畢業(yè)論文----辣椒紅色素的提取

1、<p><b>　　畢業(yè)設(shè)計（論文）</b></p><p>　　題 目 辣椒紅色素的提取 </p><p>　　院 系 </p><p>　　專 業(yè) </p>

2、<p>　　年 級 </p><p>　　學(xué)生姓名 </p><p>　　學(xué)生學(xué)號 </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p&g

3、t;<p>　　完成畢業(yè)設(shè)計（論文）時間 年 月</p><p><b>　　目錄</b></p><p><b>　　題目1</b></p><p><b>　　摘要及關(guān)鍵詞1</b></p><p><b>　　1 前言1&

4、lt;/b></p><p><b>　　1.1辣椒概況1</b></p><p>　　1.2辣椒紅色素2</p><p><b>　　1.3實驗?zāi)康?</b></p><p>　　2 材料和方法5</p><p><b>　　2.1主要材料5&l

5、t;/b></p><p><b>　　2.2實驗方法6</b></p><p>　　3 結(jié)果與分析7</p><p>　　3.1辣椒紅色素最佳吸收峰的確定7</p><p>　　3.2 辣椒紅色素標(biāo)準(zhǔn)曲線8</p><p>　　3.3辣椒紅色素提取結(jié)果測定8</p>

6、<p>　　3.4試驗偏差分析9</p><p><b>　　4 結(jié)論10</b></p><p><b>　　5 致謝10</b></p><p>　　6 參考文獻10</p><p><b>　　辣椒紅色素的提取</b></p>&

7、lt;p><b>　　王煉</b></p><p>　?。ㄖ貞c三峽學(xué)院生命科學(xué)與工程學(xué)院07級生物技術(shù)專業(yè)，重慶萬州 404000）</p><p>　　【摘要】 辣椒紅色素是天然紅色素的一種,可從干紅辣椒中提取。本實驗對有機溶劑從干紅辣椒中提取辣椒紅色素進行了研究，并利用分光光度計分別測定以丙酮、四氯化碳、乙醚、石油醚為萃取劑在不同時間、不同溫度下萃取的辣椒

8、紅色素的含量。觀察并統(tǒng)實驗測量結(jié)果,結(jié)果表明：總體上四氯化碳、石油醚、乙醚和丙酮提取辣椒紅色素的產(chǎn)率隨溫度的增加而增加，但乙醚例外。石油醚在60℃3小時內(nèi)對辣椒進行辣椒紅色素提取的效果最好。 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】 辣椒 辣椒紅色素 吸光度 </p><p><b>　　1 文獻綜述</b></p><p><b>　

9、　1.1辣椒概況</b></p><p>　　辣椒，又叫番椒、海椒、辣子、辣角、秦椒等，是一種茄科辣椒屬植物。辣椒屬為一年或多年生草本植物。果實通常成圓錐形或長圓形，未成熟時呈綠色，成熟后變成鮮紅色、黃色或紫色，以紅色最為常見。辣椒的果實因果皮含有辣椒素而有辣味。作為佐料能增進食欲。辣椒中維生素C的含量在蔬菜中居第一位。</p><p>　　1.1.1 辣椒分類地位及生物學(xué)特點

10、</p><p>　　辣椒是一種茄科辣椒屬植物，為一年生草本植物，原產(chǎn)于南美和墨西哥等中美洲熱帶地區(qū)及西印度群島等熱帶地區(qū)。單葉互生，葉片卵圓形；花萼杯狀，花白色；果實通常成圓錐形或長圓形，向有朝天或向下之分，未成熟時呈綠色，成熟后變成醬色、鮮紅色、黃色或紫色，以紅色最為常見。種子腎形、淡黃色，胚珠彎曲。辣椒的果實因果皮含有辣椒素而有辣味。</p><p>　　辣椒的生長與發(fā)育因地不同，在

