIJN腺細胞凋亡有關(guān)，因此，P75受體失表達可被視為前列腺腫瘤細胞阻止凋亡機制的～個環(huán)節(jié)。P75對膀胱腫瘤生長的抑制作用，可能是通過下述機制來實現(xiàn)，既誘導腫瘤細胞停留在G1期，同時減少S期細胞數(shù)量，阻礙細胞周期進展。最新文獻報道，P75通過NFKAPPAB和JUNK信號途徑抑制PC3細胞增殖和誘導腫瘤細胞凋亡。TRK受體為酪氨酸激酶受體家族，其細胞外區(qū)域與原肌球蛋白融合，具有激活酪氨酸激酶的活性。該家族包括TRKA、TRKB、TRKC三種受體，通過與不同的神經(jīng)營養(yǎng)因子結(jié)合，來調(diào)節(jié)中樞和周圍神經(jīng)元的生長、分化、凋亡。TRK基因最初作為癌基因，該基因編碼的TRKA，分子量為140KD，能以高親和力與NGF結(jié)合。TRKA在神經(jīng)發(fā)育、調(diào)節(jié)細胞分化和細胞死亡中起著關(guān)鍵作用，而NGF／TRKA信號傳導途徑如何及其對腫瘤發(fā)生、發(fā)展的作用如何均未完全清楚。前列腺癌細胞株完全失去P75受體表達，但保留TRKA的表達。利用吲唑復合物CEP75L酪氨酸激酶受體抑制劑抑制NGF／TRKA信號傳導途徑，能夠抑制腫瘤細胞增殖，誘導前列腺腫瘤細胞凋亡，說明NGF／TRKA信號通路在前列腺癌中起著非常重要的作用。目前關(guān)于NGF及其受體在前列腺癌中的表達情況及其與臨床病理的關(guān)系，以及P75和TRKA對前列腺癌細胞的作用等問題，仍有待深入地研究。若針對上述問題的研究得以實現(xiàn)，那么，基于研究的進一步設想是，能否采用P75轉(zhuǎn)基因治療前列腺癌，能否采用阻斷NGF／TRKA信號傳導途徑的方式，來抑制前列腺腫瘤細胞的增殖，以實現(xiàn)阻止腫瘤細胞生長的目的。

簡介：學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學或其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均己在論文中作了明確的說明。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關(guān)責任。作毒簽名孛吼捌轤{月監(jiān)日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者和指導教師完全了解中南大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定即學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交學位論文的復印件和電子版；本人允許本學位論文被查閱和借閱；學?？梢詫⒈緦W位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用復印、縮印或其它手段保存和匯編本學位論文。保密論文待解密后適應本聲明。作者簽名啦日期72雌年。至月J翌日一名翻INVITROSTUDYONSHRNADECREASINGTHEEXPRESSIONOFHUMANTESTISSPECIFICGENETDRGLANDAFFECTINGTHEPROLIFERATION，INVASIONANDAPOPTOSISOFNTERA一2CELLABSTRACT0BJECTIVEWEHAVESCREENEDANDCLONEDANOVELHUMANTESTISSPECIFICGENE，NAMEDTESTISDEVELOPMENTALRELATEDGENE1TDRG1GENBANKDQ168992，USINGDIGITALDIFFERENTIALDISPLAY．INOURPREVIOUSWORK，WEHYPOTHESIZEDTHATTHISGENEMIGHTBEINVOLVEDINTHEOCCURRENCEANDDEVELOPMENTOFTESTICULOMA．TOINVESTIGATETHISPOSSIBILITY,WEHAVESUCCESSFULLYESTABLISHEDASTABILIZEDRNAINTERFERENCESYSTEMTODECREASETHEEXPRESSIONOFTDRGLINNTERA．2EELLLINE．INTHISSTUDY,TOEXPLORETHEFUNCTIONOFTDRGLINTESTICULOMAFURTHER,WESUCCESSFULLYTRANS；FECTEDTHETDRG1．SHRNA486ANDTDRG1．SHRNA／CONTROLEXPRESSIONVECTORSDESCRIBEDINOURPREVIOUSWORKPUBMEDPMID23117448INTONTERA．