P-eif2α在家族性肌萎縮側(cè)索硬化模型hSOD1G93A轉(zhuǎn)基因小鼠腰髓中的表達(dá)變化.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師( 或指導(dǎo)小組) 的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。研究生簽名：猩熊每導(dǎo)師簽章： 二級(jí)學(xué)院領(lǐng)河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)

2、性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。導(dǎo)師簽章：卜咩Ⅻ，；年專月工3 日中文摘要P - e i f 2 a 在家族性肌萎縮側(cè)索硬化模型h S O D I G 9 3 A 轉(zhuǎn)基因小鼠腰髓中的表達(dá)變化摘 要目的：肌萎縮側(cè)索硬化( A m y o t r o p h i c L a t e r a

3、lS c l e r o s i s ，A L S ) 是最常見的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病，它以皮層、腦干以及脊髓的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的進(jìn)展性變性為特征，導(dǎo)致肌萎縮、癱瘓，最終因呼吸肌功能障礙而死亡。大約5 ％．1 0 ％的A L S 是遺傳性的( 家族性) ，大多數(shù)是散發(fā)的A L S 。研究證實(shí)基因突變與A L S 的發(fā)病相關(guān)，S O D l 是第一個(gè)被認(rèn)知的突變基因，在家族性的A L S中，大約1 0 ％．2 0 ％與S O D I 的突變有關(guān)。表達(dá)人

4、突變S O D l 基因的轉(zhuǎn)基因小鼠的臨床以及病理表現(xiàn)與人A L S 極為相似，因此建立了許多表達(dá)人突變S O D l 的轉(zhuǎn)基因小鼠模型，其中h S O D l G 9 3 A 轉(zhuǎn)基因小鼠應(yīng)用最廣泛，是國際上公認(rèn)的A L S 的動(dòng)物模型，用來闡述A L S 的發(fā)病機(jī)制以及作為臨床藥物研究的動(dòng)物模型。作為一個(gè)多因素作用的疾病，除了基因突變外，蛋白的錯(cuò)誤折疊以及聚集、谷氨酸興奮毒性、神經(jīng)炎性、氧化應(yīng)激和線粒體的功能障礙、細(xì)胞骨架異常以及軸漿

5、運(yùn)輸缺陷等也參與A L S 的發(fā)病。近年來，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作為A L S 一個(gè)新的發(fā)病機(jī)制，被深入研究。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)作為分泌路徑中一個(gè)重要的細(xì)胞器，參與了蛋白質(zhì)的合成、折疊和翻譯后修飾，還參與脂類代謝、鈣的存儲(chǔ)，同時(shí)將這些合成與修飾后的蛋白質(zhì)運(yùn)輸?shù)狡渌?xì)胞器。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)蛋白折疊能力下降、鈣平衡紊亂都會(huì)引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激( e n d o p l a s m i cr e t i c u l u m s t r e s s ，E R S ) 。在h S

6、O D l 刪認(rèn)轉(zhuǎn)基因小鼠中，突變S O D l 基因表達(dá)突變的S O D l 蛋白，突變的S O D l 蛋白易于在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)聚集以及形成包涵體，引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。其主要通過未折疊蛋白反應(yīng)( u n f o l d e dp r o t e i n r e s p o n s e ，U P R ) 和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)降解( e n d o p l a s m i cr e t i c u l u ma s s o c i a t e dd e

7、 g r a d a t i o n ，E R A D ) 途徑清除突變的S O D l ，減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)負(fù)荷，恢復(fù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)。若不能及時(shí)清除突變S O D l ，S O D l 突變蛋白大量聚集，則會(huì)引起細(xì)胞凋亡。U P R 表現(xiàn)為P E K R 通路、I R E l 通路、A T F 6 通路的激活。其中P E R K 作為第一個(gè)被激活的信號(hào)通路，在A L S 的發(fā)病機(jī)制中具有重要作用。本實(shí)驗(yàn)以h S O D l G 9 3 A 轉(zhuǎn)基因