11、長江沿線及華北各地都是一年生植物，每年冬季枯死。在熱帶及亞熱帶地區(qū)如海南、廣西、廣東及云南的南部，可以露地越冬，二年春暖又可發(fā)生新芽。在四川、貴州、江西等地一帶，冬季利用保溫措施防凍，也可以老根越冬。老根越冬的辣椒，因其結(jié)果早于新苗，在保護地種植技術(shù)普及以前，它是一種較能獲得經(jīng)濟效益的辣椒。</p><p>　　按辣椒果實特征分為五個變種：</p><p><b>　?。?） 長

12、角椒類 </b></p><p>　　長角椒類辣椒株型矮小至高大，分枝性強，葉片較小或中等。果實一般下垂，為長角形，微彎曲似牛角、羊角、線形。一般具辛辣味，果肉薄或厚，其中肉薄辛辣味強的主要供干制、腌漬或制辣椒醬；肉厚，辛辣味適中的供鮮食。個別品種也有果實朝天的。其產(chǎn)量較高，栽培最為普遍。我國著名的內(nèi)外銷辣椒干均屬這一變種，如河南永城縣大羊角、線椒。陜西牛角椒，耀縣線辣子，四川二金條，山西代縣長辣椒、

13、福建寧化牛角椒、云南邱北辣椒等。適合鮮食的有湖南長牛角椒、伏地尖、杭州雞爪椒。 </p><p><b>　?。?）甜柿椒類 </b></p><p>　　甜柿椒又稱柿子椒、甜椒或燈籠椒。味甜或具輕辣味，主要適于鮮食。植株中等或矮小，分枝性弱。葉片較大，卵圓形或橢圓形。果實碩大、圓球隊扁圓形、短圓、錘形。果面常具3－4條縱溝。果肉肥厚，大者單果重達200克以上，結(jié)果數(shù)

14、較少。耐熱與抗病性不及辣味品種。冷涼地區(qū)栽培比炎熱地區(qū)的產(chǎn)量高。全國著名品種有上海茄門甜椒，吉林三道筋、四方頭甜椒。 </p><p><b>　?。?）簇生椒 </b></p><p>　　簇生椒株型中等或較高，分枝性不強，葉片較長大，果實簇生。每簇3－5個至7－8個。果梗朝天或下垂，果色深紅、果肉薄、辛辣味強、油分高、晚熟、耐熱、產(chǎn)量低，主要供干制調(diào)味，如四川七星

15、椒、陜西線椒、湖南線椒。 </p><p><b>　?。?）櫻桃椒類 </b></p><p>　　櫻桃椒株型中等或矮小，分枝性強，葉片較小，卵圓或橢圓形。果實朝天或斜生，圓形或圓錘形，小如櫻桃。果色有紅紫、黃色，果肉薄，種子多，辛辣味強，云貴一帶較多。</p><p><b>　?。?） 圓錘椒類 </b></p

16、><p>　　圓錘椒株型中等或矮小，葉片中等大小，卵圓，果實呈圓錘形或短圓柱形，果梗朝天或下垂，果肉較厚，辣味中等，主要鮮食青果，如南京早椒、成都二斧頭、昆明牛角椒等。 </p><p>　　1.1.2 辣椒有效成分及主要功效</p><p>　　我國辣椒消費結(jié)構(gòu)以各種食用鮮椒為主，消費量最大;其次是作為香辛料的干椒消費，主要為食用辣椒干及辣椒粉等。據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，辣椒富含

17、辣椒堿、二氫辣椒堿、辣椒紅素、辣椒玉紅素、β-胡蘿卜素、碳水化合物、大量維生素C以及鈣、磷等。辣椒紅素、辣椒玉紅素已被FAO、英國、日本、EEC和WHO 等審定為無限性使用的天然食品添加劑，辣椒中呈辣味的物質(zhì)是辣椒素（Capsaincin），也叫辣椒堿，它在醫(yī)療保健方面具有獨特的生物活性，其純品為單斜長方形片狀無色結(jié)晶，溶點65℃，沸點在210-220℃，分子式 ：C18H27N O3。國外臨床應(yīng)用研究表明：辣椒堿對帶狀庖疹后遺神經(jīng)痛、