2CELLSINVITROANDTESTEDTHEBIOLOGICALBEHAVIORSOFNTERA一2CELLS．METHODSFIRSTLY,WECHECKEDTHEEXPRESSIONOFTDRGLINNTERA．2CELLLINE．THENWEUSEDFLUORESCENCEMICROSCOPETOENSURETHESUCCESSFULTRANSFECTION．THEEXPRESSIONOFTDRG1MRNAANDPROTEINWASVERIFIEDBYFLUORESCENCEQUANTITATIVEPCRANDINDIRECTEELLIMMUNOFLUORESCENCE，RESPECTIVELY．FURTHERMORE，WEUSEDSUCHMETHODSASMTTASSAY,TRANSWELLASSAYANDFLOWCYTOMETRYTODETECTTHEBIOLOGICALBEHAVIORSOFNTERA．2CELLS．RESULTSWEDETERMINEDTHATTHETDRGLMRNAANDPROTEINLEVELSWERESIGNIFICANTLYREDUCEDBVTDRG1．SHRNA486EXPRESSIONVECTOR．MOREOVER,THEABILITYTOPROLIFERATEANDINVADEINVITROWASSUPPRESSEDINCELLSWHERETHEEXPRESSIONOFTDRG1WASDOWNREGULATED．ANDACORRESPONDINGINCREASEINTHEAPOPTOTICPOTENTIALWASOBSERVED．CONCLUSIONFIRSTLY,THESERESULTSINDICATETHATTHETDRG1．SHRNA486EXPRESSIONVECTORCONSTRUCTEDPREVIOUSLYCANINTERFERETHETDRGLEXPRESSIONEFFECTIVELYANDSTABLY．WECONSTRUCTAGOODCELLLINEMODELINWHICHTDRG1EXPRESSIONWASINHIBITED．SECONDLY,THEABILITYOFPROLIFERATIONANDINVASIONOFNTERA一2CELLSINVI仃OCANBEPOSITIVELYREGULATEDBYTDRG1，WHILETHEPOTENTIALOFAPOPTOSISCANBEIII

簡介：細胞微環(huán)境中除了微流體流動引起的動態(tài)變化的剪應力外，還包含多種濃度隨時間變化的生化因子，即動態(tài)生化信號，這些動態(tài)生物力學和生化信號對細胞功能和細胞行為起重要的調(diào)控作用。近年來微流控芯片技術(shù)成為離體構(gòu)建細胞微環(huán)境用以研究細胞與微環(huán)境相互作用的重要實驗技術(shù)平臺。但現(xiàn)有的大多數(shù)研究將細胞暴露于恒定濃度的生化環(huán)境中，僅能為細胞加載單一的生物力學或生化信號，并且忽略了微通道傳輸特性對動態(tài)生化信號傳輸?shù)挠绊懀瑢е聼o法實現(xiàn)對離體細胞生物力學或生化動態(tài)微環(huán)境的精確控制?；诹黧w力學和微流控芯片技術(shù)，本文設計了一種流量法控制兩種動態(tài)生化信號快速切換刺激的Y型微流控剪切裝置。該裝置能對離體培養(yǎng)的細胞精確加載剪應力和不同動態(tài)生化信號的組合切換刺激用于細胞生物學分析。將Y型微流控剪切裝置的混合通道看作信號傳輸系統(tǒng)，考慮微通道內(nèi)定常流和單向振蕩流流速分布、TAYLARIS彌散、分子橫向擴散、通道尺寸等因素的影響，系統(tǒng)分析了混合微通道的傳輸特性和動態(tài)生化信號在混合微通道內(nèi)的傳輸規(guī)律。在定常流情況下，利用分離變量法求解混合微通道內(nèi)動態(tài)生化信號傳輸?shù)腡AYLARIS彌散控制方程，得到了混合微通道信號系統(tǒng)傳遞函數(shù)和截止頻率的解析表達式。數(shù)值計算結(jié)果表明混合微通道信號系統(tǒng)具有低通濾波特性，其截止頻率是由微通道高度日、流體動力粘度Μ、分子擴散系數(shù)D、傳輸距離Z和剪應力ΤW決定的函數(shù)。在單向振蕩流情況下，用數(shù)值仿真方法分析了振蕩流頻率、振蕩流幅度、平均流量和傳輸距離對微通道內(nèi)動態(tài)生化信號傳輸?shù)挠绊?。結(jié)果表明，振蕩流頻率接近于生化信號頻率時，振蕩流對生化信號傳輸有明顯的非線性調(diào)制作用增大振蕩幅度將加劇生化信號的非線性失真程度。攝動分析結(jié)果表明，振蕩流與動態(tài)生化信號的非線性相互作用是導致振蕩流與定常流中生化信號傳輸產(chǎn)生差異的根本原因。本文工作有助于理解動態(tài)生化信號在動態(tài)微環(huán)境中的傳輸規(guī)律，同時也為運用微流控芯片技術(shù)離體構(gòu)建動態(tài)的細胞微環(huán)境時相關(guān)微通道傳輸系統(tǒng)的優(yōu)化提供了一定的理論依據(jù)。

