ESAT-6-CFP-10融合蛋白的抗原性分析及其對診斷結(jié)核的臨床應(yīng)用價值.pdf

1、目的：分析ESAT-6/CFP-10融合蛋白作為結(jié)核抗原的特性，并探討以其作為抗原的酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)實驗(ELISPOT)在結(jié)核診斷中的應(yīng)用價值。 方法：利用ELISPOT對ESAT-6/CFP-10融合蛋白與PPD作比較，分析ESAT-6/CFP-10融合蛋白作為結(jié)核特異性抗原的特性與優(yōu)勢；并通過以ESAT-6/CFP-10融合蛋白為刺激抗原的ELISPOT法(ESAT-6/CFP-10—ELISPOT)檢測經(jīng)結(jié)核特異性抗原刺激后

2、分泌γ干擾素的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞數(shù)量方法，測定65例單純結(jié)核病患者，16例HIV/結(jié)核雙重感染患者，20例HIV感染患者，32例非結(jié)核呼吸道疾病患者，30名健康體檢者外周血單個核細(xì)胞中結(jié)核菌抗原特異的T淋巴細(xì)胞的頻率。并與傳統(tǒng)結(jié)核診斷方法進(jìn)行比較。 結(jié)果：ESAT-6/CFP-10融合蛋白與PPD在結(jié)核患者中抗原作用相同，但是PPD在正常BCG接種人群中會出現(xiàn)假陽性，而融合蛋白仍為陰性。ESAT-6/CFP-10—ELISPOT與T

3、ST(PPD皮試)在所有81例結(jié)核患者中的比較，ESAT-6/CFP-10—ELISPOT陽性率98.8％，TST陽性率為56.8％，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；ESAT-6/CFP-10—ELISPOT在涂陽結(jié)核組、涂陰結(jié)核組(肺外結(jié)核)、HIV/結(jié)核雙重感染組陽性率分別為100％、97.1％、100％，其敏感性遠(yuǎn)高于痰涂片檢查，且各組結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)差異。對照組中20例HIV感染組有1例陽性，非結(jié)核呼吸道疾病患者組與健康對照組均為陰性，提示E

4、SAT-6/CFP-10—ELISPOT方法的特異度為98.8％。 結(jié)論： 1、ESAT-6/CFP-10融合蛋白與PPD、單一抗原相比，具備更高的敏感性與特異性且不受BCG接種干擾等優(yōu)勢。提示融合蛋白更適合作為結(jié)核診斷中的特異性抗原。 2、ESAT-6/CFP-10—ELISPOT比傳統(tǒng)結(jié)核診斷方法更靈敏、特異、快速。 3、ESAT-6/CFP-10—ELISPOT對各種類型的結(jié)核均有高敏感和高特異性，