Survivin基因沉默誘導人腦膠質(zhì)瘤細胞凋亡的實驗研究.pdf

1、第一部分人腦膠質(zhì)瘤中重要凋亡相關(guān)蛋白表達研究　　目的:研究人腦膠質(zhì)瘤組織中重要凋亡相關(guān)蛋白Survivin、p53、Caspase-3、Caspase-7的表達，探討其與細胞凋亡、增殖的關(guān)系。 方法:采用免疫組化SP法檢測了Survivin、p53、Caspase-3、Caspase-7在48例人腦膠質(zhì)瘤和8例正常腦組織中的表達情況。TUNEL技術(shù)用于檢測組織中細胞凋亡現(xiàn)象，Ki-67增殖指數(shù)的檢測則采用SABC法。

2、第二部分特異性siRNA對人腦膠質(zhì)瘤細胞Survivin基因表達抑制作用　　目的:Survivin屬IAP基因家族成員，表達于多種腫瘤組織中，能使細胞逃避凋亡，并促進細胞的異常有絲分裂。本研究旨在探討siRNA敲除Survivin基因的可行性，并觀察其對人腦膠質(zhì)瘤細胞凋亡的影響。 方法:采用人工合成的小干擾RNA(siRNA)體外阻抑膠質(zhì)瘤細胞的Survivin基因，即時定量PCR方法檢測SurvivinmRNA表達水平，流式

3、細胞儀檢測細胞凋亡率。 第三部分Survivin基因沉默對人腦膠質(zhì)瘤T98細胞電離輻射耐受性影響　　目的探討Survivin基因沉默后人腦膠質(zhì)瘤T98細胞對電離輻射耐受性影響。 方法利用人工合成的特異性siRNA抑制T98細胞Survivin基因的表達；直線加速器對實驗中各組細胞進行輻照，劑量為10Gy；四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測細胞增殖活性。 第四部分Survivin特異性siRNA聯(lián)合格列衛(wèi)對膠質(zhì)瘤T9