簡介：復旦大學碩士學位論文星形膠質(zhì)細胞原代培養(yǎng)與神經(jīng)干細胞誘導分化的生物學研究THEBIOLOGICALRESEARCHOFASTROCYTESFROMPRIMARYCULTUREANDNEURALSTEMCELLSINDUCED作者姓名滕騰學科專業(yè)臨床醫(yī)學碩士（兒外科導師李昊教授導師組成員陳蓮副教授陸國平副教授復旦大學碩JR研究生學位論文星形膠質(zhì)細胞原代培養(yǎng)與神經(jīng)干細胞誘導分化生物學研究縮略語注釋英文縮寫英文詞匯中文詞匯ASTASTROCYTE星形膠質(zhì)細胞GFAPGLIALFIBRILLARYACIDICPROTEIN膠質(zhì)纖維酸性蛋白CNSCENTRALNERVOUSSYSTEM中樞神經(jīng)系統(tǒng)BFGFBASICFIBROBLASTGROWTHFACT堿性成纖維細胞生長RTPCRREVERSETRANSCRIPTASEPOLYMERASECHAINREACTION逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應REALIMEPCRREALTIMEPOLYMERASECHAINREACTION實時聚合酶鏈反應CNTFCILIARYNEUROTROPHICFACT睫狀神經(jīng)生長因子EGFEPITHELIALGROWTHFACT表皮生長因子NSCNEURALSTEMCELL神經(jīng)干細胞DAPI46DIAMIDINO2PHENYLINDOLE46_聯(lián)脒2_苯基N引噪FBSFETALBOVINESERUM胎牛血清PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖液VEGFVULARENDOTHELIALGROWTHFACT血管內(nèi)皮生長因子BFGFBASICFIBROBLASTGROWTHFACT堿性成纖維生長因子NPCNEURALPRECURSCELL神經(jīng)前體細胞MMPMATRIXMETALLOPROTEINASE基質(zhì)金屬蛋白酶TLR4TOLLLIKERECEPT4TOLL樣受體44

簡介：分類號分類號R7352R7352學校代碼學校代碼1039210392學科專業(yè)代碼學科專業(yè)代碼100210100210學號號21210031132121003113碩士學位學位論文論文轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)錄因子SOX2SOX2、OCT4OCT4在胃癌組織中的表達及過表達在胃癌組織中的表達及過表達SOX2SOX2對胃癌細胞生物學特性影響的研究對胃癌細胞生物學特性影響的研究ASTUDYABOUTTHEEXPRESSIONOFSOX2OCT4INGASTRICCANCERTISSUESTHEIMPACTOFOVERPRESSIONOFSOX2INTHEBIOLOGICALACTERISTICSOFGASTRICCANCERCELLS學位類型型醫(yī)學碩士醫(yī)學碩士所在學院院第一臨床第一臨床醫(yī)學院學院申請人姓名申請人姓名徐毅徐毅學科學科、專業(yè)專業(yè)外科學（普外科）外科學（普外科）導師師羅琪羅琪教授教授研究起止日期研究起止日期2012013年1010月至月至2012015年2月答辯委員會主席答辯委員會主席陳思曾陳思曾教授教授答辯日期期2012015年0505月1313日二○一五○一五年五月福建醫(yī)科大學碩士學位論文目錄英文縮略詞英文縮略詞1中文摘要中文摘要2ABSTRACT5前言前言8材料與方法材料與方法101主要材料1011組織標本1012細胞株來源1013質(zhì)粒來源1015主要試劑1216主要試劑的配制1417PCR引物162實驗方法1621組織標本采集1622細胞培養(yǎng)1623慢病毒包裝1724慢病毒生物學滴度測定1825慢病毒感染SGC7901并誘導穩(wěn)轉(zhuǎn)株SGC7901HSOX2，穩(wěn)轉(zhuǎn)株SGC7901ZPP1926總RNA提取及MRNA逆轉(zhuǎn)成CDNA20