18、三叉神經(jīng)痛、糖尿病性神經(jīng)痛、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、禿發(fā)有顯著療效。美國科研人員將辣椒堿應(yīng)用于消炎、鎮(zhèn)痛、麻醉和戒毒方面，辣椒堿還可以抑制惡性腫瘤的發(fā)生，并有治療皮膚病、減肥的特殊功效。由于辣椒堿的刺激性特點，目前還主要用作止痛劑、戒毒鎮(zhèn)痛劑、止癢劑、健胃消食劑、預(yù)防心臟病藥、減肥藥、殺蟲劑、船舶防銹防腐以及軍事用途等。辣椒的成分非常復(fù)雜，其顯色物質(zhì)主要是辣椒色素。辣椒果皮含有0.2％～0.5％的胡蘿卜色烯類色素，其中辣椒紅&l

19、t;/p><p><b>　　1.2辣椒紅色素</b></p><p>　　1.2.1 辣椒紅色素</p><p>　　辣椒紅色素別名辣椒紅、辣椒色素、椒紅素、辣紅素，，是一種存在于成熟紅辣椒果實中的四萜類橙紅色色素，屬類胡蘿卜素類色素。辣椒紅色素是辣椒的主要顯色物質(zhì)，其中主要含辣椒紅素和辣椒玉紅素，具有辣椒香氣味的深紅色粘性油狀液體，色澤鮮艷，著

20、色力強，耐光、熱、酸、堿，且不受金屬離子影響；溶于油脂和乙醇。</p><p>　　1.2.2辣椒紅色素結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)</p><p>　　純的辣椒紅色素是有光澤的深紅色針狀結(jié)晶，呈橙紅、橙黃色調(diào)，屬類胡蘿卜素類色素，主要成分及含量為：辣椒紅素約50％ ，辣椒玉紅素約8.3％，玉米黃質(zhì)約14％，β-胡蘿卜素約13.9％，隱辣椒質(zhì)約5.5％，此外還有辣椒黃素、辣椒色素脂肪酸酯、辣椒紅素乙二酸

21、酯、辣椒紅素二軟脂酸酯等，可用作食用紅色色素，未酯化辣椒紅素的生物利用率高于酯化辣椒紅素。辣椒果實在成熟過程的不同時期，各種類胡蘿卜素（β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)、辣椒紅素）含量不同，其中在其生長過程的第9周時（自開花起計算），辣椒紅素的含量為19 000 μg／100 g，占總類胡蘿卜素的60%。純的辣椒紅色素熔點為175 ℃左右，易溶于極性大的有機溶劑，如：丙酮、三氯甲烷、植物油、乙醚，溶于乙醇，不溶于甘油和水。與濃無機酸作用顯

22、藍色。具有較好的分散性，在p H為3～12，溫度在25～70℃較為穩(wěn)定，在糖類溶液中穩(wěn)定性較好，耐還原性好，耐氧化性差，金屬離子K+、C a2+、N a+、M g2+、Z n2+對其無影響，可以與這些添加劑一起使用，而A l3+、F e3+對其影響不大，C u2+、F e2+對其有顯著影響，使用時應(yīng)注意避免</p><p>　　辣椒紅素( capsan thin) (C40H56O3 = 584.85)</

23、p><p>　　辣椒玉紅素( capsorubin) (C40H56O4 = 600.85)</p><p>　　玉米黃質(zhì)( zeaxan thin)</p><p>　　β - 胡蘿卜素(β- carotenone)</p><p>　　1.2.3 辣椒紅色素的應(yīng)用及前景</p><p>　　辣椒紅素是天然紅色素的一種，

24、可從成熟的茄科紅辣尖椒中提取。作為一種天然著色劑,辣椒紅色素不僅色澤鮮艷,色價高,著色力強,保色效果好,安全無毒，而且具有抗癌美容的功效，因此被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品、肉類、糕點、色拉罐頭、飲料等各類食品的著色,還可以有效地延長仿真食品的貨架期;而且安全性高,具有營養(yǎng)保健作用,并被現(xiàn)代科學(xué)證明有抗癌、抗輻射等功能,還應(yīng)用于化妝品和兒童玩具等領(lǐng)域?，F(xiàn)已成為國內(nèi)外食品和食品添加劑行業(yè)開發(fā)研究和消費關(guān)注的熱點之一。</p><p

