2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩101頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、戊型肝炎(HepatitisE,HE)是一種由戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus,HEV)引起的急性病毒性肝炎。HEV主要經(jīng)消化道,以糞口途徑為最主要的傳播方式。HEV既可以在一些公共衛(wèi)生條件較差的不發(fā)達(dá)國家引起大規(guī)模的暴發(fā)流行,也可以在發(fā)達(dá)國家引起急性散發(fā)性發(fā)疾病,我國是HE的主要流行區(qū)之一。
   HEV屬于肝炎病毒屬,為無囊膜,單股正鏈RNA病毒,其基因組全長約為7.2Kb,比禽HEV基因組全長多600bp左右,

2、含有3個(gè)開放閱讀框(Openreadingframe,ORF),分別為ORF1、ORF2和ORF3。其中ORF2編碼衣殼蛋白是病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白,并且包含病毒主要的抗原表位。本文通過原核表達(dá)禽和豬HEV的衣殼蛋白,了解該蛋白的抗原性,從而為該病毒的診斷和預(yù)防等提供材料和理論支持。
   1.禽HEV衣殼蛋白抗原性分析
   以中國禽HEV(GenBankaccessionN0.GU954430)分離株的病毒懸液為模板,設(shè)

3、計(jì)引物原核表達(dá)衣殼蛋白N端ORF2-A(23-358aa)和C端ORF2-B(339-606aa)蛋白。通過免疫BALB/c小鼠,在免疫方法、免疫劑量和檢測方法均相同的情況下,免疫ORF2-A蛋白的小鼠五免后抗體水平勉強(qiáng)等同于免疫ORF2-B蛋白的小鼠三免后的抗體水平;同時(shí),在對(duì)收集的1379份來自不同地區(qū)臨床雞血清的檢測中,發(fā)現(xiàn)502份(36.4%)臨床血清含ORF2-B抗體,僅331(24%)臨床血清針對(duì)ORF2-A抗體陽性,其中1

4、43份(10.4%)份含ORF2-A抗體而不含ORF2-B抗體。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,禽HEV衣殼蛋白的C端和N端區(qū)域的抗原性存在明顯差異,并且其C端區(qū)域的免疫反應(yīng)原性強(qiáng)于其N端區(qū)域。
   隨后利用抗原性分析軟件DNAStar將ORF2-A蛋白分為相互重疊的4段區(qū)域,然后原核表達(dá),利用分段的蛋白檢測免疫小鼠血清和臨床ORF2-A抗體陽性雞血清,結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)衣殼蛋白的N-端區(qū)域的主要抗原區(qū)位于23-84aa之間。
   2.

5、豬HEV衣殼蛋白C端區(qū)域單克隆抗體的制備及鑒定
   以山東省豬HEV分離株的病毒懸液為模板,設(shè)計(jì)引物獲得與禽HEV的ORF2-B蛋白對(duì)應(yīng)的基因序列,并進(jìn)行原核表達(dá)獲得蛋白(ORF2-S)。蛋白純化后免疫BALB/c小鼠,經(jīng)常規(guī)的細(xì)胞融合和亞克隆制備出3株特異性針對(duì)豬HEVORF2-S蛋白的單克隆抗體(1E4,2C7,2G9)。單抗與臨床收集的豬血清競爭ELISA發(fā)現(xiàn),1E4和2G9能夠阻斷臨床陽性豬血清,提示該兩株單克隆抗體識(shí)

6、別的抗原表位是豬HEV衣殼蛋白上重要的抗原表位區(qū),而單抗Mab-2C7不能阻斷。衣殼蛋白單克隆抗體的制備為豬HEV的診斷及研究提供重要工具。
   3.禽與豬HEV衣殼蛋白共有抗原表位分析
   利用制備的6株抗禽HEV衣殼蛋白的單抗以及3株抗豬HEV衣殼蛋白的單抗分別與禽、豬HEV衣殼蛋白進(jìn)行交叉反應(yīng),發(fā)現(xiàn)抗禽HEV的單抗185與3E8識(shí)別的表位為禽、豬HEV所共有,其共有抗原表位位于禽HEV衣殼蛋白C端335-383

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論