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1、本文對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌的多重PCR定型及α、β和ε毒素基因的克隆、表達(dá)和抗血清的制備進(jìn)行了探討。本研究根據(jù)已發(fā)表的產(chǎn)氣莢膜梭菌α,β和ε毒素的全基因序列,設(shè)計(jì)了分別針對(duì)α,β和ε毒素基因完整成熟肽序列的引物,用PCR擴(kuò)增出了三種毒素的全基因序列的片段,其大小分別為1125bp、942bp和918bp。應(yīng)用基因克隆和重組技術(shù),成功的構(gòu)建了含有α,β和ε毒素完整成熟肽基因的表達(dá)載體,分別命名為α-pET28a、β-pET32a和ε-pET28a
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