紅平紅球菌的培養(yǎng)及其對(duì)黃曲霉毒素B1的降解研究.pdf

1、黃曲霉毒素(Aflatoxins)是由黃曲霉(Aspergillus flavus)、寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)、特異曲霉(Aspergillus nomius)、溜曲霉(Aspergillustamarii)等多種真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，而其中以黃曲霉毒素B1毒性最強(qiáng)，性質(zhì)最穩(wěn)定。黃曲霉毒素是種毒性很強(qiáng)的肝毒素，可引起肝臟及其他組織器官的急性或慢性損害，具有致癌、致畸、到突變的“三致”作用，對(duì)人類和家畜

2、的危害極大，給全球經(jīng)濟(jì)造成巨大損失。
　　 用理化方法雖可去除或降解黃曲霉毒素，但反應(yīng)條件劇烈，會(huì)產(chǎn)生二次污染，降低產(chǎn)品品質(zhì)，采用生物方法反應(yīng)條件溫和，極少地?fù)p失產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，成為目前的研究熱點(diǎn)。本論文以對(duì)黃曲霉毒素B1有降解作用的紅平紅球菌為研究對(duì)象，取得以下結(jié)果：(1)為提高菌液濃度，對(duì)紅平紅球菌的培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，確定紅平紅球菌的最佳培養(yǎng)條件為：溫度15.3℃，pH5.56，接種量4％，裝液量70mL/250mL，搖床

3、轉(zhuǎn)速180r/min，培養(yǎng)時(shí)間58.2h；(2)研究不同碳源、氮源、金屬離子對(duì)紅平紅球菌降解率的影響，確定最佳碳源為葡萄糖，最佳氮源為酵母膏，添加CuCl2的降解效果最好，利用正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化，確定各因素的最佳添加量為：葡萄糖1.0g/L，酵母膏1.4g/L，CuCl20.07mol/L。通過(guò)響應(yīng)面分析法優(yōu)化紅平紅球菌的降解條件，確定紅平紅球菌降解AFB1的最佳條件為：溫度23.2℃，pH7.17，裝液量24.6mL/100mL，接種量

4、10％，搖床轉(zhuǎn)速180r/min，降解時(shí)間81.9h，此時(shí)降解率由原來(lái)的59.3％提高到95.8％；(3)對(duì)降解活性物質(zhì)進(jìn)行初探，活性物質(zhì)主要來(lái)自于胞外粗提液，當(dāng)硫酸銨飽和度為60％時(shí)，蛋白粗提液對(duì)黃曲霉毒素B1降解率最高。蛋白粗提液的最適降解時(shí)間為84h時(shí)，降解率達(dá)74.5％，最適作用溫度為15℃，最適pH為5.0，Na+對(duì)蛋白粗提液有一定的激活作用；(4)紅平紅球菌發(fā)酵液對(duì)紅皮花生中黃曲霉毒素的生物合成有一定的抑制作用。采用正交實(shí)驗(yàn)

5、設(shè)計(jì)，研究各因素對(duì)紅皮花生中黃曲霉毒素合成的抑制作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，溫度對(duì)降解率影響最大，其次為菌液濃度、葡萄糖、過(guò)氧化氫、硝酸鈉、蛋白胨，最終確定菌種濃度為106CFU/mL、溫度25℃、過(guò)氧化氫濃度6％，硝酸鈉10g/L、蛋白胨5g/L，葡萄糖添加量為0時(shí)，抑制作用最強(qiáng)，達(dá)25.8％。
　　 本文從紅平紅球菌發(fā)酵液中初步提純活性物質(zhì)，對(duì)蛋白粗提液的部分特性進(jìn)行了研究；將發(fā)酵液應(yīng)用在紅皮花生中，抑制紅皮花生中黃曲霉毒素的生物合