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文檔簡(jiǎn)介
1、研究背景及目的:
下咽癌是頭頸部常見(jiàn)的惡性腫瘤,惡性程度高,浸潤(rùn)性生長(zhǎng)、易轉(zhuǎn)移,浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是下咽癌致死的主要原因。下咽癌的發(fā)病與吸煙、飲酒等生活習(xí)俗有關(guān),隨著空氣污染的加重,近年來(lái)下咽癌的發(fā)病率有增高的趨勢(shì)。由于下咽部解剖特點(diǎn),腔隙隱蔽,患者早期癥狀不明顯,臨床確診并接受治療時(shí)多為臨床Ⅲ、Ⅳ期的晚期腫瘤,常累及喉腔、頸段食管和舌根等部位,并多伴有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。手術(shù)后可能導(dǎo)致發(fā)音、呼吸及吞咽功能障礙,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。下
2、咽癌術(shù)后的局部復(fù)發(fā)、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移仍然是影響患者預(yù)后的主要因素。因此,深入研究與下咽癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移有關(guān)的分子機(jī)制,有助于下咽癌的早期診斷、早期治療及提高預(yù)后。
隨著功能基因組學(xué)的飛速發(fā)展,大家把越來(lái)越多的注意力轉(zhuǎn)向了對(duì)非編碼轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物功能的研究。非編碼RNA是一類不具有編碼蛋白質(zhì)功能的RNA分子,但是它們?cè)谏顒?dòng)中發(fā)揮著重要而又廣泛的調(diào)控作用,相對(duì)于蛋白編碼序列以及各種小分子RNA,長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long n
3、on-coding RNA,lncRNA)是目前非編碼RNA研究的熱點(diǎn)。眾多研究表明,lncRNA在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著多種不同的作用(促癌或抑癌作用),它們參與了腫瘤細(xì)胞的凋亡調(diào)控、浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移等;它們有希望成為腫瘤新型標(biāo)志物甚至腫瘤治療的靶點(diǎn),在腫瘤診斷、治療以及患者預(yù)后評(píng)價(jià)方面顯示出良好的應(yīng)用前景。在該研究中,我們旨在發(fā)現(xiàn)新的與HSCC有關(guān)的lncRNAs,并對(duì)顯著異常表達(dá)的lncRNA與下咽癌增殖、侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制進(jìn)行初步研究
4、,研究其是否會(huì)成為下咽癌潛在生物標(biāo)志物。
研究方法:
我們選取了3對(duì)下咽癌標(biāo)本(包括癌組織和癌旁組織),利用ArraystarlncRNA芯片(長(zhǎng)鏈非編碼RNA芯片)對(duì)下咽癌及癌旁組織進(jìn)行系統(tǒng)性篩查,發(fā)現(xiàn)了在下咽癌中差異表達(dá)的數(shù)個(gè)lncRNAs及蛋白編碼基因,分別為AB019562、AB209630,SPP1、TJP2。另外,采用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)在20對(duì)下咽癌和癌旁組織標(biāo)本中分析,發(fā)現(xiàn)實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果與芯片結(jié)果一
5、致。我們選取了在下咽癌組織中表達(dá)最顯著降低的lncRNA-AB209630并構(gòu)建了慢病毒表達(dá)載體,以lncRNA-AB209630高表達(dá)的下咽癌FaDu細(xì)胞系為模型,進(jìn)行了體外MTT、克隆形成、腫瘤細(xì)胞侵襲等功能試驗(yàn)。
結(jié)果:
我們?cè)谙卵拾┙M織中發(fā)現(xiàn)了異常表達(dá)的lncRNAs,其中l(wèi)ncRNA-AB209630在下咽癌組織中表達(dá)較癌旁組織明顯降低,通過(guò)體外功能實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)lncRNA-AB209630過(guò)表達(dá)可抑制下咽癌細(xì)
6、胞系Fadu的增殖和侵襲、并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。提示lncRNA-AB209630是下咽癌中具有潛在抑癌功能的lncRNA。
結(jié)論:
lncRNAs在下咽鱗狀細(xì)胞癌的臨床意義和生物功能仍然不太為人所知,我們?cè)谙卵拾┙M織中發(fā)現(xiàn)了異常表達(dá)的lncRNAs,研究初步證實(shí)了lncRNA-AB209630在下咽癌的增殖、侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中起重要的調(diào)控作用,為研究下咽癌的發(fā)生機(jī)理、發(fā)展變化、侵襲轉(zhuǎn)移、預(yù)后等提供了一些新的線索和研究思路,將
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