“復(fù)方柴芩顆粒”對黃曲霉毒素B1慢性中毒肉鴨CYP450酶的影響及其部分藥理作用.pdf

1、本試驗主要觀察“復(fù)方柴芩顆?！睂FB1(Aflatoxin B1，簡寫AFB1)引起的肉鴨肝損傷的部分藥理作用，并從分子水平上探討“復(fù)方柴芩顆?！睂FB1慢性中毒時細(xì)胞色素P450酶的活性和mRNA及蛋白表達(dá)的影響。主要試驗內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　試驗方法：
　　健康1日齡櫻桃谷肉鴨126只，飼喂試驗基礎(chǔ)日糧6天，于第7天（肉鴨7日齡）時，隨機(jī)選取21只肉鴨作為正常組，繼續(xù)飼喂實驗基礎(chǔ)日糧。其余105只肉鴨，每天飼喂含40

2、μg/kg AFB1的飼料，建立肉鴨AFB1慢性中毒模型，同時分為模型組、陽性對照組、“復(fù)方柴芩顆?！备邉┝拷M、“復(fù)方柴芩顆?！敝袆┝拷M、“復(fù)方柴芩顆?！钡蛣┝拷M，每組21只。本試驗共六組，造模和用藥同時進(jìn)行，選取造模（用藥）7d、14d和21 d為3個時間點，六個組每組分別隨機(jī)選取7只肉鴨，取血和肝臟。檢測血清氧化應(yīng)激指標(biāo)(SOD、MDA)、肝臟損傷標(biāo)志性指標(biāo)(AKP、GOT、GPT)、觀察肝臟組織的病理變化。取2g肝組織制備肝微粒體

3、，檢測肝微粒體中CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性以及肝標(biāo)本中CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1蛋白表達(dá)水平。取黃豆粒大小的肝組織，用于檢測CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1 mRNA表達(dá)量。
　　試驗結(jié)果：
　　結(jié)果顯示，同模型組相比，用藥三個時間點“復(fù)方柴芩顆?！备?、中、低劑量組，血清中丙二醛(MDA)含量、堿性磷酸酶(AKP)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活力顯著降低(P＜0.05)

4、;超氧化物歧化酶(SOD)顯著升高（P＜0.05）;肝組織空泡化降低、膽管增生現(xiàn)象較輕。綜合考慮投藥14d，各項指標(biāo)更接近正值。
　　與模型組相比，“復(fù)方柴芩顆?！比齻€治療組用藥7d和14d，肝臟微粒體細(xì)胞色素P450酶系CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性顯著降低(P＜0.05);用藥21d“復(fù)方柴芩顆?！比齻€治療組CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性升高(P＜0.05)，但與模型組相比差異不明顯。
　　與

5、模型組相比，“復(fù)方柴芩顆粒”三個治療組用藥7d、14d和21d，肝臟CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1 mRNA相對表達(dá)量顯著降低(P＜0.05)。與模型組相比，“復(fù)方柴芩顆?！比齻€治療組用藥7d、14d和21d, CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1蛋白表達(dá)量顯著降低(P＜0.05)。用藥7d和14d CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1 mRNA相對表達(dá)量和蛋白表達(dá)量明顯低于用藥21d的表達(dá)量(P＜0.05)，且低劑量

6、組數(shù)據(jù)顯著高于高、中劑量組(P＜0.05)。
　　試驗結(jié)論:
　　1.“復(fù)方柴芩顆?！蹦苡行У姆乐稳怿咥FB1慢性中毒，主要通過調(diào)節(jié)肉鴨的抗氧化功能、提升肝功能來實現(xiàn)的。且投藥14d藥效最好。所以綜合考慮，優(yōu)選出最佳用藥方案，即低劑量用藥14d。
　　2.用藥7、14d，“復(fù)方柴芩顆?！蹦苡行б种朴葾FB1導(dǎo)致的CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性升高的趨勢，減少AFB1前體物質(zhì)代謝激活，降低其化學(xué)性肝臟損傷達(dá)

7、到保護(hù)肝臟的作用。用藥21d CYP450活性升高，可能與“復(fù)方柴芩顆?！北旧砭哂猩逤YP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性的作用，但其誘導(dǎo)效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于AFB1，且只是隨著時間推移逐漸顯現(xiàn)出來有關(guān)。
　　3.“復(fù)方柴芩顆?！蹦苡行б种朴葾FB1引起的CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1mRNA相對表達(dá)量和蛋白表達(dá)量升高的趨勢，從而減少AFB1前體物質(zhì)代謝激活，降低AFB1引起的化學(xué)性肝臟損傷，進(jìn)而達(dá)到保護(hù)肝臟的作用。但隨