25、>　　由于市場前景較好,需求量逐年上升,各國競相開發(fā)生產(chǎn)。我國是一個辣椒資源相當(dāng)豐富的國家,幾乎全國各地都有種植,特別是山東、河北、四川、山西、河南、云南、廣西等省區(qū)均有大面積種植,年總產(chǎn)量也難以精確統(tǒng)計。由此可知我國辣椒產(chǎn)量豐富、價格低廉，所以開發(fā)應(yīng)用辣椒紅色素具有很大的經(jīng)濟效益和廣闊的國內(nèi)外市場前景。</p><p>　　1.2.4 現(xiàn)有的辣椒紅色素提取方法</p><p>　　

26、目前辣椒紅色素的提取方法大致可歸為油溶法, 溶劑提取法, 超臨界CO2流體萃取法, 超聲波溶劑提取法, 溶劑微波提取法和酶法提取六類。其中,前兩種為常規(guī)方法。</p><p><b>　?。?） 油溶法</b></p><p>　　油溶法是在常溫下呈液狀的食用油如棉籽油、豆油、菜籽油等浸漬辣椒果皮或干辣椒粉，使辣椒紅素溶解在食用油中, 然后通過一定方法從油中提取出辣椒

27、紅素的一種方法。用油溶法提取辣椒紅色素存在油與色素分離困難的缺點, 難以得到濃稠的色素, 現(xiàn)已基本停止使用。</p><p><b>　?。?） 溶劑法</b></p><p>　　溶劑法是將去除壞椒雜質(zhì)的干辣椒磨成粉后, 用有機溶劑如丙酮、乙醇、乙醚、氯仿、二氯乙烷、正己烷等進行浸提, 將浸提液濃縮得到粗辣椒油樹脂,減壓蒸餾得產(chǎn)品。但此法所得產(chǎn)品含雜質(zhì)多, 同時還帶

28、有辣椒特有的異味, 使其應(yīng)用范圍大大減小, 為此,需采用多種改進方法以消除其雜質(zhì)和異味。</p><p>　?。?） 超臨界CO2 流體萃取法</p><p>　　目前,國內(nèi)外已經(jīng)開始研究應(yīng)用超臨界CO2 流體技術(shù)萃取辣椒紅色素。超臨界流體萃取技術(shù)是以超臨界狀態(tài)下的流體作為溶劑,利用該狀態(tài)下流體所具有的高滲透能力和高溶解能力萃取分離混合物的過程。超臨界流體的溶解能力隨體系參數(shù)(溫度和壓力)

29、而發(fā)生連續(xù)性變化,因此通過改變操作條件(稍微提高溫度或降低壓力)便可方便地調(diào)節(jié)組分的溶解度和萃取的選擇性。此方法生產(chǎn)的辣椒紅色素,色價達到220。</p><p>　　（4）超聲波溶劑提取法</p><p>　　辣椒粉是片狀凹凸不平的纖維組織結(jié)構(gòu),辣椒素及其他脂溶性成分存在于纖維組織之內(nèi),采用傳統(tǒng)的有機溶劑提取法需要耗費大量有機溶劑和時間才能提取完全。超聲提取過程產(chǎn)生強烈的振動、空化、攪拌

30、,與傳統(tǒng)提取方式比較具有收率高、生產(chǎn)周期短、無需加熱、有效成分不被破壞等優(yōu)點。</p><p>　?。?） 溶劑微波提取法</p><p>　　微波是電磁波的一種，其波長為1mm～1m,其波長介于短波和遠(yuǎn)紅外之間，故稱微波。將微波應(yīng)用于提取，其對物質(zhì)的作用表現(xiàn)在：當(dāng)被提取物溶媒共同處于微波場下時，目標(biāo)組分分子受到高頻電磁波的作用，產(chǎn)生劇烈振蕩，分子本身獲得了巨大的能量以掙脫周邊環(huán)境的束縛，