簡介：第二軍醫(yī)大學碩士學位論文CD34、CD105、MMP9在脊柱骨巨細胞瘤中的表達及其生物學意義的研究姓名黃權(quán)申請學位級別碩士專業(yè)骨外科學指導教師肖建如20080401獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行的研究工作。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本人承擔本聲明的法律責任。學位論文作者簽名叛投學位論文使用授權(quán)書聲明本人完全了解第二軍醫(yī)大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤。允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)第二軍醫(yī)大學可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。保密的學位論文在解密后適用本授權(quán)書學位論文作者簽名勢衣勺簽字日期≯噻針月這日導師張％簽字日期勘。繹嵋7，日

簡介：第一部分、脂肪基質(zhì)干細胞與骨髓間充質(zhì)干細胞生物學特性的比較目的分離培養(yǎng)人脂肪基質(zhì)干細胞，并鑒定其表型，建立脂肪基質(zhì)干細胞的分離、純化、擴增和鑒定的方法。比較脂肪基質(zhì)干細胞與骨髓間充質(zhì)干細胞MSC生物學特性上的異同，為的細胞移植治療提供實驗依據(jù)。方法分離人脂肪組織，膠原酶Ⅰ消化后制備細胞懸液并培養(yǎng)，消化傳代以純化細胞。細胞計數(shù)法繪制脂肪基質(zhì)干細胞的生長曲線，流式細胞術(shù)及免疫熒光法檢測其表型。密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞，有核細胞貼壁法培養(yǎng)獲得MSC。對培養(yǎng)前后的和MSC分別進行計數(shù)比較，流式細胞儀測定比較和MSC表面抗原表達的異同。通過混合淋巴細胞反應和淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗比較這兩種細胞免疫學特性的差別。結(jié)果從脂肪中分離的細胞第3天開始貼壁生長，其倍增時間約為48小時。以后細胞主要呈梭形生長。其表型為CD31CD34CD45HLADRCD29CD105CD13CD44。從骨髓中分離出的有核細胞數(shù)多于從脂肪中分離的有核細胞P＜0001，但培養(yǎng)后獲得的干細胞數(shù)差別無顯著性意義P＞005。和MSC都表達CD13、CD29、CD44、CD105，而在CD49D、CD106的表達上存在差異。相同數(shù)量的和MSC在混合淋巴細胞反應、淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗中對淋巴細胞的抑制作用相當P＞005。結(jié)論成功建立了從人脂肪組織中分離培養(yǎng)和擴增基質(zhì)干細胞的體系。和MSC在細胞表面抗原表達和免疫原性等方面既有相似之處，又存在一些差異，說明是一群不同于MSC的細胞。第二部分、脂肪基質(zhì)干細胞多向分化潛能的研究目的研究脂肪基質(zhì)干細胞體外定向分化為心肌樣細胞、神經(jīng)元樣細胞、成骨細胞和脂肪細胞的能力，進一步了解的生物學特性。方法獲取并培養(yǎng)正常人的。5氮胞苷5AZA誘導分化為心肌樣細胞，全反式維甲酸ATRA誘導分化為神經(jīng)元樣細胞，不同濃度地塞米松聯(lián)合維生素C、Β磷酸甘油分別誘導分化為成骨細胞和脂肪細胞。倒置顯微鏡觀察誘導后細胞的形態(tài)，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應RTPCR檢測心肌相關(guān)基因ANP、CTNT、CTNI和ΑMHC及神經(jīng)細胞相關(guān)基因NESTIN的表達。免疫熒光法檢測CTNT和結(jié)蛋白的表達；WESTERNBLOT法檢測CONNEXIN43的表達。免疫組織化學染色法和WESTERNBLOT法檢測神經(jīng)絲蛋白NF和神經(jīng)元烯醇化酶NSE的表達。VONKOSSA染色法檢測鈣鹽沉積，油紅O染色法檢測誘導后脂肪細胞形態(tài)。結(jié)果經(jīng)5氮胞苷的作用可呈現(xiàn)典型的心肌樣細胞形態(tài)，ANP、CTNT、CTNI和ΑMHC基因及CTNT、結(jié)蛋白和CONNEXIN43均呈陽性表達。不同擴增代數(shù)的經(jīng)誘導劑ATRA的作用均呈現(xiàn)典型的神經(jīng)元樣細胞形態(tài)，巢蛋白基因及NF、NSE均表達陽性。向成骨細胞誘導后有鈣鹽沉積，VONKOSSA染色陽性；向脂肪細胞誘導分化后油紅O染色陽性。結(jié)論具有體外大量擴增并保持低分化狀態(tài)的特性，以及定向分化為心肌樣細胞、神經(jīng)元樣細胞、成骨細胞和脂肪細胞的能力是一種可用于組織工程的理想的種子細胞。