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1、目的:探討TGF-β3對體外培養(yǎng)的兔牙髓干細(xì)胞增殖和分化的影響。
方法:采用酶解組織塊法將兔DPSCs分離培養(yǎng),獲得DPSCs,光鏡下行形態(tài)學(xué)觀察;將體外培養(yǎng)的第3代DPSCs分為5組,分別為對照組、20 ng/mL TGF-β3組、40 ng/mL TGF-β3組、80 ng/mL TGF-β3組和100 ng/mL TGF-β3組,分別加入0、20、40、80、100 ng/mL TGF-β3;采用MTT法檢測5組DPSC
2、s A490值,采用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測成骨細(xì)胞標(biāo)記物 OC、COL-I、BSP表達情況,采用茜素紅染色檢測出現(xiàn)礦化結(jié)節(jié)情況,并進行比較。
結(jié)果:兔DPSCs呈集落狀生長,在體外有一定克隆形成能力;對照組、20、40、80、100 ng/mL TGF-β3組兔DPSCs A490值分別為0.34±0.55、0.34±0.19、0.33±0.47、0.33±0.30、0.34±0.47,各組間兩兩比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.0
3、5);80、100 ng/mL TGF-β3組誘導(dǎo)后第3天出現(xiàn)COL-I陽性表達,第7天開始消失,第5~7天出現(xiàn)BSP陽性表達,第7~14天出現(xiàn)OC陽性表達,第7天出現(xiàn)礦化結(jié)節(jié);40 ng/mL TGF-β3組第5~7天均有COL-I陽性表達,第7天出現(xiàn)BSP陽性表達,第14天出現(xiàn)OC陽性表達,第14天出現(xiàn)礦化結(jié)節(jié);20 ng/mL組第7天出現(xiàn)COL-I陽性表達,第14天消失,第14天出現(xiàn)BSP陽性表達,第21天出現(xiàn)OC陽性表達,第21
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