31、當(dāng)環(huán)境存在一定的濃度差時，可以在非常短的時間內(nèi)實現(xiàn)分子自內(nèi)向外的遷移達到一個平衡點，這就是微波可以短時間內(nèi)實現(xiàn)提取色素的原因。</p><p><b>　?。?） 酶法提取</b></p><p>　　周旭章等研究提出醇-酶脫脂二步法精制辣椒紅色素粗制品的新工藝,脫辣最佳工藝條件:溫度為室溫;脫辣劑(乙醇)濃度70% ,投料比1∶215～1∶3,萃取次數(shù)3～4次。脫脂

32、劑(Mix酶)濃度10～15mg/L,反應(yīng)時間50min。邵學(xué)軍等實驗結(jié)果,用NaOH溶液浸泡辣椒粉脫出辣素的最佳操作條件為:辣椒粉( g) 與15% NaOH 溶液(mL ) 之比為1 ∶9, 90℃浸泡1.5h。</p><p>　　1.2.5 影響辣椒紅色素穩(wěn)定性的因素</p><p>　　辣椒紅色素在被提取前是貯存在辣椒果實的完整細(xì)胞組織中,由于受到細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)某些成分的保護并形

33、成脂類,對光熱等具有較高的穩(wěn)定性。但當(dāng)辣椒紅色素被提取出來以后,由于失去了細(xì)胞膜等的生物保護機制,各種外部條件對其均可產(chǎn)生不同的影響,破壞其穩(wěn)定性。</p><p>　　辣椒紅色素穩(wěn)定性是指其在各種可能的環(huán)境中是否保持原有的色澤，即是否褪色或變色。近年來，國內(nèi)外的各種研究表明影響辣椒紅色素穩(wěn)定性的因素大致有以下幾類。</p><p>　?。?） 光對辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響</p>

34、;<p>　　國內(nèi)外的各種研究表明辣椒紅色素的耐光性較差在油性介質(zhì)中避光保存的辣椒紅色素是比較穩(wěn)定的。配制濃度為01005%的丙酮色素溶液,溶液呈橙紅色,在色素在370～530nm之間有強烈的吸收峰,最大吸收波長為470nm。根據(jù)張志強的實驗結(jié)果,暗室和室內(nèi)光線下,色素?zé)o褪色現(xiàn)象,且損失較小, 6天后仍有96%以上保留,在日光下不到半天的時間,色素幾乎損失殆盡,幾乎為無色,紫外光對色素有明顯的影響, 3天左右?guī)缀醵紦p失。&

35、lt;/p><p>　?。?） 溫度對辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響</p><p>　　據(jù)周國海的研究結(jié)果,溫度對辣椒紅色素有一定影響。溫度越高，辣椒紅色素?fù)p失越多。主要在70℃以上加熱損失較明顯。辣椒紅色素在25～80℃時穩(wěn)定性較好, 色素變化不大，當(dāng)溫度升高到80～100℃時,穩(wěn)定性下降,當(dāng)超過100℃時,色素極不穩(wěn)定,所以提取過程中應(yīng)避免長時間處于80℃以上的高溫。</p>&l

36、t;p>　?。?） 金屬離子對辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響</p><p>　　銅離子、亞鐵離子對辣椒紅色素有明顯的破壞作用,而鋁離子在濃度較高,即大于400mg/ kg時,對色素的色價有影響,而鐵離子、鉀離子、鈉離子、鎂離子等對色素的影響均可以忽略。</p><p>　?。?） 氧化劑對辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響</p><p>　　張志強等將不同濃度(0.0、0.1

37、、0.2、0.3、0.5mol /L )體積分?jǐn)?shù)為30%的H2O2 加到已配好的色素溶液中,定容至10mL,搖勻470nm 處測定其吸光度,靜置2h后,再次測定其吸光度。比較兩次色素的損失率發(fā)現(xiàn),辣椒紅素對氧化劑不穩(wěn)定,濃度越高穩(wěn)定性越差。因此在辣椒紅色素提取過程中要避免與氧化劑接觸。</p><p>　?。?）空氣中的氧對辣椒紅色素穩(wěn)定性的影響</p><p>　　夏楓耿等分別向液體及固

