D型產(chǎn)氣莢膜梭菌類毒素疫苗的研制及保護(hù)效果的評(píng)價(jià).pdf

1、D型產(chǎn)氣莢膜梭菌菌主要產(chǎn)生α、ε毒素，可以引起羔羊、綿羊、山羊、牛以及灰鼠的腸毒血癥。該病發(fā)病急、病程短、死亡率高，因此動(dòng)物一旦發(fā)病往往尚未得到有效治療即發(fā)生死亡。因此為了切實(shí)有效的控制本病的傳播，必須采取切實(shí)有效的預(yù)防的措施。目前使用的商用聯(lián)苗注射免疫劑量較大，接種家畜的反應(yīng)較重，而且部分疫苗的免疫效果存在爭(zhēng)議，質(zhì)量需要做進(jìn)一步改進(jìn)，因此研究免疫保護(hù)效果好、無毒副作用的疫苗來預(yù)防本病的發(fā)生是非常必要的。
　　本研究對(duì)D型產(chǎn)氣莢膜

2、梭菌標(biāo)準(zhǔn)菌種(NCTC8346)進(jìn)行復(fù)蘇、增菌、產(chǎn)毒，再用0.22um蔡氏濾器過濾除去菌體得到毒素溶液，然后用甲醛對(duì)毒素進(jìn)行滅活并加入白油佐劑制得D型產(chǎn)氣莢膜梭菌類毒素疫苗;再對(duì)制備的類毒素疫苗進(jìn)行劑型檢查、無菌檢驗(yàn)、安全檢驗(yàn)、有效免疫劑量試驗(yàn)和抗體消長(zhǎng)規(guī)律試驗(yàn)。
　　結(jié)果研究表明，D型產(chǎn)氣莢膜梭菌標(biāo)準(zhǔn)菌株外毒素用終濃度為0.3％甲醛96h即可完全滅活且其抗原性依然良好;對(duì)制備的D型產(chǎn)氣莢膜梭菌類毒素疫苗檢驗(yàn)結(jié)果完全符合符合中華人

3、民共和國(guó)獸用生物制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);攻毒保護(hù)實(shí)驗(yàn)表明，對(duì)綿羊的有效免疫劑量為2ml/只，當(dāng)抗毒素抗體效價(jià)一級(jí)陽性（血清樣品抑制分?jǐn)?shù)大于36.7％時(shí)）可有效地預(yù)防綿羊腸毒血癥的發(fā)生;用制備的類毒素疫苗接種綿羊后從第二周即產(chǎn)生抗毒素，抗體迅速升高，到第八周達(dá)到最高峰為三級(jí)陽性，之后抗體水平開始下降，但是24周時(shí)抗體依然在三級(jí)陽性程度的范圍內(nèi)，因?yàn)?-24周測(cè)得樣品抑制分?jǐn)?shù)大于36.7％，且大部分時(shí)間毒素抗體處于三級(jí)陽性的范圍內(nèi)，所以該類毒素疫苗免