長鏈非編碼RNA FEZF1--AS1在結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移中的功能及相關(guān)機制初步研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學2011級碩士學位論文長鏈非編碼RNAFEZF1AS1在結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移中的功能及相關(guān)機制初步研究TheroleandmechanismoflongnoncodingRNAFEZFlASlinthemetastasisofcolorectalcarcinoma課題來源：國家自然科學基金資助項目(NO81272763)學位申請導師姓專業(yè)名培養(yǎng)類所在學人陳娜名周軍副教授稱病理學與病理生理學型學術(shù)型院基礎(chǔ)醫(yī)學院答辯委員會主席答辯委員會

2、委員丁彥青教授張雅潔教授鐘雪云教授薛玲教授李學農(nóng)教授論文評閱人李智教授王爽副教授2014年5月20日廣州摘要提示其表達失調(diào)可能與結(jié)直腸癌發(fā)生及轉(zhuǎn)移相關(guān)，但其具體機制尚不清楚。本研究旨在探討FEZFl一ASl在結(jié)直腸癌增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移中的作用及可能機制。方法1、采用ArraystarLncRNA芯片分析不同轉(zhuǎn)移潛能結(jié)直腸癌細胞株間lncRNA差異表達譜，通過Real—timePCR檢測結(jié)直腸癌細胞株及小樣本配對結(jié)直腸癌組織中差異表達lnc

3、RNAs的表達情況，篩選確定結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)長鏈非編碼RNAFEZFlASl；應用RealtimePCR檢測不同結(jié)直腸癌細胞株及大樣本配對結(jié)直腸癌組織中的表達：采用原位雜交方法檢測FEZFlASl在具有隨訪資料臨床結(jié)直腸癌石蠟組織中的表達，通過SPSSl30軟件分析其表達水平與臨床病理因素之間的聯(lián)系及預后意義。2、采用慢病毒感染方法構(gòu)建穩(wěn)定干擾FEZFlASl的細胞株(HCTll6一Ai，Ci／M5Ai，Ci)和對照細胞株(HCTll6

4、NC／M5NC)。3、采用CCK8、平板克隆實驗檢測細胞增殖能力并分析細胞周期；遷移實驗、劃痕實驗、侵襲實驗檢測細胞的侵襲遷移能力；裸鼠皮下成瘤實驗、腫瘤細胞裸鼠尾靜脈注射肺轉(zhuǎn)移實驗觀察結(jié)直腸癌細胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤能力及轉(zhuǎn)移能力。4、采用免疫組化方法檢測大樣本臨床結(jié)直腸癌石蠟組織中FEZFl蛋白的表達，用RealtimePCR方法檢測FEZFl在配對結(jié)直腸癌組織(標本同檢測FEZFlASl一致)及相關(guān)結(jié)直腸癌細胞株中的表達情況，同時采用