轉(zhuǎn)化生長因子—β1對(duì)脂肪干細(xì)胞增殖和Ⅰ型膠原產(chǎn)生的影響.pdf

1、目的：
　　 探討脂肪干細(xì)胞的分離培養(yǎng)增殖，膠原的產(chǎn)生和轉(zhuǎn)化生長因子—β1對(duì)其增殖和膠原產(chǎn)生的影響。
　　 方法：
　　 從鼠腹股溝區(qū)脂肪分離出干細(xì)胞并培養(yǎng)，通過倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長增殖情況；并描繪細(xì)胞生長曲線；用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞表面標(biāo)志物進(jìn)行檢測。將培養(yǎng)的細(xì)胞分為4個(gè)組，分別加入5μg/L，10μg/L的TGF-β1，對(duì)照組不加TGF-β1，培養(yǎng)后，檢測細(xì)胞的數(shù)量和膠原產(chǎn)生量，并與使用不含TGF-

2、β1培養(yǎng)的對(duì)照組及不同濃度TGF-β1組之間比較。
　　 結(jié)果：
　　 脂肪組織中確實(shí)存在MSCs，其分離成功率為56％;通過倒置相差顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)脂肪來源的MSCs呈貼壁生長，外觀為成纖維細(xì)胞樣外觀，細(xì)胞排列呈螺旋狀；生長曲線顯示無論原代還是傳代培養(yǎng)的脂肪來源的MSCs的生長曲線都為S型，其中細(xì)胞增殖能力最強(qiáng)的是第3代和第5代；此外，AMSCs可以產(chǎn)生Ⅰ型膠原組織，TGF-β1在一定濃度范圍內(nèi)對(duì)AMSCs增殖數(shù)目的影

3、響無顯著性差異，但能顯著性地增加Ⅰ型膠原組織產(chǎn)生(P＜0.05)。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示，UCB-MSCs均穩(wěn)定的表達(dá)與MSCs相關(guān)的表面抗原標(biāo)志物CD29、CD44和CD90等，不表達(dá)造血標(biāo)志CD34和CD45。
　　 結(jié)論：
　　 MSCs可從脂肪組織中分離并培養(yǎng)，其成功率較高；脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞的生長特性類似于呈纖維母細(xì)胞；其具有和骨髓MSCs相似的細(xì)胞表面標(biāo)志物、形態(tài)學(xué)特征以及生長增殖特點(diǎn)等生物學(xué)特性，自我更