軟骨多糖對(duì)肺癌的抑制作用及分子作用機(jī)制.pdf

1、目的
　　 研究硫酸軟骨素對(duì)肺癌的抑制作用，并探討其分子作用機(jī)制。
　　 方法
　　 1、常規(guī)方法培養(yǎng)人肺癌A549細(xì)胞和Lewis小鼠肺癌細(xì)胞(LLC)，并給與含不同劑量CS的培養(yǎng)液培養(yǎng)A549細(xì)胞和LLC，用MTT法檢測(cè)CS對(duì)兩種細(xì)胞增殖的影響;用流式細(xì)胞術(shù)(FCM) PI染色法檢測(cè)CS對(duì)兩種細(xì)胞周期的影響;利用Transwell侵襲侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CS對(duì)兩種細(xì)胞侵襲能力的影響。
　　 2、建立小鼠Lew

2、is肺癌模型，分為模型對(duì)照組（生理鹽水0.2 ml/d）、CS高劑量組[500 mg/(kg·d)-1]、低劑量組[100 mg/(kg·d)-1]和環(huán)磷酰胺組[50 mg/(kg·w)-1]，分別腹腔注射給藥。記錄各組小鼠的體重、生存時(shí)間和生活狀況，計(jì)算脾指數(shù)、胸腺指數(shù)和抑瘤率。應(yīng)用免疫組化的方法檢測(cè)CD44、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果
　　 1、CS各濃度干預(yù)人肺癌A549，細(xì)胞生長(zhǎng)均受到

3、限制;24h IC25值和IC50值分別為6.6mg/ml和28.4mg/ml。以7.0mg/ml和30mg/mlCS干預(yù)A549細(xì)胞24h后，F(xiàn)CM結(jié)果顯示細(xì)胞明顯被抑制在S期，抑制率分別為48.28％和57.21％(P＜0.05)。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示，CS對(duì)A549細(xì)胞侵襲力抑制率分別為47.89％和88.63％(P＜0.05)。
　　 2、CS各濃度干預(yù)LLC，細(xì)胞生長(zhǎng)均受到限制;24h IC25值和IC50值

4、分別為7.9mg/ml和31.8mg/ml。以9.0mg/ml和30mg/mlCS干預(yù)LLC細(xì)胞24h后，F(xiàn)CM結(jié)果顯示細(xì)胞明顯被抑制在S期(P＜0.05)抑制率分別為42.80％和56.70％。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示，CS對(duì)LLC細(xì)胞侵襲力抑制率分別為54.32％和85.04％(P＜0.05)。
　　 3、CS各劑量組小鼠精神狀態(tài)、身體狀況較模型對(duì)照組和環(huán)磷酰胺組好，CS各劑量組和環(huán)磷酰胺組的胸腺指數(shù)、脾指數(shù)和抑瘤率均

5、明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)，高劑量組各指標(biāo)高于低劑量組(P＜0.05)。
　　 4、CS高、低劑量組和環(huán)磷酰胺組較生理鹽水組CD44、Bcl-2表達(dá)減少，Caspase-3表達(dá)增加(P＜0.05)。
　　 結(jié)論
　　 1、CS對(duì)人肺癌A549細(xì)胞和Lewis小鼠肺癌細(xì)胞具有抑制增殖和侵襲的作用，其機(jī)制可能與抑制細(xì)胞分裂周期有關(guān)。
　　 2、CS能明顯減弱小鼠Lewis肺癌細(xì)胞的增殖能力，提高Lewis