38、體辣椒紅色素中以2.33mL / s的速度通入空氣2h,測定吸光度,發(fā)現(xiàn):液體辣椒紅色素對空氣中氧比較敏感,接觸氧氣褪色較快,而固體紅色素因為受到包埋保護,對氧氣不太敏感。</p><p><b>　　1.3實驗?zāi)康?</b></p><p>　　通過不同的萃取劑（石油醚、乙醚、四氯化碳、丙酮）在不同的萃取溫度和萃取時間內(nèi)對辣椒紅色素進行萃取，將萃取的辣椒紅色素用分光

39、光度計進行比色測定，從而確定萃取量，進而對萃取結(jié)果進行比較和評價，得到這幾種有機溶劑中萃取辣椒紅色素的最佳溶劑及最佳方案。</p><p><b>　　2 實驗部分</b></p><p>　　2.1主要材料 </p><p>　　2.1.1 辣椒：貴州椒（貴州產(chǎn)，萬州市售）</p><p><b>　　

40、2.1.2 試劑：</b></p><p>　　四氯化碳：國產(chǎn)分析純試劑</p><p>　　石油醚：國產(chǎn)分析純試劑</p><p>　　乙醚：國產(chǎn)分析純試劑</p><p>　　丙酮 ：國產(chǎn)分析純試劑</p><p>　　乙醇（95%）：國產(chǎn)分析純試劑</p><p>　　NaOH

41、溶液：國產(chǎn)分析純試劑</p><p>　　2.1.3 試驗器材</p><p>　　JJ型精密電子天平：美國雙杰兄弟（集團）有限公司</p><p>　　HH.S精密恒溫水浴鍋：江蘇金壇市醫(yī)療儀器廠</p><p>　　722型可見光分光光度計：上海欣茂儀器有限公司</p><p>　　A/B氣流烘干器：中外合資深圳天

42、南海北有限公司</p><p>　　量筒100ml 三角燒瓶100ml 量杯50ml 溫度計 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 容量瓶25mL 容量瓶100mL ph試紙</p><p><b>　　2.2實驗方法</b></p><p>　　2.2.1 辣椒紅色素對照品溶液的制備 </p><p>　　準(zhǔn)確稱取一定量的辣

43、椒紅色素對照品, 用丙酮溶解并定容在100mL容量瓶中, 配制成濃度約300μg/mL的對照品溶液，備用。</p><p>　　2.2.2 最佳吸收波長的確定 </p><p>　　準(zhǔn)確移取5.00mL辣椒紅色素對照品溶液, 用丙酮定容于25mL容量瓶中, 在波長為400～530nm之間進行掃描, 測定吸收曲線, 確定最佳吸收波長。</p><p>　　2.2.3

44、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作</p><p>　　分別移取辣椒紅色素對照品溶液2.00mL、3.00mL、5.00mL、6.00mL、7.00mL、9.00mL、10.00mL</p><p>　　于25mL容量瓶中, 用丙酮定容, 在最佳波長處測各份溶液的吸光度, 根據(jù)實驗結(jié)果以A- c作圖繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。</p><p>　　2.2.4 供試品的制備</p>&

45、lt;p>　　本實驗采用有機溶劑提取辣椒紅色素。稱取一定質(zhì)量的辣椒粉,在一定溫度（分別為30℃、40℃、50℃、60℃）下用有機溶劑（分別為四氯化碳、石油醚、乙醚、丙酮）提取一定時間（分別為1h、2h、3h、4h）,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮提取液,回收有機溶劑,然后將濃縮物置真空干燥箱中至恒質(zhì)量,得到辣椒紅色素粗產(chǎn)品。</p><p>　?。?） 辣椒預(yù)處理　將辣椒去籽切碎,粒度小于15mm ,曬干備用。</p&

