先天性肛門直腸畸形胚胎發(fā)育、基因表達(dá)及遠(yuǎn)期生活質(zhì)量的研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文先天性肛門直腸畸形胚胎發(fā)育、基因表達(dá)及遠(yuǎn)期生活質(zhì)量的研究姓名：白玉作申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：王維林2002.4.1腸畸形的致病基因提供線索。③生活質(zhì)量調(diào)查：從身體、心理和社會等方面，調(diào)查和評估肛門直腸畸形病人術(shù)后30年以上生活質(zhì)量狀況。(實(shí)驗(yàn)材料動物：Wistar大鼠由中國醫(yī)科大學(xué)第二臨床學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。病例：①標(biāo)本來源：19例經(jīng)我科手術(shù)治療的先天性肛門直腸畸形患兒，男10例，女9例。年

2、齡2天～3歲。術(shù)中無菌條件下取直腸末端后壁腸組織，置于液氮中保存。術(shù)中收集后天性肛瘺、直腸外傷等5例無畸形患兒直腸齒狀線上約lon以內(nèi)水平處腸組織做對照，標(biāo)本處理同前。②隨訪的8例病人為30年前經(jīng)我科手術(shù)治療的肛門直腸畸形病人。試劑：①原位末端標(biāo)記細(xì)胞凋亡檢測試劑盒購于武漢博士德公司。②逆轉(zhuǎn)錄試劑盒購于大連寶生物工程公司。③2張芯片由上海博星基因芯片有限責(zé)任公司提供的發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)譜芯片，型號：GCs。方法①胚胎發(fā)育：用乙烯硫脲致畸孕

3、鼠產(chǎn)生泄殖腔畸形和無肛畸形胎鼠。胎齡125天一20天的正常及泄殖腔發(fā)育畸形的胎鼠正中矢狀面連續(xù)切片，HE染色，連續(xù)動態(tài)對比觀察泄殖腔及肛門直腸的發(fā)育過程。部分切片TUNEL染色，觀察細(xì)胞凋亡的分布。②基因表達(dá)：應(yīng)用RT。PCR方法檢測Hoxdl3基因在16例肛門直腸畸形病人和5例無畸形兒直腸末端的表達(dá)水平。應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片技術(shù)對3例先天性肛門直腸畸形患兒的直腸末端組織和無畸形兒直腸末端組織的基因表達(dá)譜進(jìn)行檢測。③生活質(zhì)量調(diào)查：隨訪8例