第三部分、脂肪基質(zhì)干細胞對異基因T淋巴細胞和樹突狀細胞的影響及機制探討目的研究對異基因T淋巴細胞和樹突狀細胞表型及分泌細胞因子的影響，探討發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用的方式和可能機制。方法1將上清和分別與異基因T淋巴細胞進行混合培養(yǎng)。MTT法檢測T細胞的增殖，ANNEXINⅤ法檢測凋亡，流式細胞術(shù)檢測T淋巴細胞中CD4CD25細胞的比例，ELISA法檢測T細胞分泌IL10和TGFΒ1的水平，RTPCR法檢測FOXP3基因的表達。2將上清和分別與異基因樹突狀細胞DC進行混合培養(yǎng)。流式細胞術(shù)檢測CD80、CD83和CD86的表達，ELISA法檢測DC表達IL12的水平，RTPCR法檢測吲哚胺2，3雙加氧酶IDO基因的表達。結(jié)果1上清對T淋巴細胞的增殖和凋亡無明顯影響。對T淋巴細胞的生長有抑制作用，但對其凋亡無影響。上清和均能增加CD4CD25T細胞在T淋巴細胞中的比例，增加T細胞分泌IL10和TGFΒ1的水平，上調(diào)FOXP3基因的表達。2上清與DC共培養(yǎng)后，使DC表達CD80、CD83和CD86減少；上清與均能降低DC分泌IL12的水平，并上調(diào)IDO基因的表達。結(jié)論能通過細胞直接接觸和分泌細胞因子這兩種方式分別作用于T淋巴細胞和樹突狀細胞，發(fā)揮免疫負調(diào)節(jié)作用，并參與誘導機體的免疫耐受。

簡介：目的探討人腎臟系膜細胞（HUMANMESANGIALCELLS，HMCS）的活化最佳條件和HMCS活化的細胞表型和分子標志，以及活化后的HMCS對人單核巨噬細胞HUMANMONOCYTEMACROPHAGESCELLS，HMMCS產(chǎn)生的生物學效應。方法1人HMCS的活化研究及活化后的細胞表型和分子標志研究用10NGML、20NGML、50NGML的重組人血小板源性生長因子RECOMBINANTHUMANPLATELETDERIVEDGROWTHFACTBB，PDGFBB分別刺激HMCS2H、6H、12H、24H、48H、72H，實時熒光定量核酸擴增檢測系統(tǒng)技術(shù)REALTIMEQUANTITATIVEPCRDETECTINGSYSTEM，QPCR尋找并確定最佳刺激濃度和時間細胞計數(shù)CELLCOUNTINGK8，CCK8檢測HMCS活化后的增殖能力細胞劃痕實驗CELLSCRATCHTEST測定HMCS活化后的趨化及遷徙能力免疫熒光染色技術(shù)IMMUNOFLUESCENCESTAINING檢測活化后的HMCS的DESMIN、ASMA、PDGFRΒ、TRANSGELIN、TENSIN表達情況，并利用QPCR技術(shù)檢測HMCS處于活化高表達狀態(tài)下可以持續(xù)的時間。2活化的人腎系膜細胞對人單核巨噬細胞的生物學效應用QPCR方法檢測PDGFBB刺激后的HMCS是否可以分泌誘導HMMCS活化的細胞因子以及有無分泌HMMCS活化的分子標志將PDGFBB誘導的的HMCS與HMMCS置于TRANSWELL系統(tǒng)中進行共培養(yǎng)，選取2H、6H、12H、24H、48H、72H時間節(jié)點，研究活化后的HMCS對HMMCS的生物學效應CCK8檢測共培養(yǎng)后HMMCS的增殖能力，細胞劃傷實驗檢測共培養(yǎng)后HMMCS的趨化和遷徙能力。結(jié)果1人HMCS的活化以及活化后的細胞表型和分子標志1QPCR技術(shù)檢測不同濃度刺激下的不同時間點的HMCS活化后的細胞因子IL1、IL6、CCL2、PDGFRΒ、TRANSGELIN、TENSINMRNA表達情況結(jié)果顯示當使用濃度為20NGML的PDGFBB刺激HMCS時，效果最為明顯，且于刺激48H的時候觀察細胞因子分泌情況效果最佳并且最為顯著，72H時觀察反而有一個回落趨勢，說明HMCS活化于48H的時候出現(xiàn)頂峰。2不同濃度的PDGFBB刺激HMCS后細胞的增殖能力細胞計數(shù)和CCK8均顯示加入PDGFBB刺激的HMCS相比較于空白對照組，均在20NGML濃度的PDGFBB刺激下增殖最為明顯P＜005。3活化后的HMCS的的遷徙能力變化分別于六孔板內(nèi)劃傷20NGML的PDGFBB刺激48H后的HMCS和對照組，結(jié)果顯示實驗組的細胞最后剩余的傷痕面積明顯少于對照組，面積計算有統(tǒng)計學意義P＜005。4細胞活化表型的蛋白質(zhì)學改變免疫熒光染色顯示，活化表型DESMIN、ASMA、PDGFRΒ、TRANSGELIN、TENSIN表達量與對照組相比均有增強，NFKB的核內(nèi)轉(zhuǎn)運也明顯強于對照組。