血清wnt5a對(duì)慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者預(yù)后的評(píng)價(jià).pdf

1、研究背景與目的:
　　慢加急性乙型肝炎肝衰竭(acute-on-chronic hepatitis B liver failure，ACHBLF)死亡率高，嚴(yán)重危害人類健康。目前普遍認(rèn)為，炎癥在ACHBLF的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。近期的研究表明，wnt信號(hào)通路與炎癥密切相關(guān)。所以，本研究旨在通過(guò)檢測(cè)wnt信號(hào)通路中某些分子表達(dá)的變化，來(lái)尋找能有效判斷ACHBLF預(yù)后的生物標(biāo)志物。
　　研究方法:
　　本實(shí)驗(yàn)總共納入了

2、153例研究對(duì)象，其中包括63例ACHBLF患者，60例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)患者，和30例健康對(duì)照者(health controls，HCs)。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR)法檢測(cè)每個(gè)研究對(duì)象的外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral bloodmononuclear cells, PBMCs)中wnt5a, wnt3a, lefl, tcf1, fz

3、d5和sfrp1的mRNA水平;用甲基化特異性PCR(methylation specific PCR，MSP)檢測(cè)每個(gè)研究對(duì)象的sfrp1基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài);用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)檢測(cè)每個(gè)研究對(duì)象血清中wnt5a和sfrp1的水平。我們采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)資料用中位數(shù)（下四分位數(shù)，上四分位數(shù)）或數(shù)字表示，組間差異采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，

4、Mann-Whitney U檢驗(yàn)或卡方檢驗(yàn)比較，血清wnt5a與臨床指標(biāo)之間相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1.ACHBLF患者組與CHB患者組相比較，ACHBLF患者的wnt5amRNA水平明顯高于CHB患者(P=0.010);ACHBLF患者組與HCs組相比較，ACHBLF患者的wnt5a mRNA水平明顯高于HCs(P＜0.001);CHB患者組與HCs組

5、相比較，CHB患者wnt5a mRNA水平明顯高于HCs(P=0.037)。
　　2.ACHBLF患者組與CHB患者組相比較，ACHBLF患者血清wnt5a濃度是1.59(1.43-3.22) ng/ml，明顯高于CHB患者[1.47(1.42-1.54) ng/ml，P=0.046];ACHBLF患者組與HCs組相比較，ACHBLF患者的血清wnt5a濃度也明顯高于HCs[1.44(1.41-1.48) ng/ml，P=0.02

6、3]; CHB患者組與HCs組相比較，兩組血清wnt5a濃度無(wú)明顯差異(P=0.259)。
　　3.ACHBLF患者血清wnt5a水平與總膽紅素(total bilirubin, TBIL)(rs=0.277，P=0.028)，肌酐(creatinine，Cr)(rs=0.312，P=0.013)和終末期肝病模型(model for end-stage liver diseases，MELD)評(píng)分(rs=0.444，P＜0.001

7、)呈正相關(guān)，而與谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)(rs=-0.27，P=0.032)和白蛋白(albumin，ALB)(rs=-0.254，P=0.044)呈負(fù)相關(guān)。血清wnt5a水平與其他一些指標(biāo)如乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase，AST)、凝血酶原時(shí)間國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(international normalized ratio

8、，INR)和凝血酶原活動(dòng)度(prothrombin time activity，PTA)則沒(méi)有明顯相關(guān)性。
　　4.當(dāng)血清wnt5a濃度的截?cái)嘀刀x為1.553ng/ml時(shí)，在判斷ACHBLF患者的預(yù)后時(shí)的敏感性是69.23％，特異性是83.33％，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值是87.1％，陰性預(yù)測(cè)值是62.5％，受試者工作特性曲線(receiveroperating characteristic，ROC)下面積是0.847(95％ CI:0.73

9、4-0.925);當(dāng)ACHBLF患者wnt5a的濃度超過(guò)1.553ng/ml時(shí)，其生存時(shí)間是26.594±5.267(95％ CI:16.271-36.916)天，明顯低于血清wnt5a濃度小于1.553ng/ml的ACHBLF患者[65.032±5.901(95％ CI:53.467-76.598)天，P＜0.001]。
　　5.ACHBLF患者組與CHB患者組、HCs組相比較，ACHBLF患者的sfrp1基因的啟動(dòng)子甲基化水平

10、(22/63，34.9％)明顯低于CHB患者(37/60，61.7％;P=0.003)，但明顯高于HCs(2/30，6.7％;P＜0.001);ACHBLF患者的sfrp1 mRNA水甲高于CHB患者(P=0.019)，但低于HCs(P=0.010);ACHBLF患者的血清sfrp1水平[0.90(0.57-1.58) ng/ml]高于CHB患者[0.56(0.48-0.74) ng/ml，P＜0.001]，但與HCs[0.73(0.5