版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、新城疫(Newcastledisease,ND)是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus,NDV)引起的侵害禽類的急性高度接觸性傳染病,是家禽傳染性疾病中危害最嚴重的疫病之一,由于對世界養(yǎng)禽業(yè)危害極大,故被國際獸疫局確定為A類傳染病。使用疫苗進行免疫是全球養(yǎng)禽業(yè)防制該病的有效方法之一。由于傳統(tǒng)疫苗(減毒活苗或滅活苗)潛在的不足,迫切需要提高和加強新城疫疫苗的有效性。DNA疫苗作為第3代疫苗,因其既有亞單位疫苗的安全性,
2、又有減毒活疫苗的有效性而受到研究人員的矚目。因此,研制新一代高效、安全,低副作用的NDDNA疫苗是近年來研究的熱點之一。 本研究將新城疫病毒標準強毒F48E9株F、HN基因分別克隆到真核表達載體pCAGGS中,置于雞β-肌動蛋白啟動子的調(diào)控之下,構建成可用作DNA疫苗的NDVF和NDVHN基因表達質(zhì)粒。經(jīng)過酶切、測序分析篩選鑒定出含有F、HN基因的重組質(zhì)粒,分別命名為pCAGGS-F和pCAGGS-HN。然后,將用質(zhì)粒純化試劑盒
3、純化后的質(zhì)粒轉染Hela細胞,用間接免疫熒光技術檢測目的蛋白的表達情況。結果表明該表達載體可以表達F和HN基因。 在國內(nèi)首次應用構建的DNA疫苗對雞胚進行免疫,以測試其安全性(孵化率為100%,6/6),為后期進行進一步試驗奠定了基礎。 為了檢測這些質(zhì)粒是否可以誘導動物機體產(chǎn)生特異性免疫,將21日齡SPF雞分作8組并且每只雞帶有翅標,分別肌注接種不同劑量和組合的重組質(zhì)粒、載體質(zhì)粒pCAGGS以及生理鹽水。在免疫實驗中,應
4、用了外科手術中浸潤麻醉的方式給雛雞免疫。具體分組為,pCAGGS-F100μg、pCAGGS-F50μg、pCAGGS-HN100μg、pCAGGS-HN50μg、pCAGGS-F50μg+pCAGGS-HN50μg、pCAGGS-F25μg+pCAGGS-HN25μg、pCAGGS和生理鹽水組,其中pCAGGS-F25μg+pCAGGS-HN25μg組免疫方式為胸肌單點(肌肉和皮下混合),一免28天后進行二免,二免后第四周,所有雞都用
5、0.2ml103EID50的NDVF48E9株攻毒。免疫后及攻毒后每周無菌采集血清。結果pCAGGS-F25μg+pCAGGS-HN25μg免疫組的保護率達80%(4/5)。根據(jù)第一次所得數(shù)據(jù),我們對pCAGGS-F25μg+pCAGGS-HN25μg組加大樣本數(shù)目重新作免疫實驗,結果攻毒保護率pCAGGS-F25μg+pCAGGS-HN25μg組達到60%(6/10)。表明我們構建的DNA疫苗能夠誘導雞體產(chǎn)生特異性免疫應答,并對同型N
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 表達新城疫病毒HN基因的重組雞痘病毒及其免疫效力.pdf
- 表達新城疫病毒F、HN基因重組雞痘病毒疫苗的遺傳穩(wěn)定性和免疫效力試驗.pdf
- 新城疫病毒(DNV)HN基因真核表達重組質(zhì)粒的構建.pdf
- 新城疫病毒F基因在真核及原核表達系統(tǒng)中的表達.pdf
- 雞新城疫病毒F48E9的純化及其HN基因片段的原核表達.pdf
- 表達雞新城疫病毒HN基因重組雞痘病毒活疫苗的臨床前研究.pdf
- 雞催乳素和新城疫病毒F基因疫苗聯(lián)合免疫研究.pdf
- 雞新城疫病毒HN09-69株主要基因的克隆、原核表達及鑒定.pdf
- 表達基因Ⅶ型新城疫病毒F或HN糖蛋白的重組馬立克氏病毒構建及其免疫效力試驗.pdf
- 新城疫病毒La Sota株F和HN基因的克隆表達及免疫原性分析.pdf
- 抗體免疫選擇壓作用下新城疫病毒HN基因和F基因的變異.pdf
- 表達基因Ⅶ型新城疫病毒HN糖蛋白的重組火雞皰疹病毒的構建及其免疫效力試驗.pdf
- 表達新城疫病毒F、HN基因和傳染性喉氣管炎病毒gB基因重組禽痘病毒的構建及其免疫效力的研究.pdf
- 雞新城疫病毒ND-xx08株分離鑒定及F、HN基因的克隆與分析.pdf
- 新城疫病毒樣顆粒免疫效力的初步研究.pdf
- 表達新城疫病毒HN蛋白重組鴨腸炎病毒的構建.pdf
- 減毒沙門氏菌為載體的原核與真核表達和雞新城疫病毒表面糖蛋白基因免疫研究.pdf
- 新城疫病毒HN蛋白的可溶性超表達與免疫活性檢測.pdf
- 新城疫病毒F基因和HN基因的克隆、表達及其ELISA抗體檢測方法的初步建立.pdf
- 水禽源新城疫病毒經(jīng)雞傳代后HN蛋白變異的研究.pdf
評論
0/150
提交評論