5HMCS處于活化高表達狀態(tài)下可以持續(xù)的時間HMCS于48H的時候處于活化高表達的最高峰，以48H為基點，QPCR檢測技術(shù)顯示這種活化狀態(tài)一直到在此之后的48H才逐漸趨于沒有。2活化的人腎系膜細胞與人單核巨噬細胞的生物學效應1PDGFBB刺激HMCS細胞可以分泌促使HMMCS活化的細胞因子TNF和IL4，而不會分泌HMMCS活化的分子標志CCL0和CCL15和CCL17。2活化的HMCS和HMMCS共培養(yǎng)共培養(yǎng)狀態(tài)下的HMMCS不分泌CCL17（抑炎型），而會分泌CCL15M1型和CCL1（調(diào)節(jié)型）并在24H的時候達到最高。3與活化的HMCS共培養(yǎng)后的HMMCS細胞的增殖能力和遷徒趨化能力都明顯高于未共培養(yǎng)的HMMCSP＜005。結(jié)論1PDGFBB刺激HMCS并可以致其活化的最佳濃度和最佳時間分別是20NGML和刺激48H，在此條件下，HMCS的增殖和遷徙能力都達到最高點P＜005，免疫熒光也表明各種分子標志和細胞表型都在此時表達量最高。此種活化狀態(tài)在逐漸變?nèi)醯那闆r下仍然可以維持大約48H，充足用于刺激并活化HMMCS。2活化的HMCS可以分泌誘導HMMCS活化的細胞因子而不會分泌HMMCS活化的細胞表型和分子標志，可以排除后期共培養(yǎng)時的假陽性結(jié)果。共培養(yǎng)24HHMMCS的細胞表型表達量最高，活化后的HMCS只會刺激HMMCS產(chǎn)生M1型巨噬細胞（促炎）和調(diào)節(jié)型巨噬細胞，而不會刺激HMMCS產(chǎn)生M2型巨噬細胞（抑炎）。

簡介：各種家用電器、輸電線路等產(chǎn)生的工頻電磁場和移動通訊設備產(chǎn)生的射頻電磁場是日常生活中最常見的兩類電磁輻射。由于二者的輻射強度越來越大人們暴露在其中的時間越來越長有關(guān)這兩類電磁場對人體健康的影響已經(jīng)受到廣泛關(guān)注。流行病學研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)長期暴露在包括工頻電磁場在內(nèi)的極低頻電磁場中的人們易患白血病腦瘤及乳腺癌而長期手機輻射則與聽神經(jīng)瘤和腦膠質(zhì)瘤發(fā)生密切相關(guān)因此國際癌癥研究機構(gòu)IARC分別于2002年和2011年將極低頻電磁場和射頻電磁場列為人類可疑致癌物。目前關(guān)于這兩類電磁輻射致癌效應的研究尚缺乏足夠的實驗依據(jù)。體外細胞轉(zhuǎn)化實驗是模擬整體致癌啟動和促進過程的一種體外實驗方法。研究表明體外培養(yǎng)細胞其細胞形態(tài)、周期、增殖和凋亡等生物學特性的改變與細胞的惡性轉(zhuǎn)化密切相關(guān)但迄今為止有關(guān)長期環(huán)境電磁輻射對哺乳類細胞生物學特性的影響研究尚未見報道。為了探討工頻電磁場和射頻電磁場與腫瘤發(fā)生的關(guān)系本實驗以對電磁輻射較為敏感的兩種細胞株人眼晶狀體上皮細胞SRA0104和小鼠胚成纖維細胞BALBC3T3為研究對象觀察了50HZ工頻電磁場和1950MHZ射頻電磁場長期暴露對SRA0104和BALBC3T3細胞形態(tài)、周期、增殖、凋亡、遷移力以及惡性轉(zhuǎn)化能力的影響進行了研究明確了本實驗條件下的電磁輻射對SRA0104和BALBC3T3細胞生物學特性的影響并探討了其相關(guān)機制。方法將處于指數(shù)生長期的SRA0104和BALBC3T3細胞假暴露或暴露于磁場強度為23MT頻率為50HZ的工頻電磁場中每天連續(xù)暴露2H每周暴露5天連續(xù)暴露11周將處于指數(shù)生長期的SRA0104和BALBC3T3細胞假暴露或暴露于頻率為1950MHZ比吸收率SPECIFICABSPTIONRATESAR為279WKG的射頻電磁場中每天暴露1H每周暴露5天周一至周五連續(xù)暴露4周。暴露結(jié)束后立即收集細胞相關(guān)檢測方法和指標如下1利用MTT法檢測細胞存活力2利用流式細胞術(shù)檢測細胞周期與凋亡3利用免疫蛋白印跡法WESTERNBLOT檢測蛋白表達水平4利用劃痕實驗檢測細胞遷移能力5利用軟瓊脂克隆和平板克隆實驗檢測細胞的惡性轉(zhuǎn)化能力結(jié)果1工頻電磁場暴露11周與假暴露組相比SRA0104細胞形態(tài)變圓部分細胞可見異染色體邊集BALBC3T3細胞形態(tài)無明顯改變。射頻電磁場暴露4周SRA0104細胞和BALBC3T3細胞形態(tài)無明顯變化。2MTT結(jié)果顯示與假暴露組相比SRA0104細胞經(jīng)工頻電磁場暴露4周細胞存活力明顯降低P005暴露11周后細胞存活力明顯升高P005。