細菌感染的防治原則滅菌

1、醫(yī)學微生物學（細菌感染的實驗室診斷及消毒滅菌）,嚴杰，教授／醫(yī)學博士Department of Medical Microbiology and ParasitologyZhejiang University School of MedicineHangzhou, P.R. China,標本的采集與送檢： （1）采集標本應注意無菌操作，盡量避免雜菌污染。 （2）根據(jù)患者病程、細菌在體內分布及從人體排出途徑的不同，

2、采集相應的標本。一般情況下，應在病變最明顯部位采集標本。 （3）使用抗生素之前采集標本，否則應在分離培養(yǎng)時加入藥物拮抗劑。采集標本時不可用消毒劑，必要時可用生理鹽水沖洗，擦干后取材。 （4） 標本必須新鮮，采集后及早送檢。在送檢過程中，除少數(shù)不耐寒的腦膜炎球菌等細菌需保溫外，多數(shù)菌的標本均需冷藏送運。 （5）檢測特異性抗體時盡量采取急性期與恢復期雙份血清。第一份盡可能在發(fā)病后立即采取，第二份在發(fā)病后2～3周采取。

3、血清標本放4℃或-20℃保存，試驗前血清標本56℃處理30分鐘以滅活補體。,細菌感染的實驗室診斷,標本染料、熒光染色后直接顯微鏡檢查。細菌的分離培養(yǎng)與鑒定： 菌落 (colony)：采用分離劃線接種法將細菌臨床標本接種于固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)后出現(xiàn)肉眼可見、單個細菌分裂繁殖形成的細菌集落 (純種細菌)。 不同細菌大小、形狀、顏色、氣味、透明度、表面光滑或粗糙、濕潤或干燥、邊緣整齊或不整齊

4、、溶血情況等均可能有所不同，有助于鑒定細菌。 染色鏡檢、 生化試驗、血清學試驗(已知抗體測抗原) 藥物敏感試驗：選擇敏感抗生素。,細菌標本常規(guī)病原學檢查,多聚酶鏈反應 (polymerase chain reaction，PCR)：提取細菌臨床標本總DNA或RNA，采用16 S RNA編碼基因或其他靶基因特異性引物對進行PCR或RT-PCR擴增，反應產(chǎn)物用溴乙錠染色的瓊脂糖凝膠電泳觀察，目前多采用封閉式實時熒

5、光定量PCR或RT-PCR檢測。PCR優(yōu)點與缺點：優(yōu)點是快速、敏感、特異，缺點是不能獲得活菌。,細菌標本分子生物學檢查：PCR/RT-PCR,血清學檢查 (serological examination)：病原菌侵入人體可刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性血清抗體，抗體水平可隨細菌感染過程逐漸升高價升高。用已知的抗原檢測病人體液（主要為血清）中有無相應抗體及其效價的動態(tài)變化，可作為某些感染性疾病的診斷或輔助診斷。多數(shù)血清學診斷通常采取患者雙

6、份血清，一份在疾病的急性期，另一份在恢復期（一般為2～6周后），當?shù)诙菘贵w效價較第一份升高4倍及以上才有診斷價值。 單份血清檢查結果根據(jù)該病效價判斷標準進行判定。IgM出現(xiàn)早、消失快，可用于血清學早期診斷。方法：ELISA、直接或間接凝集試驗、中和試驗等。,血清學檢查或診斷,人工主動免疫：接種疫苗，是預防傳染病常用方法，免疫力出現(xiàn)慢但維持時間長。疫苗種類：目前使用的有全菌死疫苗、減毒活疫苗 、基因工程疫苗、類毒素疫苗。人工

7、被動免疫：主要是抗毒素 (外毒素中和抗體)。免疫力出現(xiàn)快但維持時間短?？苟舅厥莿游镅澹褂们白銎ぴ嚪乐拱l(fā)生過敏反應。抗生素治療：青霉素類、頭孢菌素類、大環(huán)內酯類、喹諾酮類、四環(huán)素類。細菌對抗生素可產(chǎn)生耐藥性，臨床使用抗生素時應遵守如下原則：①選擇敏感抗生素；②劑量合適；③長期使用時交替用藥；④聯(lián)合用藥。,細菌感染的防治原則,滅菌 (sterilization)：殺滅所有微生物的方法，包括病原微生物、非病原微生物及芽胞。消毒 (di

8、sinfection)：殺滅病原微生物的方法，但不一定能殺死非病原微生物，一般不能殺滅芽胞。消毒劑。抑菌 (bacteriostasis)：抑制體內或體外細菌生長繁殖的方法。如抗生素。 防腐 (antisepsis)：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法，細菌一般不死亡。防腐劑。無菌 (asepsis) ：不存在活的微生物。無菌操作：防止微生物進入人體或物品的操作技術。,消毒與滅菌,干烤：用干烤箱160℃加熱2 h可達到滅菌效果

9、，適用于耐高溫的玻璃器皿等物品。高壓蒸汽滅菌法：使用高壓蒸汽滅菌器121℃加熱15～20 min可達到滅菌效果。煮沸法：細菌繁殖體在沸水中5 min可被殺死。巴氏消毒法：61.1-62.8℃加熱30 min和72℃加熱15 s，目前主要用于酒類、疫苗的消毒。,常用消毒與滅菌法,紫外線消毒法：以265～266 nm紫外線能使DNA一條鏈中相鄰的兩個胸腺嘧啶形成二聚體，干擾了DNA復制與轉錄而導致細菌死亡。紫外線穿透力弱，僅用于空

10、氣和物體表面消毒。,常用消毒與滅菌法,電離輻射 ：常用60Co對一次性醫(yī)用塑料制品進行滅菌，也可用于食品、藥品和生物制品的滅菌（工業(yè)用）。濾過除菌法 ：0.22 µm孔徑濾器可除去細菌，0.10 µm孔徑可除去支原體。低溫抑菌法：抑菌不殺菌。真空冷凍干燥法 ：細菌懸液凍結，負壓使水分升華后干燥，可長期保存菌種?；瘜W消毒劑：75%乙醇，其他濃度高、時間長、效果好。,常用消毒與滅菌法,生物安全：病原微生物危害等級