46、gt;<p>　?。?）用稀堿處理辣椒皮(除辣) 　稱取粉末狀辣椒若干,置于容器內(nèi)加入濃度為2 %的NaOH溶液,堿液用量為辣椒果品原重的10～15 倍. 將容器放入恒溫器內(nèi),在55 ℃下恒溫2h 左右,保溫間歇攪拌,使辣椒碎片全浸在堿溶液中,然后過濾并將辣椒果皮用蒸餾水沖洗至p H 值為7 左右,取出果皮,晾干備用。</p><p>　　（3） 提取紅色素(索式提取法) 　將若干并經(jīng)過除辣處理后的

47、辣椒果皮用濾紙或濾布包好,裝入索式提取器中,從上端加入兩倍的提取液(四氯化碳、石油醚、乙醚、丙酮)，注意提取液的高度不要超過虹吸管上端，加熱提取。</p><p>　?。?） 濃縮及干燥　將提取液初濃縮，移置干燥箱內(nèi)，在50℃下干燥120min，即得紅色素產(chǎn)品。</p><p>　　2.2.5待測樣品中辣椒紅色素含量的測定</p><p>　　取提取的一定量的粗產(chǎn)品

48、，定容后將供試品溶液加入比色皿中，同時做三個重復(fù)，以空白試劑為參比，按上述標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定法，分別測量其吸光值，計算樣品中辣椒紅色素的含量。</p><p>　　辣椒紅色素的產(chǎn)率（%）=辣椒紅色素的質(zhì)量/辣椒粉末的質(zhì)量×100%</p><p><b>　　2.3結(jié)果與分析</b></p><p>　　2.3.1辣椒紅色素最佳吸收峰的確

49、定 </p><p>　　稱取一定量得辣椒粉，在60℃下采用丙酮回流提取。取一定量得提取液，以丙酮作空白，用分光光度計進行420～500nm可見光區(qū)掃描，結(jié)果見圖1</p><p>　　圖1 辣椒紅色素吸光度隨波長變化曲線</p><p>　　由圖1可知，辣椒紅色素在丙酮溶液中的最佳吸收波長460 nm。</p><p>　　2.3.2 辣

50、椒紅色素標(biāo)準(zhǔn)曲線</p><p>　　用紫外光分光光度計，用丙酮溶解定容, 以丙酮作空白,在最佳波長460 nm處測對照品溶液的吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)，辣椒紅色素為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖2.</p><p>　　圖1 辣椒紅色素標(biāo)準(zhǔn)工作曲線</p><p>　　根據(jù)試驗結(jié)果, 得線性回歸方程為A=6063C-0.0014(R=0.9997), 辣椒紅色素的線形

51、范圍為24～120μg/mL。</p><p>　　2.3.3辣椒紅色素提取結(jié)果測定</p><p>　　將在不同條件下得到的辣椒紅色素粗產(chǎn)品。用丙酮溶解定容, 以丙酮作空白, 在最佳吸</p><p>　　收波長460 nm 測其A 值。</p><p>　　取備好的辣椒粉4份（每份6g）,與萃取劑按1:4的比例分別加入不同的萃取劑在三角燒

52、瓶中混合均勻，在30℃水浴鍋中加熱萃取，分別萃取1小時、2小時、3小時、4小時后取萃液，50 ℃減壓蒸餾,油水混合物分離,用分光光度計法在最佳吸收波長460nm處測定得其吸光度，計算結(jié)果如表一所示.</p><p>　　表一 在30℃時不同試劑在不同時間內(nèi)提取辣椒紅色素的吸光度測量結(jié)果</p><p>　　取備好的辣椒粉4份（每份6g）,與萃取劑按1∶2的比例分別加入不同的萃取劑在三角燒瓶

53、中混合均勻，在30℃水浴加熱鍋中加熱萃取，分別萃取1小時、2小時、3小時、4小時后取萃液，50 ℃減壓蒸餾,油水混合物分離,用分光光度計法在最佳吸收波長460nm處測定得其吸光度，結(jié)果如表二所示.</p><p>　　表二 在40℃時不同試劑在不同時間內(nèi)提取辣椒紅色素的測量結(jié)果</p><p>　　取備好的辣椒粉4份（每份6g）,與萃取劑按1∶2的比例分別加入不同的萃取劑在三角燒瓶中混合

