在多藥耐藥胃癌細(xì)胞中轉(zhuǎn)化生長因子-β1對細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制的研究.pdf

1、目的：研究轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforminggrowthfactorβ1，TGF-β1)對SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制。 方法：實(shí)驗(yàn)分為兩組；即對照組：不加TGF-β1的SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞；實(shí)驗(yàn)組：加10ng/mL濃度的TGF-β1SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞，每組細(xì)胞分別培養(yǎng)24、48和72h。在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，應(yīng)用MTT方法檢測對照組和實(shí)驗(yàn)

2、組各時(shí)間段的細(xì)胞生長抑制率，并用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)及Westernblotting技術(shù)檢測c-myc，突變型p53和cyclinD1蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果：MTT結(jié)果，實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞生長抑制率逐漸增高，具有濃度和時(shí)間依賴性，與對照組相比抑制率明顯增高(P＜0.001)。倒置顯微鏡觀察，對照組SNU-601/cis2細(xì)胞數(shù)量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長明顯增多，而實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞的數(shù)量在各時(shí)間段

3、與對照組相比明顯減少。免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果，在24、48和72h時(shí)對照組細(xì)胞c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)均呈強(qiáng)陽性，而實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞的c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)逐漸降低，具有時(shí)間依賴性；CyclinD1蛋白的表達(dá)在對照組和實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞中均呈陽性或強(qiáng)陽性。Westernblotting結(jié)果，實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞的c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)逐漸降低，各時(shí)間段與對照

4、組相比具有顯著性差異(P＜0.01)；cyclinD1蛋白的表達(dá)在實(shí)驗(yàn)組SNU-601/cis2細(xì)胞中24和48h與對照組相比明顯降低(P＜0.05)，而72h時(shí)其表達(dá)明顯增強(qiáng)與對照組相比無明顯差異(P＞0.05)。 結(jié)論：TGF-β1可濃度和時(shí)間依賴性抑制SNU-601/cis2多藥耐藥胃癌細(xì)胞增殖，其機(jī)制與抑制c-myc和突變型p53蛋白的表達(dá)有關(guān)，cyclinD1蛋白可能參與早期TGF-β1對多藥耐藥胃癌細(xì)胞的抗增殖作用。