3流式對細胞周期的檢測結(jié)果顯示與假暴露組相比SRA0104細胞經(jīng)工頻電磁場暴露4周處于S期的細胞比例明顯減少P005暴露11周后處于S期的細胞比例增大處于G1期的細胞比例減小P005。4蛋白免疫印跡WESTERNBLOT結(jié)果顯示與假暴露組相比經(jīng)工頻電磁場暴露11周SRA0104細胞增殖細胞核抗原PROLIFERATINGCELLNUCLEARANTIGENPCNA和CYCLIND1蛋白水平明顯增加P5流式對細胞凋亡的檢測結(jié)果顯示與假暴露組相比經(jīng)工頻電磁場暴露11周SRA0104細胞和BALBC3T3細胞凋亡水平均未發(fā)生明顯改變P005。同樣經(jīng)射頻電磁場暴露4周與假暴露組相比兩種細胞的凋亡水平也未發(fā)生明顯改變P005。6劃痕實驗結(jié)果顯示與假暴露組相比SRA0104細胞和BALBC3T3細胞經(jīng)工頻電磁場暴露11周細胞遷移能力無明顯變化P005。7軟瓊脂克隆形成實驗結(jié)果顯示SRA0104細胞和BALBC3T3細胞經(jīng)工頻電磁場暴露11周假暴露組和暴露組均未見克隆形成。8平板克隆形成實驗結(jié)果顯示工頻電磁場暴露11周SRA0104細胞和BALBC3T3細胞未在平板上形成Ⅲ型轉(zhuǎn)化灶即轉(zhuǎn)化細胞克隆。結(jié)論111周工頻電磁場暴露對SRA0104和BALBC3T3細胞的生物學特性可產(chǎn)生不同程度的影響且細胞種類不同工頻電磁場引起的生物學效應也有差異。2PCNA和CYCLIND1參與了工頻電磁場誘導的細胞增殖和周期分布的改變。311周工頻電磁場暴露不能誘導SRA0104和BALBC3T3細胞的惡性轉(zhuǎn)化。44周射頻電磁場暴露對SRA0104和BALBC3T3細胞的增殖、細胞周期分布和凋亡沒有明顯影響。

簡介：南方醫(yī)科大學2010級碩士學位論文人根尖乳頭干細胞與牙周膜干細胞體外生物學特性的比較研究COMOARATIVEANALYSISOFINVITN’?！籓F。CELLSOMOARATLVEOIINVLTROCIIARACTERLSTLCSSTEMCELLS0IFROMAPICALPAPILLASCAPANDPERIODONTALLIGAMENTSTEMCELLSPDLSCS課題來源廣東省科技計劃項目2009806030000620118061300060學位申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院熊華翠¨’、●J陳柯口腔醫(yī)學碩士專業(yè)型碩士研究生南方醫(yī)科大學研究生學院2013年5月9日廣州中文摘要結(jié)果顯示不僅有含血管的牙髓樣組織生成，更重要的是，原有牙本質(zhì)和MTA表面有一層連續(xù)均勻的牙本質(zhì)樣組織生成。表明人SCAP分化為成牙本質(zhì)樣細胞后，進而形成牙本質(zhì)10L?；加懈庵苎谆蚋饽撃[的年輕恒牙中存活的SCAP可能具有促使病變根尖周組織繼續(xù)發(fā)育成形的作用。哺乳動物的牙根發(fā)育是一個長期的過程，包括牙根發(fā)育啟動、牙根延長并建立牙周附著關(guān)系、牙齒萌出直至咬合關(guān)系建立、最后牙根發(fā)育完成、根尖孔閉合。在這一過程中，牙根進一步發(fā)育同時伴有牙周組織形成及牙周附著的建立【L2|，從而使牙根及牙周組織形成一個功能單位被錨定在頜骨上。牙根及牙周組織共同的發(fā)育依賴于發(fā)育期牙根的根端組織持續(xù)增殖并分化【L3|。在結(jié)構(gòu)上，發(fā)育期牙根的根端組織包含雙層上皮細胞構(gòu)成的鞘樣結(jié)構(gòu)，即HERTWIG上皮根鞘HERTWIG’SEPITHELIALROOTSHEATH，HERS，上皮根鞘將其下方的外胚間充質(zhì)組織劃分為牙乳頭及牙囊【141。以往的研究表明牙囊可分化形成牙周膜、牙骨質(zhì)和牙槽骨等牙周組織115171，而牙乳頭形成牙本質(zhì)及牙髓‘71，HERTWIG上皮根鞘則作為牙根形成的誘導者和調(diào)節(jié)者，調(diào)節(jié)牙根大小、形狀和牙根數(shù)【】4|。學者發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)牙根及牙周組織發(fā)育的信號分子，如BMP、同源異型盒基因家族MSX和SHH、FGF、GDF均定位于發(fā)育期的根端組織【18。21】。推測可能通過細胞．細胞及細胞．基質(zhì)問的相互作用并由此產(chǎn)生的信號分子使牙根和牙周組織形成細胞的前體細胞分化，從而促成牙根和牙周組織的形態(tài)發(fā)生。牙齒萌出前，牙囊包圍著成釉器與牙乳頭組織。