基于轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的野生稻NBS-LRR類和STK類序列的克隆與分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、野生稻含有許多栽培稻中已消失的有利基因，特別是對各種生物逆境和非生物逆境的抗性基因。但由于野生稻的遺傳背景復雜，利用傳統(tǒng)的克隆方法存在著很多問題和不足。候選抗性基因克隆策略是最近十年發(fā)展出來的克隆抗病基因的新方法，利用抗病基因的保守序列從而獲得抗病基因同源序列并最終克隆獲得新基因。本研究首先從野生稻中提取總RNA，反轉(zhuǎn)錄以獲得cDNA；根據(jù)NBS-LRR類和STK激酶類抗病基因的保守序列設(shè)計引物，PCR擴增野生稻cDNA得到了預計大小的

2、目的條帶，再經(jīng)克隆和測序。共分別獲得了11條NBS-LRR類序列和26條STK激酶類序列。經(jīng)過分析將NBS-LRR類抗病基因同源序列分為3類，而STK激酶類抗病基因同源序列可分為13類。利用BLAST比對分析發(fā)現(xiàn)三類NBS-LRR類序列均與水稻抗病基因RPR1有很高的同源性，經(jīng)電子定位分析將其定位到水稻11號染色體RPR1基因座位上，推測為RPR1基因家族在進化過程中復制與分化重組的結(jié)果。STK激酶類抗病基因同源序列除一類序列在水稻基因

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