54、均勻，在30℃水浴加熱鍋中加熱萃取，分別萃取1小時、2小時、3小時、4小時后取萃液，50 ℃減壓蒸餾,油水混合物分離,用分光光度計法在最佳吸收波長460nm處測定得其吸光度，結(jié)果如表三所示.</p><p>　　表三 在50℃時不同試劑在不同時間內(nèi)提取辣椒紅色素的測量結(jié)果</p><p>　　取備好的辣椒粉4份（每份6g）,與萃取劑按1∶2的比例分別加入不同的萃取劑在三角燒瓶中混合均勻，

55、在30℃水浴加熱鍋中加熱萃取，分別萃取1小時、2小時、3小時、4小時后取萃液，50 ℃減壓蒸餾,油水混合物分離,用分光光度計法在最佳吸收波長460nm處測定得其吸光度，結(jié)果如表四所示.</p><p>　　表四 在60℃時不同試劑在不同時間內(nèi)提取辣椒紅色素的測量結(jié)果</p><p>　　通過表一、表二、表三和表四可以看出：在所設(shè)置的各種梯度試驗結(jié)果中石油醚在60℃3小時內(nèi)對辣椒進行辣椒紅

56、色素提取的效果最好，產(chǎn)率約為4.77%。總體上四氯化碳、石油醚、乙醚和丙酮提取辣椒紅色素的產(chǎn)率隨溫度的增加而增加，但由于乙醚較易揮發(fā)，故從以上四個表中結(jié)果可看出用乙醚進行萃取時，隨溫度升高反而產(chǎn)率越低。另一方面，時間對辣椒紅色素提取的影響在在三小時后影響不大。因此，從表一可知這四種溶液中提取辣椒紅色素效最好的是石油醚，四氯化碳次之，乙醚再次之，丙酮最次。</p><p><b>　　3 誤差分析<

57、;/b></p><p>　　2.3.4試驗偏差分析</p><p>　　溶劑法萃取辣椒紅色素簡單方便，所需設(shè)備簡易，結(jié)果較好，但在測量過程中仍然存在很多偶然性誤差，現(xiàn)誤差分析如下：</p><p>　?。?） 分光光度計讀數(shù)的時候出現(xiàn)數(shù)值不穩(wěn)定，其原因可能有：</p><p>　?、賰x器穩(wěn)定(包括電壓)，光源老化，可以用標(biāo)準(zhǔn)對照來排除

58、。</p><p>　?、跍y量的樣本混合不均勻。</p><p>　?。?） 操作中可以從以下幾點來盡量減少偏差：</p><p>　?、?玻璃儀器要清洗干凈。</p><p><b>　?、诓Ａx器要干燥。</b></p><p>　?、?取量要盡量準(zhǔn)確。</p><p>

59、;　　④作空白對照，減少誤差。</p><p>　?、?作標(biāo)準(zhǔn)曲線及測定樣品時，要將各溶液縱向倒轉(zhuǎn)混合。</p><p><b>　　4 結(jié)論</b></p><p>　　本實驗采用有機溶劑提取辣椒紅色素。應(yīng)用了四氯化碳、石油醚、乙醚和丙酮四種有機溶劑各在不同溫度（30℃、40℃、50℃、60℃），不同時間（1h、2h、3h、4h）下來進行辣

60、椒紅色素的提取。最終得到結(jié)果為：總體上四氯化碳、石油醚、乙醚和丙酮提取辣椒紅色素的產(chǎn)率隨溫度的增加而增加，但乙醚例外。石油醚在60℃3小時內(nèi)對辣椒進行辣椒紅色素提取的效果最好，產(chǎn)率約為4.77%。</p><p><b>　　5 參考文獻</b></p><p>　　[1]吳疆，童應(yīng)開，楊紅澎．生物分離試驗技術(shù)．2009 ：48-53</p><

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