然而在牙齒萌出后，牙囊僅居于發(fā)育期牙根根端，與牙乳頭相連，兩種組織間失去了牙胚發(fā)育早期所存在的組織學分界?？紤]到牙根、牙周組織在發(fā)育上的同步性以及二者功能上的完整性，學者將發(fā)育期的牙根根端組織命名為“根端發(fā)育復合體”DEVELOPINGAPICALCOMPLEX，DAC四】。學者將SD大鼠DAC與陶瓷化骨混合后，移植到大鼠腎包膜下，4W后可見牙本質(zhì)、牙骨質(zhì)、牙周膜及骨樣組織形成。由此推測DAC在牙根發(fā)育時期，不僅繼續(xù)形成牙根，同時也形成牙周組織，以建立結(jié)構(gòu)完整的牙根／牙周復合體，從而行使咀嚼功能【22】。學者利用小型豬動物模型，外科手術(shù)去除牙根發(fā)育初期的牙乳頭后，盡管牙髓組織完整，但牙根停止發(fā)育；相比之下，含有牙乳頭的其它牙根生長和發(fā)育均正LI

簡介：腫瘤干細胞是指在腫瘤中組織少量存在的一群具有自我更新和分化潛能的腫瘤細胞。先后急性髓性白血病、乳腺癌、腦癌、腸癌、黑色素瘤等多種腫瘤中發(fā)現(xiàn)了腫瘤干細胞，該細胞亞群是腫瘤發(fā)生、復發(fā)、轉(zhuǎn)移的根源，為腫瘤的診斷和治療提供了新靶點。腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)常見的腫瘤類型，惡性程度高、術(shù)后易復發(fā)、病人預后差。2003年，SINGH等首次發(fā)現(xiàn)了腦瘤干細胞，并將CD133分子作為腦瘤干細胞特異性的標志分子。此后，諸多研究表明CD133腦膠質(zhì)瘤干細胞與腫瘤的分級預后、血管形成、高度耐藥性、放化療耐受等許多惡性行為有關(guān)，但CD133分子具體的生物學功能和作用機制還有待深入研究。鑒此，本研究通過基因轉(zhuǎn)染的方法構(gòu)建了一株穩(wěn)定表達CD133分子的腦膠質(zhì)瘤細胞株，并對其生長、細胞周期、神經(jīng)球形成、干細胞相關(guān)基因表達、裸鼠體內(nèi)致瘤性等生物學性質(zhì)進行了分析。第一部分人CD133基因轉(zhuǎn)染腦膠質(zhì)瘤細胞株的建立【目的】構(gòu)建穩(wěn)定表達人CD133分子的腦膠質(zhì)瘤細胞株?！痉椒ā繕?gòu)建含人CD133全長CDNA的逆轉(zhuǎn)錄病毒表達載體，采用脂質(zhì)體法將重組質(zhì)粒及其輔助載體導入293T細胞包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒，進而感染腦膠質(zhì)瘤細胞株U251，ZEOCIN加壓篩選，流式細胞術(shù)、細胞免疫化學及REALTIMEPCR檢測CD133分子的表達；同時構(gòu)建PEGZTERM空載體轉(zhuǎn)染的對照細胞株U251MOCK。【結(jié)果】成功構(gòu)建高表達CD133分子的腦膠質(zhì)瘤細胞株U251CD133?！窘Y(jié)論】成功構(gòu)建了高表達CD133分子的腦膠質(zhì)瘤細胞株，為CD133分子的生物學作用研究提供了良好工具。第二部分CD133分子轉(zhuǎn)染對腦膠質(zhì)瘤細胞生物學行為的作用研究【目的】研究CD133分子對腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖、遷移、細胞周期、干細胞相關(guān)基因的表達、體內(nèi)致瘤性等生物學特性的影響。【方法】以第一部分構(gòu)建的U251CD133及U251MOCK細胞株為研究模型，利用細胞計數(shù)、神經(jīng)球形成實驗及PI染色法檢測CD133分子對腦膠質(zhì)瘤細胞在體外增殖、神經(jīng)球形成能力及細胞周期的影響；REALTIMEPCR檢測CD133基因轉(zhuǎn)染細胞株干細胞相關(guān)基因的表達；裸鼠皮下成瘤法檢測CD133分子對腦膠質(zhì)瘤細胞的體內(nèi)致瘤性的影響?！窘Y(jié)果】1在有血清培養(yǎng)條件下，人CD133分子對腦膠質(zhì)瘤細胞株U251的細胞增殖并無影響；但在無血清神經(jīng)干細胞培養(yǎng)條件下可以促進腦膠質(zhì)瘤細胞神經(jīng)球的形成；2與對照組相比，CD133基因轉(zhuǎn)染細胞株S期細胞比例明顯增加；3CD133分子促進腦膠質(zhì)瘤細胞株不同程度上調(diào)干細胞相關(guān)基因的表達；4CD133分子可明顯增強腦膠質(zhì)瘤細胞的體內(nèi)致瘤性?！窘Y(jié)論】初步研究表明CD133分子促進腦膠質(zhì)瘤細胞株進入S期；促進腦膠質(zhì)瘤細胞上調(diào)干細胞相關(guān)基因的表達，增強腦膠質(zhì)瘤細胞的神經(jīng)球形成能力和體內(nèi)致瘤性。