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文檔簡介
1、創(chuàng)傷修復是一個復雜,但是受到嚴密調(diào)控的過程。組織損傷后炎性細胞經(jīng)過破損的毛細血管遷移至創(chuàng)傷部位,分泌多種細胞因子,啟動并激活修復細胞(包括真皮多能干細胞,血管內(nèi)皮細胞和表皮細胞)增殖、遷移和分化。影響創(chuàng)傷愈合的因素很多,其中修復細胞是創(chuàng)傷修復的關鍵,細胞功能受到基因表達的精確調(diào)控,而細胞基因表型的變化受到RNA網(wǎng)絡(包括RNA組和RNA調(diào)控元件)的精密調(diào)控。創(chuàng)傷修復的核心問題是修復細胞的功能調(diào)控。目前對于創(chuàng)傷修復具體的分子機制還有待于深
2、入研究。
RNA解旋酶p68在進化過程中高度保守,是一個依賴ATP的RNA解旋酶,是細胞轉錄過程中必需的核轉錄激活因子,在轉錄、翻譯、核糖體生物發(fā)生、RNA傳遞等眾多生物過程中起調(diào)控作用。RNA解旋酶p68在細胞增殖和器官發(fā)育、成熟過程中發(fā)揮重要作用。RNA解旋酶p68在分裂的細胞表達較強,在細胞中的表達分布與細胞周期密切相關。P68過表達會導致細胞出現(xiàn)惡性轉化,而且p68在結直腸癌、前列腺癌等腫瘤中出現(xiàn)過量表達,且在腫瘤
3、惡轉過程中表達逐漸升高,p68的表達水平高低與腫瘤的惡變、轉移密切相關。以往有研究揭示在創(chuàng)傷后早期p68在表皮細胞的表達下調(diào),但是對其在創(chuàng)傷修復中的作用尚未完全闡明。
本課題重點研究RNA解旋酶p68在創(chuàng)傷修復過程中的作用及調(diào)控的分子機制。通過免疫組織化學技術比較不同發(fā)育階段的大鼠皮膚、單純切割傷和放創(chuàng)復合傷創(chuàng)面組織中p68蛋白的表達特點,同時檢測臨床上患者增生性瘢痕和鱗癌標本等異常修復組織中的表達開展對照研究,以揭示其在
4、創(chuàng)傷修復中作用及意義。進一步以三種主要修復細胞(真皮多能干細胞、血管內(nèi)皮細胞和表皮細胞)為對象,研究早期傷口液對其p68表達的影響;通過RNAi技術研究p68在三種細胞增殖和遷移中的作用及其調(diào)控分子的變化特點,得出如下結果和結論:
1.p68蛋白在皮膚中的表皮和真皮中均有廣泛表達,其表達強度隨發(fā)育過程逐漸下降。生后1天呈高表達,隨后生后4天、10天逐漸下降,生后60天以后未檢測到表達,說明p68表達與發(fā)育過程演進具有相關性
5、。
2.應用大鼠皮膚切割傷和放創(chuàng)復合傷模型,組化檢測創(chuàng)面組織發(fā)現(xiàn),創(chuàng)傷后,p68表達激活并上調(diào);放創(chuàng)復合傷后,傷口愈合延遲,p68表達出現(xiàn)延遲,提示p68在難愈創(chuàng)傷修復啟動延遲發(fā)揮作用。
3.發(fā)現(xiàn)p68蛋白在增生性瘢痕和鱗癌標本中呈現(xiàn)異常高表達,且表達水平與鱗癌轉移相關,首次提出p68異常表達在鱗癌發(fā)生發(fā)展中的潛在臨床意義。
4.通過體外實驗發(fā)現(xiàn)p68的表達水平與細胞所處的增殖狀態(tài)相關,增殖旺盛
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