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文檔簡介
1、目的:
探討脂肪干細(xì)胞的分離培養(yǎng)增殖,膠原的產(chǎn)生和轉(zhuǎn)化生長因子—β1對(duì)其增殖和膠原產(chǎn)生的影響。
方法:
從鼠腹股溝區(qū)脂肪分離出干細(xì)胞并培養(yǎng),通過倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)、生長增殖情況;并描繪細(xì)胞生長曲線;用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞表面標(biāo)志物進(jìn)行檢測。將培養(yǎng)的細(xì)胞分為4個(gè)組,分別加入5μg/L,10μg/L的TGF-β1,對(duì)照組不加TGF-β1,培養(yǎng)后,檢測細(xì)胞的數(shù)量和膠原產(chǎn)生量,并與使用不含TGF-
2、β1培養(yǎng)的對(duì)照組及不同濃度TGF-β1組之間比較。
結(jié)果:
脂肪組織中確實(shí)存在MSCs,其分離成功率為56%;通過倒置相差顯微鏡觀察,發(fā)現(xiàn)脂肪來源的MSCs呈貼壁生長,外觀為成纖維細(xì)胞樣外觀,細(xì)胞排列呈螺旋狀;生長曲線顯示無論原代還是傳代培養(yǎng)的脂肪來源的MSCs的生長曲線都為S型,其中細(xì)胞增殖能力最強(qiáng)的是第3代和第5代;此外,AMSCs可以產(chǎn)生Ⅰ型膠原組織,TGF-β1在一定濃度范圍內(nèi)對(duì)AMSCs增殖數(shù)目的影
3、響無顯著性差異,但能顯著性地增加Ⅰ型膠原組織產(chǎn)生(P<0.05)。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示,UCB-MSCs均穩(wěn)定的表達(dá)與MSCs相關(guān)的表面抗原標(biāo)志物CD29、CD44和CD90等,不表達(dá)造血標(biāo)志CD34和CD45。
結(jié)論:
MSCs可從脂肪組織中分離并培養(yǎng),其成功率較高;脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞的生長特性類似于呈纖維母細(xì)胞;其具有和骨髓MSCs相似的細(xì)胞表面標(biāo)志物、形態(tài)學(xué)特征以及生長增殖特點(diǎn)等生物學(xué)特性,自我更
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